结直肠癌、癌前病变中klf6 mRNA与蛋白表达的研究

发布时间：2017-08-01 00:07

  本文关键词：结直肠癌、癌前病变中klf6 mRNA与蛋白表达的研究

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【摘要】：目的:检测抑癌基因KLF6(kruppel-like factor 6)在结直肠癌、癌前病变(结直肠高级别上皮内瘤变)及癌旁正常黏膜细胞中的表达水平,探讨KLF6表达水平分别在各类型组织中相互关系及在结直肠癌病程进展中的作用。方法:标本主要采集皖南医学院附属弋矶山医院结直肠癌手术切除后标本总共88例,其中包括病理切片证实为癌组织46例、癌前病变组织(均结直肠高级别上皮内瘤变)21例及正常肠管黏膜组织21例。并取距结直肠癌癌灶边缘5cm以上的癌旁正常结直肠组织作为对照组。将离体后标本分为两部分以备用,其中大约500毫克一部分离体后1小时内放入-80摄氏度冰箱中保存,以Q-PCR方法检测结直肠癌(结直肠癌实验组)、结直肠癌前病变(癌前病变实验组)及癌旁组织(对照组)中KLF6表达水平;取标本后大部分术后标本常规送病理科,后取病理蜡块用SP法进行免疫组化,并分别检测结直肠癌、癌前病变及癌旁正常组织中KLF6蛋白表达水平。结果:1免疫组化结果1.1 KLF6蛋白表达定位于结直肠癌细胞、癌前病变细胞及正常结直肠黏膜中的细胞核、细胞质、细胞膜。KLF6在结直肠癌组织中的表达水平显著低于癌旁正常组织(P0.05);KLF6在结直肠癌癌前病变组织中的表达水平显著低于癌旁正常组织(P0.05);KLF6在结直肠癌组织的表达与癌前病变组织中表达无明显差异(P0.05)。1.2 KLF6表达与浸润情况、分化程度、淋巴结转移、TNM分期有一定相关性(P0.05);KLF6表达与患者的年龄、性别、肿瘤组织学类型、癌灶大小无明显相关性(P0.05)。2 Q-PCR实验结果基因的相对表达量用比较CT值计算,其计算公式为:F_1=2~-ΔΔCT,ΔΔCT值=(结直肠癌组目的基因CT值-结直肠癌组内参基因CT值)-(结直肠癌癌旁组目的基因CT值-癌旁组内参基因CT值);F_2=2~-ΔΔCT,ΔΔCT值=(癌前病变组目的基因CT值-癌前病变组内参基因CT值)-(结直肠癌癌旁组目的基因CT值-癌旁组内参基因CT值)。以癌旁组织为阴性对照组,F以正常组织的ΔCt值作为参照。同样类似的方法分别两两比较结直肠癌、癌前病变及正常组织中KLF6基因相对表达量,实验结果显示,正常组织中KLF6基因相对表达量高于结直肠癌癌前组织,差异有统计学意义(P0.05);正常组织中KLF6基因相对表达量高于结直肠癌组织,差异有统计学意义(P0.05);结直肠癌癌前组织中KLF6基因相对表达量高于结直肠癌组织,差异有统计学意义(P0.05)。结论:1 KLF6在结直肠癌组织中的表达水平明显低于结直肠癌癌旁正常肠管组织(P0.05);KLF6在结直肠癌癌前病变组织中的表达水平明显低于癌旁正常肠管组织(P0.05);KLF6在结直肠癌组织的表达与癌前病变组织中表达需要进一步的确定。2 KLF6表达与浸润情况、分化程度、淋巴结转移、TNM分期有一定相关性(P0.05);KLF6表达与患者的年龄、性别、肿瘤组织学类型、癌灶大小无明显相关性(P0.05)。所以KLF6基因在结直肠癌疾病的发展中起到了一定的作用。
【关键词】：结直肠癌 癌前病变 KLF6基因
【学位授予单位】：皖南医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R735.34
【目录】：

• 中英文缩略词对照表5-7
• 摘要7-9
• ABSTRACT9-11
• 前言11-15
• 研究材料与方法15-25
• 1 主要仪器及实验试剂15-16
• 1.1 主要仪器型号及生产厂家15
• 1.2 主要试剂及生产厂家15-16
• 2 实验方法16-24
• 2.1 免疫组化16-19
• 2.2 Q-PCR19-24
• 3 统计方法24-25
• 结果25-31
• 讨论31-36
• 结论36-37
• 参考文献37-43
• 综述 经肛门直肠全系膜切除术现状及研究进展43-50
• 参考文献47-50
• 作者简介及读研期间主要科研成果50-51
• 致谢51

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本文编号：601684