结肠黑变病与结肠癌比较蛋白质组学研究

发布时间：2017-09-27 21:13

  本文关键词：结肠黑变病与结肠癌比较蛋白质组学研究

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【摘要】：目的:应用双向凝胶电泳蛋白质分离技术(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)及凝胶图像对比分析,对结肠黑变病(melanosiscoli,MC)、结肠癌及正常组织进行蛋白质分离,寻找三者差异表达的蛋白质点,以探索MC的发生、发展及其与结肠癌的相关性。方法:1.采集我院内镜室2013.01-2014.06就诊患者的结肠组织标本,分为MC组7例、结肠癌组6例及正常对照组6例;2.结肠组织样品处理后,取上清液用Bradford方法测定蛋白质浓度;应用2-DE技术进行第一向固相pH梯度等电聚焦电泳(immobilized pH gradient isoelectric focusing,IPG-IEF)及第二向十二烷基硫酸钠-聚丙酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)建立MC、结肠癌及正常人结肠组织的双向凝胶图谱。3.应用扫描仪对凝胶扫描获取图像,使用imagemaster 7.0软件分别分析对比MC患者与结肠癌患者及正常人的凝胶图像,筛选出差异表达蛋白质点。结果:1.获取的凝胶图像显示出良好的重复性。各斑点间分离清晰,各组内凝胶在蛋白质斑点位置上均具有较好的重复性,可以进行图像分析;2.结肠癌、MC、正常组织凝胶图像的平均蛋白质斑点数分别为2150±240,1970±138,2028±176。凝胶图谱进行比对后,总共找到置信度在95%以上的差异点14个。MC与正常组织对比有6个差异点,其中4个蛋白点在正常组织中表达量较大,2个点在MC中表达量比较大。仅在MC中表达的蛋白质点有1个(P0.05);MC与结肠癌组织对比有8个差异点,其中1个蛋白点在MC中的表达量比较大,7个蛋白点在结肠癌组织中的表达量比较大。仅在结肠癌组表达的蛋白质点有2个(P0.05)。结论:通过2-DE技术及凝胶图像比对分析,分析了MC与结肠癌比较蛋白质组学,发现MC与正常结肠组织之间及与结肠癌组织之间存在差异表达的蛋白质。这可能揭示了MC和结肠癌的发生、发展的生物学行为,为MC的研究提供新思路、新线索。
【关键词】：结肠黑变病 结肠癌 蛋白质组学 双向凝胶电泳
【学位授予单位】：河南科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.35;R574.62
【目录】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-8
• 第1章 绪论8-26
• 1.1 研究背景8-24
• 1.1.1 结肠黑变病的研究8-11
• 1.1.2 结肠癌的研究11-13
• 1.1.3 结肠黑病变与大肠肿瘤的研究13-14
• 1.1.4 蛋白质组学的研究14-22
• 1.1.5 蛋白质组学与疾病的研究22-24
• 1.2 研究目的24
• 1.3 研究意义24-26
• 第2章 材料与方法26-38
• 2.1 研究对象26
• 2.2 主要试剂26-27
• 2.3 主要试剂配方27-30
• 2.3.1 组织样品制备相关溶液27-28
• 2.3.2 二维电泳相关缓冲液及溶液28-30
• 2.4 主要仪器30-31
• 2.5 实验方法31-38
• 2.5.1 结肠组织蛋白样品的制备31-33
• 2.5.2 第一向固相p H梯度的等电聚焦电泳（IPG-IEF）33-34
• 2.5.3 第二向垂直平板SDS-PAGE电泳34-35
• 2.5.4 SDS聚丙酰胺凝胶的染色及保存35-36
• 2.5.5 凝胶图像的获取及比对分析36-38
• 第3章 结果38-52
• 3.1 结肠组织标本 2-DE凝胶图像的重复性38-40
• 3.2 不同样品组织获取的 2-DE凝胶图像40-42
• 3.3 图像分析及比对结果42-52
• 第4章 讨论52-58
• 第5章 结论58-60
• 参考文献60-70
• 缩略语词汇表70-71
• 致谢71-72
• 攻读学位期间的研究成果72

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

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2 宋学东;李慧玉;姜静;梁艳;;白桦花芽蛋白质双向电泳技术的建立[J];生物技术通讯;2006年06期

3 张姝翌;王邦茂;谭华;方维丽;刘文天;;环氧合酶在结肠腺瘤性息肉及结肠癌组织中的表达[J];天津医科大学学报;2007年02期

4 马洪升,欧阳钦,张燕,张尚福;46例结肠黑变病临床病理分析及Ki-67的表达检测[J];中华消化杂志;2002年07期

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本文编号：931916