RACK1在胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞生长增殖的影响与机制探讨

发布时间：2017-08-25 04:34

  本文关键词：RACK1在胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞生长增殖的影响与机制探讨

  更多相关文章： 蛋白激酶1活化受体RACK1 β-catenin Wee1 胃癌 HGC27细胞

【摘要】：目的研究蛋白激酶1活化受体(Receptor of activated C Kinase 1,RACK1),在胃癌组织中的表达及其与胃癌发生发展的关系。探讨RACK1过表达对胃癌细胞生长增殖的影响与作用机制。本研究可望为寻找胃癌新的治疗靶点奠定实验基础。方法1、采用免疫组化SP法检测RACK1和β-连环蛋白(β-catenin)在70例胃癌组织标本中的表达水平以及在30例距癌组织边缘10cm以上的癌旁胃组织中的表达水平,分析RACK1在胃癌组织标本中的表达情况及其与胃癌临床病理特征的关系。2、体外培养人低分化胃癌细胞株HGC27,通过基因转染技术过表达RACK1基因,观察RACK1基因上调对胃癌细胞株生长增殖的影响。转染实验分为未处理组、空载体转染组、RACK1基因转染组。采用MTT法检测各组细胞增殖情况。采用RT-PCR和Western blot方法分别检测各组细胞RACK1和Wee1基因m RNA和蛋白质的表达水平。3、免疫共沉淀证实RACK1与Wee1在胃癌细胞内是否存在相互作用。间接免疫荧光实验观察RACK1与Wee1在HGC27胃癌细胞内是否存在共定位。结果1、RACK1在胃癌组织中的表达水平明显低于癌旁正常胃组织(p0.05),且表达水平的高低与TNM分期、肿瘤的分化程度、以及有无淋巴结转移有关。2、β-catenin膜表达的缺失率也与胃癌组织的分化程度、TNM分期以及有无淋巴结转移有关,且Rack1和β-catenin呈显著负相关。3、胃癌细胞HGC27中RACK1的m RNA和蛋白表达水平明显低于正常胃黏膜细胞GESY,过表达RACK1基因可下调Wee1蛋白表达,并抑制HGC27胃癌细胞株生长增殖。4、免疫共沉淀证实RACK1与Wee1在胃癌细胞内存在相互作用,免疫荧光观察RACK1与Wee1共定位在HGC27胃癌细胞的细胞质内。结论1、RACK1在胃癌组织中的异常表达可能与胃癌的发生发展有关,本研究提示低表达RACK1可能是胃癌预后不良的一个重要指标。2、过表达RACK1抑制人低分化HGC27胃癌细胞株的生长增殖,其机制可能与RACK1和Wee1相互作用有关。
【关键词】：蛋白激酶1活化受体RACK1 β-catenin Wee1 胃癌 HGC27细胞
【学位授予单位】：锦州医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R735.2
【目录】：

• 中文论著摘要4-6
• 英文论著摘要6-8
• 英文缩略语8-9
• 前言9-10
• 实验材料与方法10-26
• 结果26-35
• 讨论35-37
• 结论37-38
• 本研究创新性的自我评价38-39
• 参考文献39-42
• 附录42-57
• 一、文献综述 支架蛋白RACK1的生物学功能及其与肿瘤发生发展关系的研究进展42-54
• 参考文献49-54
• 二、在学期间科研成绩54-55
• 三、致谢55-56
• 四、个人简历56-57

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本文编号：735101