木犀草素对胃癌MGC803细胞增殖抑制作用及其机制

发布时间：2017-09-11 12:42

  本文关键词：木犀草素对胃癌MGC803细胞增殖抑制作用及其机制

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【摘要】：目的:研究木犀草素对胃癌MGC803细胞的增殖抑制作用及其机制。方法:1、MTT法和克隆形成抑制试验检测木犀草素对胃癌MGC803细胞的增殖抑制作用。2、碘化丙锭(PI)单染色法检测细胞周期,判断细胞周期阻滞情况;Western Blot检测周期蛋白的表达。3、Annexin V-PI双染法测定细胞凋亡:分别以药物浓度0,12.5,25,50μmol/L作用于胃癌MGC803细胞,同时设DMSO对照组,检测48 h后细胞早期凋亡率及晚期凋亡率。Western-Blot技术检测Bcl-2家族蛋白和Caspase的蛋白表达情况:以0,12.5,25,50μmol/L药物浓度作用于胃癌MGC803细胞,同时设DMSO对照组,检测蛋白表达情况.4、Western blot检测后自噬相关蛋白的表达情况。结果:1、MTT法检测发现:木犀草素作用于MGC-803细胞24h、48h和72h后,IC50分别为127.37umol/L、76.12umol/L、16.84umol/L。克隆形成抑制试验表明木犀草素作用于胃癌MGC803细胞7天后,随着药物浓度增加克隆逐渐减小,且克隆数量逐渐减少,产生明显的克隆形成抑制作用。2、流式细胞仪PI单染结果:不同浓度的木犀草素作用于胃癌MGC803细胞48后,G0/G1期细胞逐渐减少,S期细胞变化不大,G2/M期细胞明显增加,提示细胞周期阻滞于G2期;Western Blot的检测结果也证明木犀草素作用于胃癌MGC803细胞后,MGC803细胞阻滞于G2期。3、流式细胞仪Annexin V-FITC/PI双染色和Western blot实验结果显示:不同浓度的木犀草素作用于胃癌MGC-803细胞后,随浓度增加,早期凋亡率和晚期凋亡率均增加。Mcl-1,Bcl-xl,Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9总蛋白随药物浓度增加而减少,Bcl-2蛋白量变化不大,Bax蛋白量增加,因而引起Bcl-2/Bax,Mcl-1/Bax和Bcl-xl/Bax的比例明显下降。同时可见到Caspase-3和PARP出现了切割的条带。4、Western Blot结果提示,不同浓度的木犀草素作用于胃癌MGC-803细胞后,总P62表达下降,Beclin-1表达增加,而LC3 II表达增加。结论1、木犀草素使胃癌MGC803细胞阻滞于G2期,诱导自噬发生从而抑制细胞的生长。2、木犀草素通过线粒体途径诱导胃癌MGC803细胞凋亡。
【关键词】：木犀草素 胃癌 细胞周期 细胞凋亡 自噬
【学位授予单位】：暨南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.2
【目录】：

• 中文摘要3-5
• 英文摘要5-8
• 前言8-18
• 实验材料和方法18-26
• 实验结果26-33
• 讨论33-36
• 结论36-37
• 展望37-38
• 参考文献38-43
• 缩略词表43-44
• 发表文章44-45
• 致谢45

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前7条

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本文编号：830814