胰腺癌血清外泌体微小RNA的临床诊断价值研究

发布时间：2017-08-11 02:17

  本文关键词：胰腺癌血清外泌体微小RNA的临床诊断价值研究

  更多相关文章： 胰腺癌 exosome microRNA 肿瘤标志物

【摘要】：研究背景：胰腺癌是一种恶性程度很高的肿瘤,且发病率趋增,预后差,5年生存率低,究其原因主要是与现有的诊断胰腺癌的标志物的特异性及敏感性不高,早期诊断率低,早期不能及时得到有效治疗有关。据报道血清exosomal microRNA(exosomal miRNA)表达水平的变化与胰腺癌分期、分化等临床病理因素具有相关性,是一种良好的血清学肿瘤标志物,但是在胰腺癌中关于血清exosomal miRNA的报道仍然较少。本研究旨在通过体外实验、动物实验及临床病例实验分析寻找与胰腺癌显著相关的血清exosomal miRNA标志物。研究目标：寻找与胰腺癌相关的血清exosomal miRNA标志物。研究内容：(1)体外实验：体外培养人胰腺癌细胞株(PANC-1),通过超滤离心技术提取exosome, PCR Array检测PANC-1 exosome中84种胰腺癌相关miRNA的表达水平并差异分析；(2)动物实验：利用PANC-1建立胰腺癌裸鼠模型,分别获取实验组(A组)及对照组(B组)血清样本以及肿瘤模型组瘤体样本,提取血清exosome,通过RT-PCR检测A组和B组小鼠中exosomal miR-202-3p、miR-101-3p等9种高表达水平的血清exosomal miRNA;检测实验组20份血清样本中exosomal miR-202-3p的表达水平,并分析其与肿瘤重量关系。(3)临床病例实验：选择两种与胰腺癌显著相关的血清exosomal miR-202-3p和miR-101-3p作为检测对象。收集胰腺癌患者及非胰腺癌患者的血清,通过RT-PCR技术检测血清exosomal miR-202-3p和miR-101-3p的表达水平,通过与胰腺癌分期、分化等临床病理因素的相关性分析来评估其临床诊断胰腺癌的价值。研究结果：(1)PCR Array检测PANC-1 exosome中84种与胰腺癌相关的miRNA,筛查出了miR-202-3p、miR-101-3p等9种相对高表达的exosomal miRAN;(2)肿瘤动物模型组中9种exosomal miRAN表达水平均高于正常对照组,其中miR-202-3p和miR-101-3p的表达水平较对照组分别高2.33和2.03倍；且随肿瘤增大,miR-202-3p表达水平逐渐升高；(3)胰腺癌组血清中exosomal miR-202-3p和miR-101-3p表达水平显著高于非胰腺癌组,血清exosomal miR-202-3p的表达水平与胰腺癌分期和远处转移存在相关性。研究结论：(1)实验表明通过血清检测exosomal miRNA的方法也可以用于胰腺癌的临床诊断；(2)胰腺癌动物模型中可检测到较对照组相对高表达的exosomal miRNA,其中miR-202-3p和miR-101-3p异常高表达,且随肿瘤进展,miR-202-3p的表达水平逐渐升高,有利于指导胰腺癌诊断和病情进展相关的临床研究；(3)胰腺癌中具有较高表达水平的exosomal miR-202-3p和miR-101-3p可作为临床诊断及鉴别诊断胰腺癌的标志物,而exosomal miR-202-3p的异常表达对于胰腺癌的临床分期、手术指征的把握及预后判断具有十分重要的指导价值。
【关键词】：胰腺癌 exosome microRNA 肿瘤标志物
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R735.9
【目录】：

• 致谢4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 缩略词表10-11
• 主要实验设备仪器11-14
• 绪论14-16
• 1.1 材料与方法16-23
• 1.2 结果23-29
• 1.3 讨论29-32
• 1.4 结论32-33
• 参考文献33-38
• 综述38-66
• 参考文献48-66
• 附表66-70
• 作者简历及在学期间所取得的科研成果70

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本文编号：653772