人源全分子抗c-Met抗体的制备及对鼻咽癌细胞生物学特性的影响

发布时间：2017-08-19 07:35

  本文关键词：人源全分子抗c-Met抗体的制备及对鼻咽癌细胞生物学特性的影响

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【摘要】：目的 :利用基因工程技术制备全分子人源抗c-Met抗体,分析该抗体免疫学特性,并观察该全分子抗体对鼻咽癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:设计引物扩增抗c-Met Fab抗体的重轻链可变区序列,将其分别克隆到真核表达载体p FUSECHIg-h G1和p FUSE-CLIg-hκ中。转染真核细胞,表达产物用Protein A柱纯化。通过ELISA、Western blot和免疫荧光等方法鉴定该抗体的免疫学特性。CCK-8检测抗体对人鼻咽癌细胞增殖的抑制作用,划痕实验、Transwell侵袭实验分析抗体对人鼻咽癌细胞迁移和侵袭的影响。结果:成功重组全分子人源抗c-Met抗体的表达载体,获得的全分子抗体保留了与抗原的特异性结合活性。CCK-8实验中结果显示全分子抗体能抑制c-Met阳性鼻咽癌细胞CNE2和HONE1的增殖。细胞划痕和Transwell侵袭实验结果显示全分子抗体能抑制c-Met阳性细胞CNE2和HONE1的迁移和侵袭能力。结论:本研究成功制备人源全分子抗c-Met抗体,该抗体有明显的中和活性,为探索鼻咽癌分子靶向治疗奠定了基础。
【作者单位】： 南京医科大学第二附属医院耳鼻咽喉科;南京医科大学附属南京妇幼保健院妇产科;南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室;南京军区军事医学研究所;
【关键词】： 鼻咽癌 c-Met 人源抗体
【基金】：江苏省科技厅临床医学科技专项计划(BL2013038) 国家自然科学基金(81502673)
【分类号】：R739.63
【正文快照】： 南京医科大学学报鼻咽癌是我国十大高发恶性肿瘤之一,在南方地区发生率极高。目前鼻咽癌的治疗方法主要采用放疗联合化疗,但其疗效不佳,5年生存率不足60%,并且治疗产生的不良反应可进一步损伤机体免疫系统功能[1-2]。随着分子生物学的发展,人们对鼻咽癌的研究进入基因水平,有

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本文编号：699492