胡椒碱通过线粒体通路诱导人胃癌BGC-823细胞凋亡的机制研究

发布时间：2017-08-30 05:40

  本文关键词：胡椒碱通过线粒体通路诱导人胃癌BGC-823细胞凋亡的机制研究

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【摘要】：研究目的：本实验旨在探讨胡椒碱对人胃癌细胞株BGC-823的抑制作用诱导及其验证其是否可能通过线粒体凋亡通路诱导凋亡；研究方法：①采用四甲基偶氮唑蓝显色法,检测胡椒碱对体外培养的人胃癌细胞株BGC-823不同浓度的增殖能力的抑制作用及其时间的相关性；②采用划痕实验法检测胡椒碱对体外培养的人胃癌细胞株BGC-823迁移能力的影响及其时间相关性；③采用小室侵袭实验检测胡椒碱对体外培养的人胃癌细胞株BGC-823侵袭能力的影响及其时间相关性；④采用流式细胞仪检测胡椒碱对人胃癌细胞株BGC-823凋亡的影响及其浓度相关性；⑤采用罗丹明检测法胡椒碱对人胃癌细胞株BGC-823线粒体电位变化的影响及其浓度相关性；⑥采用RT-PCR检测法检测胡椒碱对人胃癌细胞株BGC-823线粒体凋亡通路上相关基因的表达及其浓度相关性；⑦运用Western法检测胡椒碱对线粒体凋亡通路相关蛋白表达的干预及其浓度相关性。研究结果：①胡椒碱作用于人胃癌细胞株BGC-823后,细胞的增殖的能力明显减小,并且呈浓度依赖性及时间相关性；②胡椒碱作用于人胃癌细胞株BGC-823后,人胃癌细胞株BGC-823细胞的迁移能力明显下降,并且呈现浓度依赖性及时间相关性；③胡椒碱作用于人胃癌细胞株BGC-823后,穿越transwell小室的细胞数量较对照组明显减少,其侵袭抑制率呈明显的浓度依赖性及时间相关性；④胡椒碱作用于人胃癌细胞株BGC-823 2 4h后出现明显的细胞凋亡,并呈一定的浓度依赖性；⑤胡椒碱作用于人胃癌细胞株BGC-823 24h后,线粒体电位明显下降,并呈浓度依赖性；⑥胡椒碱作用于人胃癌细胞株BGC-823 24h后,细胞线粒体通路凋亡相关基因Bax、Bak随着胡椒碱浓度升高,其表达量越高；Bcl-2、Survivin随着胡椒碱浓度的升高,其表达量越低；⑦胡椒碱作用于人胃癌细胞株BGC-823 24h后,线粒体凋亡通路相关蛋白Bax、 cleave-caspase9随胡椒碱浓度浓度升高,其表达量越高；Bcl-2、随着胡椒碱浓度升高,其表达量越低；研究结论：胡椒碱能抑制人胃癌细胞株BGC-823增殖,迁移及侵袭能力；胡椒碱可诱导人胃癌细胞株BGC-823细胞凋亡；胡椒碱诱导人胃癌细胞株BGC-823凋亡可能是通过线粒体通路实现的。
【关键词】：胡椒碱 人胃癌细胞株BGC-823 细胞抑制 细胞凋亡 线粒体凋亡通路
【学位授予单位】：南京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R735.2
【目录】：

• 摘要8-10
• Abstract10-12
• 前言12-13
• 第一章 理论研究13-17
• 1. 胃癌发病的病因病机14-15
• 1.1 脾阳虚弱14
• 1.2 瘀血内结14
• 1.3 癌毒14-15
• 2. 胡椒碱药理学研究进展15-17
• 2.1 抗氧化作用15
• 2.2 对消化系统的作用15
• 2.3 抗抑郁作用15-16
• 2.4 调节免疫的作用16
• 2.5 药代动力学16
• 2.6 胡椒碱的构效关系研究16-17
• 第二章 实验研究17-38
• 1. MTT法检测胡椒碱体外对人胃癌细胞株BGC-823增殖的抑制作用17-20
• 1.1 实验材料17-18
• 1.2 方法及步骤18
• 1.3 结果18-20
• 1.4 讨论20
• 2. 胡椒碱体外对人胃癌细胞株BGC-823迁移能力的影响20-22
• 2.1 实验材料20
• 2.2 方法及步骤20
• 2.3 结果20-22
• 2.4 讨论22
• 3. 胡椒碱体外对人胃癌细胞株BGC-823侵袭能力的影响22-26
• 3.1 实验材料22-23
• 3.2 方法及步骤23
• 3.3 结果23-26
• 3.4 讨论26
• 4. 胡椒碱体外对人胃癌细胞株BGC-823凋亡的影响26-28
• 4.1 实验材料26
• 4.2 方法及步骤26-27
• 4.3 结果27-28
• 4.4 讨论28
• 5. 胡椒碱体外对人胃癌细胞株BGC-823线粒体电位的影响28-30
• 5.1 实验材料28
• 5.2 方法及步骤28-29
• 5.3 结果29-30
• 5.4 讨论30
• 6. 胡椒碱体外对人胃癌细胞株BGC-823线粒体凋亡通路相关基因的表达影响30-32
• 6.1 实验材料30
• 6.2 方法及步骤30-31
• 6.3 结果31-32
• 6.4 讨论32
• 7. 胡椒碱体外对人胃癌细胞株BGC-823凋亡相关蛋白的表达的影响32-38
• 7.1 实验材料32-34
• 7.2 方法与步骤34-35
• 7.3 结果35-36
• 7.4 讨论36-38
• 第三章 讨论38-42
• 1 中药抗胃癌作用的研究思路与方法概述38-39
• 1.1 实验类型分类38
• 1.2 中药类型38-39
• 1.3 按研究思路来源分类39
• 1.4 按研究目的进行分类39
• 2. 胡椒碱抑制人胃癌细胞株BGC-823细胞凋亡的作用及相关机制39-41
• 2.1 胡椒碱对胃癌细胞株BGC-823细胞增殖的抑制作用39-40
• 2.2 胡椒碱对人胃癌细胞株BGC-823细胞迁移能力的影响40
• 2.3 胡椒碱对胃癌细胞株BGC-823细胞侵袭能力的抑制作用40
• 2.4 胡椒碱对胃癌细胞株BGC-823细胞凋亡的影响40
• 2.5 胡椒碱对胃癌细胞株BGC-823细胞线粒体电位变化的影响40-41
• 2.6 胡椒碱对胃癌细胞株BGC-823细胞线粒体凋亡通路相关基因及蛋白的表达影响41
• 3. 本研究的创新点及意义41
• 4. 问题与展望41-42
• 第四章 结语42-43
• 参考文献43-46
• 附录46-48
• 附录1 部分英文缩写语的中英文对照46-47
• 附录2 攻读硕士学位期间取得的学术成果47-48
• 致谢48

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