异常剪接组织因子在初治急性早幼粒细胞白血病患者治疗前和缓解后mRNA水平的变化及意义
发布时间:2017-08-29 06:43
本文关键词:异常剪接组织因子在初治急性早幼粒细胞白血病患者治疗前和缓解后mRNA水平的变化及意义
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【摘要】:目的急性早幼粒细胞白血病(APL)是急性粒细胞白血病(AML)中的一个特殊亚型,在早期常伴有严重的凝血异常,是APL患者早期死亡的主要原因。组织因子在凝血过程中发挥着重要的作用。异常剪接组织因子(alternatively spliced tissue factor,as TF)作为组织因子的一种可溶性剪接体,其在凝血过程中发挥的作用尚有争议,且其与肿瘤的进展、转移及肿瘤新生血管形成有着一定的关系,目前有关APL患者中的as TF表达未见报道。本研究旨在建立as TF表达量的检测方法,并对初治APL患者as TF进行检测,比较初诊APL患者和缓解(CR)后APL患者as TF的m RNA水平的表达情况,并探讨其临床意义。方法(1)采用Primer Express 2.0设计as TF引物,通过在不同温度下对急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4 as TF及内参基因标准曲线的检测,建立荧光染料实时定量PCR检测as TF表达量的方法,并对其进行验证。(2)作为分析as TF m RNA表达水平与APL患者外周血白细胞数的关系:Spearman’s相关性分析as TF与APL患者白细胞数之间的相关性。采用荧光染料实时定量PCR(q RT-PCR)技术动态检测33例APL患者治疗前和缓解后外周血as TF m RNA水平表达情况,并与15例非APL急性粒细胞白血病患者及15例正常健康者外周血as TF m RNA表达水平进行比较分析。结果(1)成功建立了采用q PCR技术检测as TF m RNA方法,并对其进行验证,证实了用该引物检测as TF表达量的可行性。(2)as TF m RNA表达水平与APL患者外周血白细胞的关系:as TF与APL患者外周血白细胞无相关性(P0.05),排除了白细胞数对as TF表达量的影响。as TF m RNA表达水平:APL患者缓解后as TF m RNA水平表达高于治疗前(P0.05),正常健康者和非APL的AML患者as TF表达量均高于APL患者治疗前(P0.01),但非APL的AML患者与正常健康者之间as TF表达量未见明显差异(P0.05)。结论(1)成功建立了q PCR技术检测人外周血as TF m RNA的方法。(2)as TF在APL患者缓解后的表达高于治疗前,正常健康者as TF表达明显高于治疗前APL患者,而缓解后总TF m RNA水平较治疗前处于低水平,提示as TF在APL患者中凝血作用较fl TF低,并推测PML/RARa可能是打破APL患者体内fl TF和as TF平衡的根本原因。
【关键词】:急性早幼粒细胞白血病 组织因子 异常剪接组织因子
【学位授予单位】:苏州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R733.7
【目录】:
- 中文摘要4-6
- abstract6-9
- 第一部分:荧光染料实时定量PCR检测asTF表达量方法的建立与验证9-16
- 前言9
- 材料与方法9-13
- 结果13-15
- 讨论15-16
- 第二部分:异常剪接组织因子在初治急性早幼粒细胞白血病患者治疗前和缓解后mRNA水平的变化及意义16-25
- 前言16-18
- 材料与方法18-20
- 实验结果20-22
- 讨论22-25
- 参考文献25-27
- 综述27-37
- 参考文献33-37
- 中英文对照缩略词表37-39
- 攻读学位期间公开发表的论文39-40
- 致谢40-42
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,本文编号:751878
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