人胚胎干细胞抗肿瘤作用的体外初步研究
发布时间:2017-08-16 01:19
本文关键词:人胚胎干细胞抗肿瘤作用的体外初步研究
【摘要】:目的1.研究体外共培养情况下人胚胎干细胞H9对肝癌Hep G2细胞的抑制作用。2.研究人胚胎干细胞H9与乳腺癌细胞共培养上清液对乳腺癌MDA-MB-231细胞的体外抑制作用。方法1.建立人胚胎干细胞(H9)与肝癌HepG2细胞共培养体系,显微镜下观察胚胎干细胞对肿瘤细胞生物学行为的影响,流式细胞仪检测HepG2细胞对肿瘤细胞的凋亡与周期的影响。2.建立人胚胎干细胞(H9)与乳腺癌MDA-MB-231细胞接触式共培养体系,收集共培养上清液。以单独培养的H9细胞上清为对照,显微镜下观察共培养上清液对肿瘤细胞生物行为学的影响,用MTT法检测上清液对MDA-MB-231细胞增殖的影响,Hoechst染色及流式细胞术检测上清液对肿瘤细胞的凋亡影响;Transwell小室法检测上清液对肿瘤细胞侵袭和迁移的影响。结果1.共培养过程中,肝癌HepG2细胞生长受到抑制,随共培养时间延长,细胞数量逐渐减少,出现老化或凋亡迹象;流式细胞术检测发现HepG2细胞凋亡率显著增加,细胞周期被阻滞于G0/G1期。2.人胚胎干细胞(H9)与乳腺癌MDA-MB-231共培养上清液处理后的乳腺癌MDA-MB-231细胞形态学发生变化,出现凋亡迹象;Hoechst33258染色后荧光显微镜下可观察到典型的细胞凋亡形态学改变,表现为核缩小、核碎裂等;细胞凋亡率升高,细胞生存率和细胞侵袭、迁移能力均降低,而对照组MDA-MB-231细胞几乎没有受到影响。结论体外共培养情况下人胚胎干细胞H9对肝癌Hep G2细胞有一定抑制作用;人胚胎干细胞H9与人乳腺癌MDA-MB-231细胞共培养的上清液对MDA-MB-231有一定的体外抑癌效应。综上所述,人胚胎干细胞一定条件下在体外对肿瘤细胞有某种程度的抑制作用。
【关键词】:胚胎干细胞 共培养 上清液 肿瘤 凋亡
【学位授予单位】:重庆医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R73-36
【目录】:
- 英汉缩略语名词对照4-5
- 中文摘要5-7
- 英文摘要7-9
- 前言9-12
- 参考文献10-12
- 第一部分 人胚胎干细胞与肝癌细胞共培养现象的初步观察12-20
- 1 材料12-13
- 2 方法13-17
- 3 结果17-18
- 4 讨论18
- 参考文献18-20
- 第二部分 乳腺癌细胞-干细胞共培养上清液对乳腺癌细胞的体外抗肿瘤作用研究20-30
- 1 材料20-21
- 2 方法21-24
- 3 结果24-27
- 4 讨论27-28
- 参考文献28-30
- 全文总结30-31
- 附图31-36
- 文献综述36-47
- 参考文献43-47
- 致谢47-48
- 攻读硕士学位期间发表的文章48
【参考文献】
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,本文编号:680808
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