白介素-2联合不同剂量索拉菲尼对肾癌细胞的体内外杀伤效应的初步研究

发布时间：2017-09-09 21:09

  本文关键词：白介素-2联合不同剂量索拉菲尼对肾癌细胞的体内外杀伤效应的初步研究

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【摘要】：目的:观察白细胞介素-2(IL-2)联合不同剂量的索拉菲尼对肾癌786-O细胞的体内杀伤效应及对荷瘤小鼠生长情况的影响,为肾癌的临床治疗策略提供新的参考。方法:取肾癌786-O细胞体外培养至培养对数生长期,24h后以IL-2(20umol/l)分别联合索拉菲尼(6.9,13.8,20.8umol/l)作用于肾癌786-O细胞株,MTT(噻唑蓝)比色法检测IL-2联合不同剂量索拉菲尼对肾癌786-0细胞株增值的影响,流式细胞仪检测各组对肾癌细胞凋亡率的影响。再取对数生长期的肾癌细胞株,胰蛋白酶消化离心后调整细胞浓度至5×104cell/ml,取细胞悬液分别接种于裸鼠后项中间皮下,0.3ml/只。成瘤后,分为空白对照组、索拉菲尼低剂量组、索拉菲尼中剂量组,索拉菲尼高剂量组,分别观察它们对裸鼠移植瘤生长的抑制作用和荷瘤小鼠的耐受性。取荷瘤小鼠外周血,双抗夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组小鼠血清IL-10的分泌量。然后用活检针取肿瘤组织,免疫组化法检测VEGF因子和CD31的表达情况。结果:MTT法发现各组均表现出对肾癌细胞的抑制作用,与单用IL-2相比,两药联合应用时抑制作用更明显,且随着处理时间的延长和浓度的增加,各组对肾癌细胞增殖的抑制也是逐渐增加,呈现出时间-剂量依赖性。各组间差异存在统计学意义(P0.05),其中以高剂量组48h的抑制率最高,达到(74.67±1.87)%。在诱导细胞凋亡方面,流式细胞仪检测发现各组之间没有显著性差异(P0.01)。荷瘤小鼠模型成功建立,体外实验中观察到高剂量组小鼠肿瘤生长缓慢,明显低于其他各组,但随着剂量的增加小鼠的药物耐受性也下降明显。高剂量组与中剂量组、低剂量组及单用IL-2组荷瘤小鼠的体质量差异有统计学意(P0.01)。ELISA结果显示,与对照组相比,IL-10存在明显差异(P0.01),且在三组之间内部之间也有显著性差异(P0.01)。进一步的免疫组化结果发现,各组小鼠肿瘤组织内部的VEGF因子、CD31分子的差异也存在统计学意义(P0.01)。结论:两药联合能显著抑制肾癌786-O细胞的增殖,但对肿瘤细胞凋亡无明显影响。体外实验也显示荷瘤小鼠肿瘤生长减慢。这些作用可能是由于两药联合使用及不同剂量影响肿瘤内部免疫抑制因(IL-10等)的表达及肿瘤血管的生长而实现的。
【关键词】：肾癌细胞株 白细胞介素-2/索拉菲尼 免疫抑制因子 肿瘤血管
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.11
【目录】：

• 英文缩写词表5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 1 引言10-13
• 2 材料和研究方法13-22
• 3 结果22-30
• 4 讨论30-35
• 5 结论35
• 6.创新35
• 7.不足之处35-36
• 8 参考文献36-43
• 附录43-44
• 致谢44-46
• 综述46-54
• 参考文献51-54

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