miRNA-101在膀胱癌中对EZH2基因表达的调控作用

发布时间：2017-08-14 02:29

  本文关键词：miRNA-101在膀胱癌中对EZH2基因表达的调控作用

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【摘要】：目的研究miRNA-101(miR-101)通过对EZH2基因的靶向调控作用,介导膀胱癌的发生发展。方法1.运用Real-time PCR检测miR-101在膀胱癌及相应的癌旁组织中的表达量;2.采用组织芯片,通过免疫组织化学法检测EZH2基因在膀胱癌组织及相应的癌旁组织中的表达情况;3.运用RT-PCR及Western blot分别检测EZH2基因在膀胱癌及相应的癌旁组织中mRNA及蛋白表达情况;4.运用mi RNA预测软件:miRanda、PicTar和Targetscan,预测与EZH2 mRNA3'-UTR有互补结合位点的miRNA;5.运用双荧光素酶基因报告系统检测miR-101与EZH2 mRNA 3'-UTR是否有互补结合靶点;结果通过Real-time PCR检测显示mi R-101在膀胱癌组织中转录水平均低于相应的癌旁组织(P0.05),提示其可能在膀胱癌的发生、发展中起到了抑癌作用;通过免疫组织化学法、RT-PCR、Western blot法检测显示EZH2在膀胱癌组织中表达量均高于相应的癌旁组织(P0.05),提示其可能在膀胱癌的进展中发挥了促癌作用;通过miRanda、PicTar和Targetscan三个软件检测显示miR-101与EZH2 3'-UTR有互补结合位点;通过双荧光素酶基因报告系统检测进一步证明miR-101与EZH2 3'-UTR有互补结合位点,并抑制其表达;结论miRNA-101通过负向调控EZH2基因的表达,发挥抑制膀胱癌的作用效应。
【关键词】：膀胱癌 miRNA-101 EZH2 调控
【学位授予单位】：桂林医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R737.14
【目录】：

• 中文摘要5-7
• ABSTRACT7-9
• 英汉缩略词对照表9-11
• 前言11-13
• 1 材料与方法13-16
• 1.1 实验材料13
• 1.2 实验仪器13-14
• 1.3 实验试剂14-15
• 1.4 试剂的配制15-16
• 2 实验方法16-34
• 2.1 膀胱癌细胞的培养16-18
• 2.2 免疫组织化学法18-20
• 2.3 逆转录聚合酶链反应20-25
• 2.4 实时定量聚合酶链反应25-27
• 2.5 蛋白印迹实验27-30
• 2.6 生物学软件预测miRNA与靶基因的结合位点30-31
• 2.7 双荧光素酶基因报告系统31-34
• 3 实验结果34-45
• 3.1 免疫组织化学法检测EZH2在不同组织中的表达34-37
• 3.2 RT-PCR检测EZH2mRNA在不同组织中的表达37-39
• 3.3 Western blot实验检测EZH2蛋白在不同组织中的表达39-41
• 3.4 Real-Time PCR检测miR-101在不同组织中的表达41-42
• 3.5 生物学软件预测mi RNA与靶基因的结合位点42-43
• 3.6 双荧光素酶基因报告系统43-45
• 4 讨论45-51
• 5 结论51-52
• 参考文献52-58
• 附录（综述）58-71
• 参考文献67-71
• 攻读学位期间发表的学术论文目录71-72
• 致谢72

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 Fang Yang;Li-Zhi Lv;Qiu-Cheng Cai;Yi Jiang;;Potential roles of EZH2, Bmi-1 and mi R-203 in cell proliferation and invasion in hepatocellular carcinoma cell line Hep3B[J];World Journal of Gastroenterology;2015年47期

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 王伟;MiR-34a在人膀胱癌组织中的表达[D];河北联合大学;2011年

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本文编号：670306