穴位电针对面神经损伤后面神经核中N-cad、E-cad及P-cad mRNA表达的影响

发布时间：2018-01-11 21:12

  本文关键词：穴位电针对面神经损伤后面神经核中N-cad、E-cad及P-cad mRNA表达的影响　出处：《西南医科大学》2016年硕士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】：目的:通过建立家兔面神经上颊支压榨性损伤模型,并予以穴位电针治疗,采用原位杂交法检测家兔面神经损伤后面神经核中粘附分子N-cad、E-cad及P-cad mRNA的表达情况,探讨穴位电针对面神经受损后面神经核中N-cad、E-cad及P-cad mRNA表达的影响。方法:选用52只家兔,将其分为正常对照组、手术组、电针治疗组三个实验组;其中正常对照组4只,手术组(24只)和电针治疗组(24只)按术后六个时间点(术后1天、4天、7天、14天、21天、28天),每个时间点分别选取4只。正常对照组不作任何处理,直接经经心灌注、固定,取脑桥中下段脑组织制作石蜡切片;手术组、电针治疗组建立右侧面神经的上颊支压榨性损伤模型,且损伤程度符合SunderlandⅣ度。术后两小时,电针治疗组电针刺激颊车、地仓、翳风、颧缪、阳白及四白穴30分钟,合谷穴仅埋针不予电刺激,每天1次;手术组术后不作任何处理。电针治疗组和手术组于术后六个不同时间点取家兔脑桥中下部的脑组织,并制作石蜡切片。三个实验组均行H-E染色,在光学显微镜下确认面神经核位置,并观察面神经受损后面神经核中运动神经元的形态学变化;然后用原位杂交法检测面神经核运动神经元中N-cad、E-cad及P-cad mRNA的表达情况,光镜下计数有阳性表达的钙粘附分子细胞数,使用SPSS 17.0软件进行统计学分析。结果:在光学显微镜下可见三个实验组面神经核均位于脑桥腹外侧,展神经核的前外侧。正常对照组粘附分子N-cad、E-cad和P-cad均无阳性表达,且E-cad、P-cad无论在电针治疗组还是手术组术后1、4、7、14、21、28天均无阳性表达。表现为面神经核运动神经元经dab染色后,细胞浆及轴突内均无棕黄色颗粒出现,细胞呈蓝色。经h e染色后,正常对照组面神经核运动神经元细胞呈不规则的多角形,细胞核圆,居中,核仁明显,似“鱼眼状”,胞浆内可见散在的蓝色尼氏体。n-cad在电针治疗组和手术组的术后各时间点(手术组术后28天除外)均有阳性表达,表现为面神经核运动神经元的细胞浆和(或)轴突内可见棕黄色颗粒(dab显色)。手术后1天,手术组出现了n-cad阳性细胞(n-cad14.67±1.52),电针治疗组在同一时间点,n-cad阳性细胞数(n-cad21.67±3.51)较手术组增加,差异具有统计学意义(p�d0.05)。手术组和电针治疗组神经元形态较正常对照组无明显变化,手术后4天,手术组n-cad阳性细胞数(n-cad29.67±3.51)有所增加,电针治疗组n-cad阳性细胞数(n-cad37.00±1.00)较术后1天亦增加,电针治疗组n-cad阳性细胞数较手术组多,其差异具有统计学意义(p�d0.05)。手术组神经元出现胞体肿胀、核边置、尼氏体数量减少等细胞变性改变;电针治疗组细胞变性改变不明显。手术后7天,手术组和电针治疗组n-cad阳性细胞数进一步增加(手术组n-cad44.67±3.06、电针治疗组n-cad120.00±8.71),其中,电针治疗组n-cad阳性细胞数达最大值,多于手术组,差异具有统计学意义(p�d0.01)。此时,手术组变性的神经元增多,出现核仁消失的神经元死亡表现;电针治疗组未见神经元死亡现象。手术后14天,手术组n-cad阳性细胞数量达到高峰(n-cad58.00±7.21),而电针治疗组n-cad阳性细胞数较前一个时间点有所减少(n-cad76.00±4.00),但该时间点电针治疗组n-cad阳性细胞数仍比手术组多,其差异具有统计学意义(p�d0.05)。此时,手术组神经元出现核膜破裂,胞核溶解,核仁消失等神经元死亡改变;电针治疗组仅有数个神经元出现神经元死亡表现,可见神经元核仁及尼氏体重现等神经元恢复现象。手术后21天,手术组n-cad阳性细胞数较前一个时间点减少(N-cad 31.67±4.73),电针治疗组N-cad阳性细胞数减少不明显(N-cad 70.33±9.07),电针治疗组N-cad标记的阳性细胞数仍然较手术组多,有统计学意义(p�d0.01)。该时间点手术组神经元失去正常形态结构,但胞浆内尼氏体有增多的趋势,说明神经元形态开始恢复;电针治疗组可见核仁回归中位,呈“鱼眼状”的恢复的神经元增多。手术后第28天,手术组N-cad无阳性表达,而电针治疗组N-cad有阳性表达(N-cad 52.33±2.52)。电针治疗组与手术组相比较,差异有显著的意义(p�d0.01)。此时,手术组和电针治疗组神经元形态基本恢复。结论:1.面神经损伤后1天即出现N-cad的阳性表达,术后每个时间点(手术组术后28天除外)N-cad的阳性表达一直存在,而正常对照组无N-cad的阳性表达。可以认为,N-cad参与了面神经损伤修复的过程。2.穴位电针能促进N-cad的持续高表达,使高表达高峰提前及持续时间延长,且这种高表达表现在H-E染色切片上对应的运动神经元形态学的改变上,这种形态学上的积极变化提示神经元的功能状态,说明穴位电针对面神经再生的促进作用可能是通过维持粘附分子的高表达,从而影响信息分子的传导来实现的。3.本实验中E-cad和P-cad未见阳性表达,说明这两个粘附分子未参与面神经损伤修复的过程。
[Abstract]:Objective : To investigate the expression of N - cad , E - cad and P - cad mRNA in the nucleus of facial nerve after facial nerve injury in rabbits . 璁哄湪鐢甸拡娌荤枟缁勮繕鏄�鎵嬫湳缁勬湳鍚�1,4,7,14,21,28澶╁潎鏃犻槼鎬ц〃杈，

本文编号：1411230