MMS2和P53基因对结肠癌细胞增殖与凋亡的影响

发布时间：2017-08-16 00:13

  本文关键词：MMS2和P53基因对结肠癌细胞增殖与凋亡的影响

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【摘要】：目的探讨MMS2基因与P53基因在人结肠癌细胞THC-8307中相互作用关系以及二者共同对人高分化结肠癌细胞(THC-8307)增殖与凋亡的调控作用。方法以脂质体转染技术将MMS2 siRNA与P53 siRNA分别转染结肠癌细胞THC-8307以沉默相对应靶基因。转染48小时后,实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)及蛋白印记法(Western Blot)分别检测各组细胞中MMS2与P53的mRNA和蛋白表达量水平,以检测其各自沉默效率。选择沉默效率具有统计学意义的处理细胞作为试验组细胞,同时将未作处理的THC-8307作为空白对照组,转染阴性质粒细胞作为阴性对照组。采用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)及蛋白印记法(Western Blot)分别检测沉默MMS2基因48h后P53基因在mRNA和蛋白水平表达量的变化以及沉默P53基因后MMS2基因在mRNA和蛋白水平表达量的变化并分析。以流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)检测各组细胞的凋亡率,观察MMS2基因与P53基因在对结肠癌THC-8307细胞Z增殖与凋亡水平的调控作用。结果实验组与两对照组相比,沉默MMS2基因的人高分化结肠癌细胞THC-8307内P53基因在mRNA与蛋白水平表达量显著升高(P0.05);同时,沉默P53基因的结肠癌细胞THC-8307的细胞内MMS2基因在mRNA与蛋白水平表达量显著升高(P0.05);两对照组间无明显差异(P0.05)。沉默MMS2基因实验组其早期凋亡与晚期凋亡率均增加(P0.05),沉默P53基因实验组其细胞凋亡率与对照组相比变化无统计学意义(P0.05)。结论MMS2和P53基因在结肠癌细胞中存在一定程度相互反向调控关系;二者对人结肠癌细胞THC-8307增殖与凋亡方面有一定共同调控作用,MMS2基因诱导结肠癌细胞THC-8307凋亡可能是通过激活P53而实现的。
【关键词】：MMS2 P53 RNA干扰 人结肠癌细胞 细胞凋亡
【学位授予单位】：宁夏医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R735.35
【目录】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-11
• 前言11-15
• 材料与方法15-30
• 结果30-44
• 讨论44-51
• 结论51-52
• 参考文献52-59
• 文献综述 MMS2和P53基因对结肠癌细胞增殖与凋亡的影响59-78
• 综述参考文献70-78
• 致谢78-79
• 攻读学位期间发表的学术论文目录79

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本文编号：680556