绝经激素治疗对围绝经期和绝经后子宫肌瘤影响的实验研究
本文关键词:绝经激素治疗对围绝经期和绝经后子宫肌瘤影响的实验研究
【摘要】:研究目的:(1)探究绝经激素治疗(menopausal hormone treatment,MHT)对围绝经期和绝经后患者子宫肌瘤细胞的影响;1)比较不同MHT方式对围绝经期和绝经后患者同类大小子宫肌瘤细胞生长影响的差异;2)比较相同MHT方式对围绝经期和绝经后患者不同大小子宫肌瘤细胞生长影响的差异;(2)为指南中MHT针对子宫肌瘤慎用的诊治规范提供一定的实验验证。研究内容:(1)2015年9月-2016年3月对因多发性子宫肌瘤(3cm、3-5cm和5cm三类大小的子宫肌瘤均存在)引起临床症状或最大者超过5cm,未能行MHT,在东南大学附属中大医院手术切除肌瘤且经病理证实的MHT窗口期患者(围绝经期与绝经10年内、小于60岁)。获得患者知情同意并经过东南大学附属中大医院伦理委员会批准,于病理科取材结束后的废弃标本中选取这三类大小的肌瘤标本,取材大小均为1cm^3,分为A、B、C三组,每组5例。采用酶消化法,对研究标本进行子宫肌瘤细胞原代培养及传代,建立细胞系。(2)选取临床常用MHT药物的标准品,按照单孕激素、单雌激素、雌孕激素序贯用药的方式分为三组,外加一组对照组对建立的细胞系进行干预。各组药物用含10%小牛血清培养液稀释成下列浓度:1)戊酸雌二醇:30pg/ml;2)地屈孕酮:10ng/ml;3)戊酸雌二醇+后半周期地屈孕酮:30pg/ml+10ng/ml;4)对照组为不含激素培养液。药物干预48h后行细胞增殖试验和流式细胞术检测细胞周期,探究药物干预前后细胞生长的变化。探究不同MHT方式对窗口期患者同类子宫肌瘤细胞生长影响的差异和相同MHT方式对窗口期患者不同大小子宫肌瘤细胞生长影响的差异。研究结果:1.成功对子宫肌瘤进行原代培养,建立子宫肌瘤细胞系。并经免疫组织化学染色法证实。2.同类大小的子宫肌瘤,戊酸雌二醇30pg/ml、地屈孕酮组10ng/ml、戊酸雌二醇30pg/ml+地屈孕酮10ng/ml周期序贯对子宫肌瘤细胞生长均具有促进作用,与对照组相比,差异具有统计学意义(P0.05);各药物组进行组间比较,戊酸雌二醇+地屈孕酮周期序贯组、戊酸雌二醇组促进细胞增殖作用与地屈孕酮组相比,差异有统计学意义(P0.05);戊酸雌二醇+地屈孕酮周期序贯组促进肌瘤细胞增殖作用与戊酸雌二醇组相比,差异有统计学意义(P0.05)。3、在同种MHT干预方式下,不同大小的子宫肌瘤组细胞增殖情况无统计学差异(P0.05)。4、戊酸雌二醇30pg/ml、地屈孕酮组10ng/ml、戊酸雌二醇30pg/ml+地屈孕酮10ng'ml周期序贯均可推进G0/G1期子宫肌瘤细胞进入S期,提高PI,与对照组相比,差异具有统计学意义(P0.05);戊酸雌二醇组、戊酸雌二醇+地屈孕酮周期周期序贯组对细胞周期及PI的影响,与地屈孕酮组相比,差异具有统计学意义(P0.05);戊酸雌二醇+地屈孕酮周期序贯组对细胞周期及PI的影响,与戊酸雌二醇组相比,差异也具有统计学意义(P0.05)。结论:(1)同类大小的子宫肌瘤,戊酸雌二醇、地屈孕酮、戊酸雌二醇与地屈孕酮周期序贯均能增加子宫肌瘤体外增殖活性;戊酸雌二醇与地屈孕酮周期序贯、戊酸雌二醇促进子宫肌瘤细胞增殖作用强于地屈孕酮;戊酸雌二醇与地屈孕酮周期序贯促进子宫肌瘤细胞增殖作用强于戊酸雌二醇。(2)同种MHT药物干预方式对不同大小的子宫肌瘤细胞增殖的影响无明显差异。(3)MHT干预可影响离体培养的子宫肌瘤细胞的细胞周期,促进肌瘤细胞的增殖。
【关键词】:MHT 子宫肌瘤 围绝经期 绝经后期
【学位授予单位】:东南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R737.33
【目录】:
- 中文摘要5-7
- Abstract7-11
- 缩略词注释表11-12
- 前言12-14
- 文献综述14-22
- 第一章 实验材料22-24
- 1、研究标本22
- 2、主要仪器与设备22
- 3、主要试剂和耗材22-24
- 第二章 实验方法24-31
- 1、研究内容24-25
- 2、技术路线25-26
- 3、研究方法26-31
- 第三章 实验结果与分析31-38
- 1、人子宫肌瘤细胞的培养和鉴定31-32
- 2、MTT法检测MHT干预对子宫肌瘤细胞的影响32-36
- 3、流式细胞术检测MHT干预对子宫肌瘤细胞周期的影响36-38
- 第四章 讨论与结论38-41
- 第五章 展望41
- 参考文献41-44
- 附录44-47
- 附录一:作者简介44-45
- 附录二:攻读硕士学位期间参与的研究项目45-46
- 附录三:攻读硕士学位期间获得的研究成果46-47
- 致谢47
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,本文编号:590544
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