急性髓细胞白血病中miR-155、SHIP1及AKT的表达及临床意义

发布时间：2017-08-30 12:18

  本文关键词：急性髓细胞白血病中miR-155、SHIP1及AKT的表达及临床意义

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【摘要】：研究目的:检测急性髓细胞白血病(AML)患者骨髓单个核细胞(BMMCs)中miR-155及SHIP1、AKT mRNA的表达,分析miR-155及SHIP1、AKT在急性髓细胞白血病患者中的临床意义,初步探讨miR-155及PI3K/AKT信号通路在AML发病机理中的作用,为miR-155的靶点治疗提供理论基础。研究方法:1、收集急性髓细胞白血病患者骨髓标本80例,其中初治组46例、缓解组34例;对照组11例,为缺铁性贫血患者。2、采用实时荧光定量PCR方法分别检测AML患者骨髓标本中miR-155和内参基因U6及SHIP1、AKT和内参基因GAPDH mRNA的表达水平。运用相对定量法计算miR-155及SHIP1、AKT mRNA的相对表达量,计算公式如下:目的基因相对表达量=2-ΔCt×102。3、应用SPSS17.0统计学软件对实验数据进行统计分析。计量资料呈非正态分布,用中位数描述,采用Mann-Whitney U检验,相关性分析行Spearman相关性检验;计数资料采用χ2检验。检验水准取α=0.05,选择p0.05为结果有统计学意义。实验结果:1、AML患者BMMCs中miR-155相对表达水平在初治组4.2931(2.1642~8.8388)及缓解组3.6853(2.3697~5.2406)均明显高于对照组2.5190(0.9848~4.9360),P值分别为0.001和0.004,差异均具有统计学意义(P0.01);初治组miR-155的表达水平较缓解组也明显增高,差异具有统计学意义(P=0.022)。2、AML患者BMMCs中miR-155相对表达水平在预后中等组4.3587(2.3519~8.8388)、不良组5.8910(3.2193~7.9801)均明显高于预后良好组3.4706(2.1642~5.2193),P值分别为0.036、0.022,差异均具有统计学意义(P0.05);预后中等组与不良组之间差异无统计学意义(P=0.174)。3、按照34例初治患者miR-155的中位表达水平3.9656将患者分为高表达组(mir-155表达≥3.9656)与低表达组(mir-155表达3.9656),结果显示高表达组与低表达组初次诱导缓解率分别为88.9%、56.3%,差异有统计学意义(χ2=4.636,p=0.031);且化疗后未完全缓解患者初治时的mir-155表达水平5.3700(2.9360~8.8388)明显高于化疗后达完全缓解患者初治时的mir-155表达水平3.9012(2.1642~7.9801),差异具有统计学意义(p=0.005)。4、aml初治组中mir-155相对表达水平与患者的年龄、骨髓原始细胞比例、外周血白细胞计数、外周血血红蛋白计数、外周血血小板计数均无明显相关性(p0.05)。5、aml患者bmmcs中ship1mrna相对表达水平在初治组为0.9083(0.0137~2.8756),缓解组为1.8597(0.6848~4.2986),对照组为1.9740(0.3696~4.4502);缓解组及对照组均明显高于初治组,p值分别为0.002和0.005,差异均具有统计学意义(p0.01);缓解组与对照组之间差异无统计学意义(p=0.510)。6、aml患者bmmcs中aktmrna相对表达水平在aml初治组为4.5486(2.1105~8.2922)、缓解组为4.1122(1.6328~8.0067)、对照组为4.2691(1.7854~6.4944),组间两两比较差异均无统计学意义(p0.05)。7、初治组中mir-155与ship1mrna相对表达水平存在负相关(r=-0.354,p=0.016),ship1与aktmrna相对表达水平也存在负相关(r=-0.398,p=0.006);缓解组中mir-155与ship1mrna相对表达水平存在正相关(r=0.590,p=0.001),ship1与aktmrna相对表达水平无明显相关性(r=-0.216,p=0.270);对照组中mir-155与ship1mrna相对表达水平无明显相关性(r=-0.145,p=0.670),ship1与aktmrna相对表达水平存在正相关(r=0.609,p=0.047)。结论:1、mir-155在aml患者骨髓单个核细胞中呈高表达,其表达水平与疾病状态有关。2、mir-155的表达水平与aml预后相关,预后中等组及不良组显著高于预后良好组。mir-155表达水平与aml临床疗效密切相关,mir-155高表达组患者的缓解率较低。3、mir-155与骨髓原始细胞比例,外周血白细胞、血红蛋白和血小板计数以及年龄无明显相关性。4、SHIP1 mRNA在AML患者骨髓单个核细胞中呈低表达。AKT mRNA在AML患者骨髓单个核细胞中表达水平无明显变化。5、AML初治组中miR-155与SHIP1mRNA表达及SHIP1mRNA与AKT mRNA表达均存在负相关。
【关键词】：急性髓细胞白血病 miRNA miR-155 SHIP1 AKT PI3K/AKT
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R733.71
【目录】：

• 摘要3-6
• Abstract6-12
• 中英文缩略词表12-13
• 第1章 引言13-17
• 第2章 材料与方法17-27
• 2.1 病例及临床资料17
• 2.2 治疗方案17-18
• 2.3 诊断及临床疗效评价标准18
• 2.3.1 AML诊断标准18
• 2.3.2 AML缓解标准18
• 2.4 主要实验试剂18-19
• 2.5 主要实验仪器19-20
• 2.6 常用实验试剂的配制20-21
• 2.6.1 10×红细胞裂解液的配制20
• 2.6.2 0.1%DEPC水的配制20
• 2.6.3 75%乙醇的配制20
• 2.6.4 PBS缓冲液的配制20
• 2.6.5 5×TAE缓冲液的配制20-21
• 2.7 实验方法及步骤21-27
• 2.7.1 骨髓单个核细胞的分离21
• 2.7.2 骨髓细胞总RNA的提取21-22
• 2.7.3 RNA浓度、纯度及完整性测定22-23
• 2.7.4 RNA逆转录成c DNA23-24
• 2.7.5 实时荧光定量PCR引物设计及合成24
• 2.7.6 实时荧光定量PCR24-26
• 2.7.7 结果统计学分析26-27
• 第3章 实验结果27-36
• 3.1 总RNA纯度及完整性检测27
• 3.2 荧光定量PCR的扩增及溶解曲线27-29
• 3.3 miR-155的表达与AML的关系29-33
• 3.3.1 miR-155在AML中的表达情况29-30
• 3.3.2 染色体核型对miR-155表达的影响30-31
• 3.3.3 miR-155的表达与临床疗效的关系31-32
• 3.3.4 miR-155的表达与临床指标的相关性32-33
• 3.4 SHIP1在AML中的表达情况33-34
• 3.5 AKT在AML中的表达情况34-35
• 3.6 miR-155与SHIP1以及SHIP1与AKT表达的相关性35-36
• 第4章 讨论36-43
• 4.1 miR-155在AML中表达37-38
• 4.2 miR-155与AML预后的关系38-39
• 4.3 miR-155与AML疗效的关系39-40
• 4.4 miR-155与AML患者临床特征的相关性40
• 4.5 SHIP1在AML中的表达40-41
• 4.6 AKT在AML中的表达41
• 4.7 miR-155 与 SHIP1、AKT 在 AML 中表达的相关性41-43
• 第5章 结论与展望43-44
• 5.1 结论43
• 5.2 展望43-44
• 致谢44-45
• 参考文献45-51
• 攻读学位期间的研究成果51-52
• 综述52-59
• 参考文献57-59

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

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本文编号：759248