新型AMPK激动剂，NT1014，对卵巢癌的生长抑制作用及其机制的研究

发布时间：2017-09-16 09:38

  本文关键词：新型AMPK激动剂，NT1014，对卵巢癌的生长抑制作用及其机制的研究

  更多相关文章： 浆液性卵巢癌 NT1014 二甲双胍 腺苷酸活化蛋白激酶 有机阳离子转运体

【摘要】：二甲双胍在卵巢肿瘤的防治方面具有积极的治疗潜力,其机制可能是通过激活AMPK/mTOR/S6信号通路以及有机阳离子转运体(OCT)的活化。OCT主要包括OCT1、OCT2和OCT3三个异构体。不同转运蛋白在不同组织器官中的表达也存在差异。然而,由于二甲双胍对OCT2的高亲和力,造成二甲双胍易通过肾脏清除,半衰期短,不能很好地发挥抗癌作用。因此,我们设计合成一种新型的双胍类药物,NT1014,可以直接激活AMPK并且特异性地对OCT1和OCT3具有高亲和力,降低OCT2活性。本实验研究的目的是评价NT1014在卵巢癌细胞系以及浆液性卵巢癌的转基因小鼠模型中的抗肿瘤作用。在IGROV-1和SKOV3这两种卵巢癌细胞系中应用NT1014治疗后测定肿瘤细胞增殖情况、细胞周期、细胞凋亡、粘附、侵袭、OCT的表达以及AMPK/mTOR/S6信号通路的变化。在浆液性卵巢癌的转基因小鼠模型中给予NT1014(75mg/kg/天,灌胃)治疗,4周后比较治疗组与安慰剂对照组的肿瘤重量、血管内皮生长因子和免疫组化检测特异性抗体的表达差异。NT1014对IGROV-1和SKOV3细胞的生长抑制均有显著的剂量依赖性,并且IC50值均低于二甲双胍治疗。NT1014还可使卵巢癌细胞周期G1期阻滞并且诱导细胞凋亡、细胞应激、黏附和侵袭。此外,NT1014增加卵巢癌细胞葡萄糖的摄取,乳酸堆积,但在SKOV3减少ATP产量,在IGROV-1增加ATP产量。体内实验,NT1014治疗后周显着抑制转基因小鼠卵巢肿瘤生长,降低血管内皮生长因子的水平。对肿瘤组织进行免疫组织化学分析显示,与对照组相比,NT1014治疗导致Ki-67,磷酸化S6和MMP9表达降低,磷酸化AKT和磷酸化AMPK表达增加。因此,NT1014在体外实验和体内实验方面都表现出显著的抑制卵巢肿瘤的作用,其可能的机制是通过激活AMPK/mTOR途径以及对OCT1和OCT3高亲和力。这表明NT1014可能为卵巢肿瘤治疗提供一种新的治疗方向。
【关键词】：浆液性卵巢癌 NT1014 二甲双胍 腺苷酸活化蛋白激酶 有机阳离子转运体
【学位授予单位】：济南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R737.31
【目录】：

• 摘要6-7
• Abstract7-8
• 主要符号表8-9
• 第一章 前言9-11
• 第二章 材料方法11-27
• 2.1 细胞系11
• 2.2 卵巢癌Kp B转基因小鼠模型11
• 2.3 主要试剂和药品11-12
• 2.4 主要仪器设备12-13
• 2.5 主要溶液配制13-15
• 2.6 实验方法15-27
• 第三章 结果27-41
• 3.1 NT1014在卵巢癌细胞系中表现出对OCT1和OCT3有高亲和力27
• 3.2 NT1014抑制卵巢癌细胞系IGROV-1 和SKOV3的增殖27-28
• 3.3 NT1014诱导卵巢癌细胞G1期阻滞28-29
• 3.4 NT1014诱导卵巢癌细胞凋亡增加29
• 3.5 NT1014诱导IGROV-1 和SKOV3细胞应激增加29-30
• 3.6 NT1014抑制IGROV-1 和SKOV3细胞的粘附和侵袭30
• 3.7 NT1014对卵巢癌IGROV-1 和SKOV3细胞系糖代谢途径的影响30-31
• 3.8 NT1014在Kp B浆液性卵巢癌小鼠模型中抑制肿瘤的生长31-33
• 结果 附图33-41
• 第四章 讨论41-45
• 第五章 结论45-46
• 参考文献46-51
• 攻读硕士学位期间的研究成果51-52
• 致谢52

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 李娟娟;凌文华;;AMPK与肥胖[J];国际内科学杂志;2007年11期

2 刘文倩;艾华;;AMPK与肥胖和减肥关系研究进展[J];中国运动医学杂志;2008年06期

3 蔡明春,黄庆愿,高钰琪;AMPK与能量代谢[J];重庆医学;2005年01期

4 葛斌;谢梅林;顾振纶;周文轩;郭次仪;;AMPK作为治疗2型糖尿病新靶点的研究进展[J];中国药理学通报;2008年05期

5 徐静;刘毅;完强;贾振华;王荣;;高糖环境对大鼠肾小球系膜细胞AMPK表达及活性的影响[J];山东大学学报(医学版);2009年05期

6 宫克城;丁树哲;;AMPK与2型糖尿病的关系及其在运动介导下的研究[J];辽宁体育科技;2009年03期

7 罗招凡;李芳萍;丁鹤林;程桦;;AMPKα2基因克隆及其野生型和突变型真核表达载体的构建[J];中国组织工程研究与临床康复;2009年28期

8 丁晓洁;王佑民;王丽萍;;高脂饮食对大鼠肝脏组织AMPK表达及其活性的影响[J];安徽医科大学学报;2009年06期

9 程媛;王佑民;丁晓洁;;肥胖大鼠骨骼肌AMPK表达及其与糖脂代谢的关系[J];安徽医科大学学报;2010年02期

10 黄德强;罗凌玉;王丽丽;罗时文;吕农华;罗志军;;AMPK在胰岛素信号转导通路中的作用[J];中国细胞生物学学报;2011年11期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 ;Co-commitment and Interplay between Akt and AMPK in the Regulation of Endothelial NO Synthase Phosphorylation by Reactive Oxygen Species[A];第九届全国心血管药理学术会议论文集[C];2007年

2 Paul M Vanhoutte;;SIRT1 and AMPK:the Seesaw Effect in Regulating Endothelial Sene-scence[A];第八届海峡两岸心血管科学研讨会论文集[C];2011年

3 李瑾;朱海波;;新结构类型调血脂化合物与靶蛋白AMPK分子间相互作用初步解析[A];全国第十二届生化与分子药理学学术会议论文集[C];2011年

4 宋海燕;李强;孙玉倩;张巾超;邬艳慧;;AMPK结合蛋白的筛选及其与2型糖尿病的关系研究[A];2008内分泌代谢性疾病系列研讨会暨中青年英文论坛论文汇编[C];2008年

5 ;AMPK mediated an apoptotic response to combined effect of hypoxia stress and ER stress[A];2012全国发育生物学大会摘要集[C];2012年

6 ZHANG Jian-wei;MA Xiao-wei;DENG Rui-fen;DING Shan;GU Nan;GUO Xiao-hui;;Genetic variability in AMPKαl gene may have synergetic effect with smoking on risk of coronary artery disease in chinese type 2 diabetics[A];中华医学会糖尿病学分会第十六次全国学术会议论文集[C];2012年

7 姚远;周京军;裴建明;;AMPK介导无钙预处理心肌保护作用[A];中国生理学会第九届全国青年生理学工作者学术会议论文摘要[C];2011年

8 季乐乐;Haifeng Zhang;Feng Gao;;A novel mechanism of preconditioning:Attenuating reperfusion injury through enhanced myocardial glucose uptake via insulin-stimulated Akt and AMPK activation[A];中国生理学会第十届全国青年生理学工作者学术会议论文摘要[C];2013年

9 WU Qiao;;The orphan nuclear receptor Nur77 regulates AMPK activity through LKB1 subcellular localization in glucose metabolism[A];细胞—生命的基础——中国细胞生物学学会2013年全国学术大会·武汉论文摘要集[C];2013年

10 Jia-Wei Wu;;Conserved elements in allosteric regulation of AMPK[A];中国生物化学与分子生物学会第十一次会员代表大会暨2014年全国学术会议论文集——专题报告二[C];2014年

中国重要报纸全文数据库 前2条

1 黄敏;精力充沛基因决定?[N];新华每日电讯;2011年

2 实习生 程凤;不爱锻炼可能与基因缺失有关[N];科技日报;2011年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 陈雷;AMP激活的蛋白质激酶（AMPK）调控机制的研究[D];清华大学;2010年

2 张秀娟;TSH调节肝脏HMG-CoA还原酶磷酸化修饰的研究[D];山东大学;2014年

3 赵顺玉;消积饮联合CIK通过AMPKα/Sp1/EZH2/DNMT1相关通路抗肺癌生长的作用机制[D];广州中医药大学;2015年

4 王红亮;AMPK-α在卤虫胚胎发育过程中对细胞有丝分裂调控的研究[D];浙江大学;2015年

5 周锡红;三甲基甘氨酸通过AMPK途径影响脂肪沉积的研究[D];浙江大学;2015年

6 刘效磊;AMPK/mTOR介导有氧运动提高骨骼肌胰岛素敏感性的机制研究[D];天津医科大学;2015年

7 刘书东;AICAR诱导激活的AMPK在肝脏抑制TSH/SREBP-2/HMGCR通路[D];山东大学;2015年

8 杜宇;AMPK调控组蛋白糖基化修饰的机制研究[D];华中科技大学;2015年

9 李知行;电针对胰岛素抵抗模型大鼠肝脏AMPK、ACC的干预机制研究[D];广州中医药大学;2016年

10 尉娜;AMPK通过mTOR促进脑缺氧条件下血管内皮细胞作用的研究[D];郑州大学;2016年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 柯志强;AMPK信号通路在白藜芦醇改善高糖诱导乳鼠心肌细胞损伤中的作用[D];湖北科技学院;2015年

2 肖瑶;AMPK对低氧诱导血管生成作用的研究[D];湖北科技学院;2015年

3 王玉兵;HIF-1α、AMPK、E-cadherin在前列腺癌组织中的表达及意义[D];福建医科大学;2015年

4 魏苏玉;乙醇对H4-ⅡE细胞脂质代谢及AMPK表达的影响[D];延边大学;2015年

5 陈婷;肌肉特异敲除AMPKα2对小鼠脂代谢的影响[D];西北农林科技大学;2015年

6 张二东;铜离子及模拟太空环境通过ROS/AMPK信号诱导人B淋巴母细胞凋亡[D];兰州大学;2015年

7 徐英秀;硫化氢通过AMPK激活调控脑缺血后小胶质细胞的极化状态[D];苏州大学;2015年

8 黄艳;AMPK和SIRT-1参与定时高脂饮食对小鼠肝脏生物钟基因的影响研究[D];苏州大学;2015年

9 杨霞;AMPK参与线粒体通路介导的氟致H9c2心肌细胞凋亡机制的研究[D];山西医科大学;2015年

10 闫旭红;胰岛素对1型糖尿病大鼠睾丸脂联素及其受体、AMPK、AKT和eNOS表达的影响[D];山西医科大学;2015年

，

本文编号：862287