人脐带间充质干细胞抑制HepG2作用优化方法探索

发布时间：2017-07-26 19:31

  本文关键词：人脐带间充质干细胞抑制HepG2作用优化方法探索

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【摘要】：间充质干细胞(Mesenchymal stem cells, MSCs)是干细胞家族中重要的成员之一,是具有多向分化潜能和自我更新能力的成体干细胞。MSCs在多种疾病治疗中已经进入了临床应用阶段。课题组之前的研究结果显示,人脐带MSCs上清液能够影响肝癌细胞的生长,抑制肝癌细胞的增殖。本实验的目的在于探索不同方法对人脐带MSCs抑制肝癌细胞作用进行优化。方法：分别提取肿瘤坏死因子-α (Tumor necrosis factor-α, TNF-α)预处理人脐带MSCs的上清液、低氧预处理人脐带MSCs的上清液以及没有做任何处理的人脐带MSCs上清液,通过间接共培养的方法,将提取的上清液配制成不同浓度的条件培养基,TNF-α预处理组与低氧预处理组条件培养基直接处理HepG2,未处理组条件培养基与阿霉素(Adriamycin, ADM)、顺铂(Cisplatin, DDP)、5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil, 5-FU)、紫杉醇(Paclitaxel, PTX)、环磷酰胺(Cyclophosphamide, CTX)5种抗肿瘤药物共同处理HepG2,之后用MTS法检测HepG2增殖。结果：与人脐带MSCs上清液条件培养基处理组相比较,TNF-α预处理人脐带MSCs的条件培养基对HepG2的增殖没有影响,低氧预处理人脐带MSCs的条件培养基对HepG2增殖的抑制作用较弱；人脐带MSCs上清液条件培养基与抗肿瘤药物ADM、DDP、5-FU、PTX、CTX共同处理HepG2,对HepG2增殖的抑制作用较强(p0.01)。结论及意义：抗肿瘤药的应用能够加强人脐带MSCs上清液条件培养基对HepG2的抑制作用,人脐带MSCs上清液条件培养基与抗肿瘤药物合用对HepG2的抑制具有协同作用,有望用于联合用药。
【关键词】：人脐带间充质干细胞 低氧 肿瘤坏死因子-α 抗肿瘤药物 肝癌细胞
【学位授予单位】：内蒙古大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.7
【目录】：

• 摘要4-6
• 英文摘要6-10
• 缩略词中英文对照表10-11
• 第一章 间充质干细胞临床应用的研究进展11-18
• 1.1 MSCs的生物学特征11-14
• 1.1.1 MSCs的多向分化潜能12
• 1.1.2 MSCs的免疫调节能力12-13
• 1.1.3 MSCs的表面标志及鉴定13
• 1.1.4 MSCs的其他生物学特性13-14
• 1.2 MSCs的临床应用14-17
• 1.2.1 细胞移植治疗14-16
• 1.2.2 基因治疗16
• 1.2.3 MSCs在组织工程中的应用16-17
• 1.3 问题及展望17-18
• 第二章 人脐带间充质干细胞对肝癌细胞抑制作用的优化18-41
• 2.1 实验材料19-20
• 2.1.1 材料19
• 2.1.2 主要实验试剂19-20
• 2.1.3 主要实验仪器20
• 2.2 实验方法20-27
• 2.2.1 培养液配制20-21
• 2.2.2 人脐带MSCs的培养21-22
• 2.2.3 肝癌细胞HepG2的培养22-23
• 2.2.4 建立CoCl_2低氧模型23
• 2.2.5 条件培养基的提取23-24
• 2.2.6 不同浓度的条件培养基的配制24-25
• 2.2.7 增殖试剂盒检测HepG2的细胞增殖25-27
• 2.3 实验结果27-39
• 2.3.1 人脐带MSCs与肝癌细胞HepG2培养结果27
• 2.3.2 人脐带MSCs上清液抑制HepG2增殖27-28
• 2.3.3 TNF-α预处理的人脐带MSCs上清液对HepG2增殖无影响28-31
• 2.3.4 低氧处理的人脐带MSCs上清液对HepG2增殖抑制无促进作用31-33
• 2.3.5 抗肿瘤药物与人脐带MSCs协同作用抑制HepG2增殖33-39
• 2.4 讨论39-41
• 2.4.1 TNF-α预处理的人脐带MSCs上清液对HepG2增殖无影响39
• 2.4.2 低氧处理的人脐带MSCs上清液对HepG2的抑制无促进作用39-40
• 2.4.3 抗肿瘤药物与人脐带MSCs协同作用抑制HepG2增殖40-41
• 结论41-42
• 参考文献42-49
• 致谢49

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 赛音其木格,侯相麟,赵丽,李宁;成人骨髓间充质干细胞分化为成骨细胞的研究[J];临床血液学杂志;2005年04期

2 刘红;俞小芳;滕杰;邹建洲;方艺;刘少鹏;丁小强;;低氧预处理对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖、凋亡和坏死的影响[J];复旦学报(医学版);2012年06期

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本文编号：578009