非创伤性股骨头坏死高发中医体质类型及其特异性表达microRNA筛选研究

发布时间：2020-06-23 13:05

【摘要】：目的:通过文献研究及流行病学调查等方式探究非创伤性股骨头坏死(non-traumatic osteonecrosis of femoral head,NONFH)患者中医体质类型情况,深入分析该病中医体质类型分布特点,获得陇原地区NONFH高发中医体质类型;同时结合生物芯片技术筛选出高发中医体质类型NONFH患者血浆中特异性表达microRNA(miRNA),采用实时荧光定量PCR技术对结果进行验证,并进一步对其生物信息学内容进行分析,寻找具有诊断价值的潜在分子生物学标志物,为后续NONFH的中药调体干预及防治提供理论依据和治疗靶点。方法:1.文献研究:通过检索PubMed、Cochrane、Embase、CNKI、Wanfang、VIP(重庆维普)和CBM(中国生物医学文献)这七大数据库,全面收集自各数据库创建至2018年8月24日间国内外发表与NONFH中医体质类型分布有关的临床研究(包括横断面研究、病例对照研究和队列研究)文献,深入分析NONFH中医体质类型分布特点。2.临床研究:通过对2016年8月~2018年5月于甘肃省中医院骨科门诊及陇中正骨楼住院部就诊的符合纳入排除标准的确诊为NONFH的患者进行问卷调查,建立陇原地区NONFH中医体质类型数据库,分析陇原地区NONFH高发中医体质类型及易罹原因。3.实验研究:运用生物芯片技术筛选出陇原地区高发的血瘀质NONFH患者血浆中特异性表达miRNA,采用实时荧光定量PCR技术对结果进行验证,并进一步对其生物信息学内容进行分析。结果:1.各数据库共检索到国内外发表与NONFH中医体质类型分布有关的文献340篇,根据纳入排除标准,最终纳入文献5篇(均为中文文献),研究均为横断面研究,共纳入研究对象516例。在全国范围内来看,痰湿质、阳虚质、湿热质为NONFH患者分布前三的中医体质类型,分别为23%[95%CI(11%~36%),Q=134.43,Z=3.68,P=0.000]、20%[95%CI(6%~33%),Q=88.25,Z=2.76,P=0.006]、15%[95%CI(12%~18%),Q=7.46,Z=9.51,P=0.000],差异均具有统计学意义(P0.05),但异质性较高。2.本次研究共纳入NONFH病例112例,男性74例,女性38例,男女性别比例约为1.95:1。NONFH单一体质发病98例,兼夹体质发病14例。单一体质病例中以血瘀质(占32.65%)、痰湿质(占13.27%)、气虚质(占12.24%)所占比例较高。气虚主兼夹质与阳虚主兼夹质为兼夹体质中分布前两位的中医体质类型,分别为50.00%、21.43%。通过对兼夹体质数据进行相应合并后发现:有四种中医体质类型在NONFH患者中分布较多,其占比达到全部中医体质类型的74.05%,分别是血瘀质、气虚质、阳虚质及痰湿质,占比分别为34.35%、15.27%、12.98%、11.45%。3.has-miR-4270、hsa-miR-129-1-3p、hsa-miR-365a-3p、hsa-miR-483-3p、hsa-miR-6731-3p为血瘀质NONFH特异性表达miRNA,其中has-miR-4270表达上调,hsa-miR-129-1-3p、hsa-miR-365a-3p、hsa-miR-483-3p、hsa-miR-6731-3p表达下调。Real-time PCR结果表明:hsa-miR-365a-3p在NONFH组中的表达水平较正常组下调;血瘀质NONFH组中hsa-miR-365a-3p表达水平较非血瘀质NONFH组下调,这与miRNA芯片检测结果基本一致。用三个在线数据库(PITA、TargetScan、microRNAorg)对血瘀质NONFH特异性表达miRNA进行靶基因预测,结果显示hsa-miR-365a-3p检出交集靶基因11个,余未检测出交集靶基因。GO分析结果显示与生物学过程相关描述共65条,与分子功能相关及细胞组分相关各23条,共111条。进一步针对分子功能分析,发现血瘀质NONFH特异性表达miRNA主要与受体结合、蛋白与酶的活性有关。Pathway分析显示,靶基因主要富集于轴突导向、Rap1、赖氨酸降解、Fc epsilon RI、甘油磷脂代谢、T细胞受体、血小板活化、成骨细胞分化等多个信号通路。结论:1.NONFH患者中医体质类型具有一定分布特点,但不同地域的NONFH高发中医体质类型及其分布特征,会受到饮食环境等诸多因素的影响。2.血瘀质、气虚质、阳虚质、痰湿质为陇原地区NONFH易罹体质类型,血瘀质则为陇原地区NONFH最高发体质类型。3.血瘀质NONFH存在5条特异性表达miRNA,这些miRNA可能通过调控Rap1、赖氨酸降解、甘油磷脂代谢、血小板活化、成骨细胞分化、Ras、PI3K/Akt等信号通路参与NONFH的发生发展过程。
【学位授予单位】：甘肃中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R274.9
【图文】：

根据纳排标准，最终纳入 5 篇与 NONFH 中医体质类型分布有关文献[5-9]，过程和结果如图1 所示。所有文献均为中文文献，研究均为横断面研究，共纳入研究对象 516 例。表 2为纳入研究的基本特征。图 1 检索流程与结果

图5 NONFH患者病程分布图者学历情况结果（见图6）显示：学历为小学及以下者40例，学历为中学者54例，学历为大专及以上者18例，依次占35.71%、48.21%、16.07%。生示：有1年以上吸烟史患者56例（占50.00%）、有1年以上饮酒史患者4）、喜饮茶患者36例（占32.14%）、喜食豆制品患者30例（占26.79%）

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本文编号：2727372