Glut-1基因在胃癌组织中的表达及其临床意义

发布时间：2017-09-23 07:33

  本文关键词：Glut-1基因在胃癌组织中的表达及其临床意义

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【摘要】：背景与目的：人类恶性肿瘤中,肿瘤细胞糖酵解代谢作用的增强是一种普遍特征,肿瘤组织葡萄糖的利用和代谢的增加与葡萄糖转运相关蛋白的表达上调有着密切关联,其中以转运能力较强的亚型葡萄糖转运蛋白1 (Glucose transporter 1, Glut-1)的作用最为关键。通过激活Glut-1基因而促进其蛋白的合成增加,进而介导肿瘤细胞摄取更多的葡萄糖,以满足肿瘤生长所需的能量,同时也为其浸润、转移提供相应的条件。近年来研究表明,Glut-1蛋白在胃癌组织中的表达较正常组织具有差异性。因此,本研究旨在探讨胃癌组织中Glut-1基因表达的特点以及与胃癌患者临床病理特点的关系。方法：收集2014年6月至2015年6月扬州大学临床医学院(江苏省苏北人民医院)施行手术切除的61例胃癌组织和相应的正常组织标本(距切缘5cm)作为实验组和对照组。所有患者术前均未接受放化疗等其他治疗,术后均经病理证实。分别使用液氮及福尔马林固定保存。在液氮低温条件下研磨成粉超低温保存。Trizol法提取所有标本总RNA,应用反转录试剂盒将总RNA逆转录为cDNA,应用RT-PCR(Real-time Polymerase Chain Reaction)方法定量检测Glut-1 mRNA的表达水平,以三磷酸甘油醛脱氢酶基因(hGAPDH)为内参照。同时使用免疫组织化学染色法检测Glut-1蛋白的表达水平,并将Glut-1 mRNA表达水平与胃癌患者的临床病理特征进行分析。结果：胃癌组织Glut-1 mRNA在高、中、低分化腺癌中的相对表达量分别为2.68±3.66、16.97±25.79、41.31+28.07,三组相比差异有统计学意义(P0.05)：两两比较,分化程度越差,Glut-1的相对表达量越高。胃癌组织Glut-1 mRNA在有淋巴结转移组的表达水平(21.39±28.28)高于无淋巴结转移组的表达水平(3.66±5.34),二者比较差异有显著性(P0.05)。胃癌组织Glut-1 mRNA在Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期腺癌中的相对表达量分别为2.03±3.35、4.09±6.15、11.89±16.57、40.29±40.44,四组相比差异有统计学意义(P0.05)；Ⅲ-Ⅳ期组的表达水平明显高于I-II期组的表达水平为,二者比较差异有显著性(P0.05)。胃癌组织Glut-1 mRNA在印戒细胞癌组的表达水平(2.12±4.97)明显低于非印戒细胞癌组的表达水平(13.47+22.61),二者比较差异有显著性(P0.05)。胃癌组织Glut-1 mRNA的表达水平与肿瘤大小正相关,差异具有统计学意义(r=0.529,P0.05)；与PLR负相关(r=-0.242),但差异无显著性(P=0.06)。胃癌组织Glut-1蛋白阴性、阳性、强阳性表达率分别为18.3%、44.6%、37.1%。结论：Glut-1基因表达水平的表达与蛋白表达水平相吻合。Glut-1基因的高表达可能对胃癌发生、发展起着重要作用,可能与胃癌的侵袭性指标相关；Glut-1可能作为胃癌患者预后的分析指标。印戒细胞癌Glut-1基因的表达降低可能与其特殊细胞结构相关,有待进一步深入研究。
【关键词】：胃恶性肿瘤 葡萄糖转运蛋白-1 RT-PCR 免疫组织化学 mRNA
【学位授予单位】：扬州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R735.2
【目录】：

• 中文摘要2-4
• 英文摘要4-8
• 符号说明8-9
• 前言9-11
• 材料与方法11-17
• 1、实验材料11-12
• 1.1 研究对象11
• 1.2 实验试剂11-12
• 1.3 实验仪器12
• 2、实验方法12-16
• 2.1 引物设计与合成12-13
• 2.2 组织总RNA提取13
• 2.3 逆转录反应13-14
• 2.4 Real-time PCR反应14-15
• 2.5 免疫组织化学SP法15-16
• 3、统计学方法16-17
• 结果17-22
• 1、总RNA提取结果17
• 2、胃癌组织中Glut-1 mRNA的表达与其临床病理特征的关系17-20
• 3、胃癌组织中Glut-1 mRNA的表达与肿瘤大小、PLR的相互关系20-21
• 4、胃癌组织中Glut-1蛋白免疫组织化学结果21-22
• 讨论22-26
• 结论26-27
• 参考文献27-32
• 附录32-47
• 致谢47-48
• 攻读学位期间发表的学术论文目录48-49

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本文编号：904005