淋巴瘤中RASSF5A基因启动子区甲基化状态与mRNA表达的研究

发布时间：2017-08-14 18:00

  本文关键词：淋巴瘤中RASSF5A基因启动子区甲基化状态与mRNA表达的研究

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【摘要】：目的:淋巴瘤是十大恶性肿瘤之一,在每年新诊断的血液系统肿瘤中约占一半,且发病率每年呈上升趋势。按细胞来源淋巴瘤分为B细胞淋巴瘤和T细胞淋巴瘤,B细胞淋巴瘤中以弥漫大B细胞淋巴瘤最为多见。淋巴瘤起病的症状较为多样,多以无痛性进行性淋巴结肿大、局部肿块及相应器官压迫症状为最初表现,侵袭性较高的类型淋巴瘤进展迅速,一部分经联合化疗可持续缓解,但多数患者的治疗疗效不佳,预后较差。因此关注淋巴瘤病因学研究、早期诊断及靶向治疗十分必要。随着对肿瘤研究的不断深入,发现除了基因突变外,表观遗传学机制在肿瘤的发生及发展中也起着重要的作用。DNA甲基化是表观遗传学重要的组成部分,且DNA甲基化具有可逆性的特点,所以DNA甲基化是目前肿瘤相关研究中的热点。RASSF5(也叫NORE1或RAPL),是Ras相关区域家族(RASSF1-RASSF10)成员之一,位于染色体1q32.1。由于选择性剪切和启动子的不同,RASSF5分为RASSF5A、RASSF5B和RASSF5C三种不同的转录本。目前已知RASSF5A和RASSF5C转录本具有生物学功能,也分别被叫做NORE1A和NORE1B(或RAPL),两者共享着相同的RA和SARAH域,不同的是RASSF5A携带着RASSF5C所没有的C1结构域。其中RASSF5A在肿瘤中的研究较为深入。本研究通过应用甲基化特异性聚合酶链反应(Methylation-Specific PCR,MSP)和逆转录-聚合酶链反应(Reverse Transcriptase-PCR,RT-PCR)的方法探讨淋巴瘤患者和正常人外周血中RASSF5A基因启动子区甲基化状态与m RNA表达水平,并研究它们与临床资料之间的关系,为淋巴瘤的发病机制、临床诊断及治疗提供一定的理论依据。方法:1应用甲基化特异性聚合酶链反应(Methylation-Specific PCR,MSP)方法检测弥漫大B细胞型淋巴瘤、T细胞淋巴瘤患者和正常人外周血中RASSF5A基因甲基化状态,并分析RASSF5A基因甲基化与临床资料之间 的关系。2应用逆转录-聚合酶链反应(Reverse Transcriptase-PCR,RT-PCR)方法检测弥漫大B细胞型淋巴瘤、T细胞淋巴瘤患者和正常人外周血中的RASSF5A基因m RNA的相对表达,并分析RASSF5A基因m RNA表达与临床资料之间的关系。3应用统计软件SPSS19.0对数据进行统计学分析。结果:1弥漫大B细胞淋巴瘤患者外周血中RASSF5A基因的甲基化及表达。1.1弥漫大B细胞淋巴瘤患者外周血中RASSF5A基因的甲基化RASSF5A基因在弥漫大B细胞型淋巴瘤中的甲基化率为64.9%(48/74),明显高于正常人中的甲基化率7.1%(3/42)(P0.05)。RASSF5A基因在弥漫大B细胞型淋巴瘤中的甲基化与患者的LDH、IPI评分及Ki-67相关(P0.05);与患者的性别、年龄、骨髓与结外累计与否、A/B症状、临床分期、生发中心或非生发中心、β2微球蛋白均无关(P0.05)。1.2弥漫大B细胞淋巴瘤患者外周血中RASSF5A基因的m RNA表达RASSF5A基因在弥漫大B细胞淋巴瘤中的m RNA表达量为0.54±0.17,低于正常人m RNA的表达量0.86±0.10(P0.05)。RASSF5A基因在弥漫大B细胞淋巴瘤中m RNA的表达量与患者的IPI评分及结外累计相关(P0.05);与患者的性别、年龄、骨髓累计与否、A/B症状、临床分期、生发中心或非生发中心、LDH、β2微球蛋白、Ki-67均无关(P0.05)。1.3弥漫大B细胞淋巴瘤中RASSF5A基因甲基化状态与其m RNA表达之间的关系弥漫大B细胞淋巴瘤中RASSF5A基因启动子甲基化阳性,其m RNA相对表达量平均为0.51±0.18,甲基化阴性的m RNA相对表达量平均为0.60±0.17,两者差异有统计学意义(P0.05)。2 T细胞淋巴瘤患者外周血中RASSF5A基因的甲基化及表达。2.1 T细胞淋巴瘤患者外周血中RASSF5A基因的甲基化RASSF5A基因在T细胞型淋巴瘤中的甲基化率为73.8%(31/42),明显高于正常人外周血中的甲基化率7.1%(3/42)(P0.05)。 RASSF5A基因在T细胞型淋巴瘤中的甲基化与患者的临床分期、结外累及及Ki-67相关(P0.05);与患者的性别、年龄、骨髓累计与否、A/B症状、LDH评分、β2微球蛋白均无关(P0.05)。2.2 T细胞淋巴瘤患者外周血中RASSF5A基因的m RNA表达RASSF5A基因在T细胞淋巴瘤中的m RNA表达量为0.52±0.18,低于正常人m RNA的表达量0.86±0.10(P0.05)。RASSF5A基因在T细胞淋巴瘤中m RNA的表达量与患者的临床分期、结外累及相关(P0.05);与患者的性别、年龄、骨髓累计与否、A/B症状、LDH、β2微球蛋白、Ki-67均无关(P0.05)。2.3 T细胞淋巴瘤中RASSF5A基因甲基化状态与其m RNA表达之间的关系T细胞淋巴瘤中RASSF5A基因启动子甲基化阳性,其m RNA相对表达量平均为0.50±0.15,甲基化阴性的m RNA相对表达量平均为0.63±0.12,两者差异有统计学意义(P0.05)。结论:1弥漫大B细胞淋巴瘤和T细胞淋巴瘤患者外周血中RASSF5A基因启动子甲基化状态明显高于正常人,提示RASSF5A基因启动子甲基化可能是弥漫大B细胞淋巴瘤和T细胞淋巴瘤发生的机制之一。2弥漫大B细胞淋巴瘤和T细胞淋巴瘤患者外周血中RASSF5A基因m RNA的表达明显低于正常人,提示RASSF5A基因可能在弥漫大B细胞淋巴瘤和T细胞淋巴瘤中主要起抑癌基因的作用。3弥漫大B细胞淋巴瘤和T细胞淋巴瘤患者外周血中RASSF5A基因启动子呈高甲基化,而其m RNA表达呈降低的状态,提示RASSF5A基因甲基化可能是导致弥漫大B细胞淋巴瘤和T细胞淋巴瘤中m RNA表达沉默的表观遗传学机制之一。4弥漫大B细胞淋巴瘤和T细胞淋巴瘤患者外周血中,RASSF5A基因启动子甲基化与患者的IPI评分、LDH、Ki-67、临床分期和结外累及相关,提示RASSF5A基因启动子甲基化可能与弥漫大B细胞淋巴瘤和T细胞淋巴瘤的侵袭性、恶性进程及预后有关。
【关键词】：淋巴瘤 表观遗传学 甲基化 表达 RASSF5A
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R733.1
【目录】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 英文缩写11-12
• 前言12-13
• 材料和方法13-22
• 结果22-25
• 附图25-26
• 附表26-34
• 讨论34-37
• 结论37
• 参考文献37-40
• 综述RASSF基因家族在肿瘤中的研究进展40-56
• 参考文献47-56
• 致谢56-57
• 个人简历57

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6 朱雄增;;组合性淋巴瘤和灰区淋巴瘤[A];第十次全国淋巴瘤学术会议论文汇编[C];2007年

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本文编号：673937