郁证失眠的理论探讨及三草安神方对抑郁症失眠大鼠的干预作用

发布时间：2018-11-18 18:33

【摘要】：目的:查阅和整理与抑郁症失眠相关的文献,找出与抑郁症失眠相似的疾病,并将这类疾病归类为郁证失眠。依据郁证失眠的临床症状、病因病机和其治法方药,理清郁证与失眠的关系,探讨从气郁论治郁证失眠的理论基础。构建抑郁症失眠动物模型,观察三草安神方治疗抑郁症失眠的作用及其对神经递质和相关神经递质受体的影响。通过理论探讨和实验研究为三草安神方的临床应用提供理论基础和实验依据。方法:1.理论探讨:查阅和整理查阅相关文献系统查阅和整理与抑郁症失眠相关的文献,找出与抑郁症失眠相似的疾病,并将这类疾病整理和归类。从中医理论理清郁证与失眠的关系,探讨从气郁论治郁证失眠的理论依据。2.实验研究:选用SPF级SD雄性大鼠40只,通过慢性不可预见中等应激法、孤养法和多平台水环境睡眠剥夺法构建抑郁症失眠动物模型,观察慢性不可预见中等应激法、孤养法和多平台水环境睡眠剥夺法三种造模方法对大鼠体质量和行为学的影响;各组分别灌胃给药14D后,通过Morris水迷宫法检测大鼠学习记忆能力,应用自发活动实验视频分析系统观察大鼠的自主活动;用HE染色法对比空白组、模型组、西药组和三草安神方组的大鼠神经元;ELISA法检测大鼠血清和脑皮质中单胺类神经递质5-羟色胺和去甲肾上腺素及氨基酸类神经递质谷氨酸、γ-氨基丁酸的含量;Real Time-PCR法检测大鼠下丘脑和海马中5-羟色胺受体和γ-氨基丁酸受体的表达。结果:1.体质量实验结果:造模期间,空白组大鼠体重呈缓慢上升的趋势,未造模时(T=0),造模组大鼠体质量与空白组大鼠体质量比较没有差异性(P0.05),造模后(T0),造模组大鼠体重较未造模时发生改变并有缓慢增高的趋势,此后造模组大鼠体重逐渐趋于平稳,从第7d开始造模组大鼠体重与空白组大鼠体重比较具有差异性(p0.01)。到第28d和第35d,与空白组比较,模型组大鼠体重显著低于正常组(p0.01),与模型组比较,西药组和三草安神方组大鼠体重均显著上升(p0.01,p0.05)。蔗糖偏好实验结果:未造模时(t=0),空白组大鼠蔗糖偏好与造模组大鼠蔗糖偏好比较无明显差异(p0.05),造模后的第7d,造模组大鼠蔗糖偏好低于正常组大鼠蔗糖偏好(p0.05),此后造模组大鼠蔗糖偏好明显持续低于正常组大鼠蔗糖偏好(p0.01)。给药7d(第28d)和给药14d(第35d)后,与模型组比较,西药组和三草安神方组大鼠蔗糖偏好均得到提升(p0.01,p0.05)。2.morris水迷宫实验结果:与空白组比较,模型组大鼠找到平台所耗时间和游泳总路程有所增加(p0.01),与模型组比较,西药组及三草安神方组大鼠找到平台所耗时间和游泳总路程有所减少(p0.01,p0.05),西药组和三草安神方组大鼠穿越平台次数和目标象限时间均增加(p0.01,p0.05),西药组和三草安神方组大鼠第1次抵原平台时间亦有所缩短(p0.01,p0.05)。自主活动实验结果:与空白组比较,模型组大鼠活动次数和活动路程明显低于空白组(p0.01)。与模型组比较,西药组和三草安神方组大鼠活动次数和活动路程都有所提高(p0.01,p0.05)。3.he染色结果:神经细胞核深染,空白组大鼠神经元细胞排列规则,分布均匀较为饱满;与空白组比较,模型组部分神经元排列不整齐或者紊乱,部分神经元数目减少并有细胞核固缩;与模型组相比,西药组和三草安神方组神经元细胞均明显增加且排列较为规则。4.elisa检测结果:与空白组比较,模型组大鼠血清和脑皮质中5-ht含量明显降低(p0.01),但模型组大鼠血清和脑皮质中ne含量无明显变化(p0.05)。西药组和三草安神方组在给予相应的药物后与模型组比较,其大鼠血清和脑皮质中5-ht含量明显升高(p0.01)。与空白组比较,模型组大鼠血清和脑皮质中glu和gaba含量明显升高(p0.01),且Glu/GABA比值亦有升高(P0.01)。与模型组比较,西药组和三草安神方组大鼠血清和脑皮质中Glu和GABA含量都有所降低(P0.01,P0.05),且Glu/GABA比值亦有降低(P0.01)。5.Real Time-PCR检测结果:与空白组比较,模型组大鼠下丘脑中和海马中5-HT_(1A)R mRNA表达水平明显下降(P0.01),而下丘脑和海马中5-HT_(2A)RmRNA表达明显上升(P0.01)。与模型组比较,西药组和三草安神方组大鼠下丘脑和海马中5-HT_(1A)RmRNA表达都有所升高(P0.01,P0.05),下丘脑和海马中5-HT_(2A)RmRNA表达都有所降低(P0.01,P0.05)。与空白组比较,模型组大鼠下丘脑和海马GABAARα1和GABAARγ2mRNA表达水平明显升高(P0.01)。与模型组比较,西药组和三草安神方组大鼠下丘脑和海马中GABA_AR_(α1)mRNA和GABAAR_(γ2)mRNA表达水平降低(P0.01,P0.05)。结论:1.郁证与气郁一样都有广义和狭义之分,气郁的本质是机体气机紊乱,郁证失眠为气机功能紊乱而导致的不寐,从气郁论治郁证失眠具有可靠性。2.慢性不可预见中等应激法结合孤养法并联合多平台水环境睡眠剥夺法的抑郁症失眠动物模型是可复制的。3.三草安神方有助于提高抑郁症失眠大鼠的学习记忆能力;三草安神方具有抗抑郁和镇静催眠作用,能够改善抑郁症失眠大鼠抑郁状态和睡眠状态。4.三草安神方改善抑郁症失眠大鼠抑郁状态、失眠状况和学习记忆能力可能与调节脑内神经递质及其受体表达有关。
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【学位授予单位】：湖北中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R256.23

【参考文献】