电针对SI-PHT大鼠血清Ach、NPY及肾脏CXCR-2、MMP-9、MCP-1表达影响的实验研究
本文关键词:电针对SI-PHT大鼠血清Ach、NPY及肾脏CXCR-2、MMP-9、MCP-1表达影响的实验研究,由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】:高血压前期指血压值在120~139/80~89mmHg的人群,此概念于2003年由美国高血压防治指南(简称JNC7)提出,与我国2010年最新修订的高血压指南中“正常高值血压”概念一致。当今社会紧张的生活工作节奏,致使心理应激引起的高血压前期人群不断攀升,并呈现年轻化趋势,进展为高血压病及发生心血管病的危险性增加。电针治疗高血压疾病具有广泛的研究基础,可以通过影响NO/NOS系统、交感神经系统、血管内皮功能等途径发挥降压、改善心血管功能作用。电针较传统手针具有节省人力资源,刺激参数固定可调的优势。Real-time RT-PCR技术具有高灵敏性、少样品量、高特异性、精确定量等特点,适用于研究高血压前期微小的分子生物学改变。目的本研究围绕电针可以调节应激性高血压前期大鼠血压及改善血管内皮功能这一主题,以中医“治未病”思想为指导,采用应激性高血压前期大鼠模型,观察电针对应激性高血压前期模型大鼠血压、血管内皮相关因子--血清乙酰胆碱(Ach)、神经肽Y(NPY)含量的影响以及对基因CXCR-2、MMP-9、MCP-1表达的影响。揭示应激性高血压前期机体的病理改变以及电针降低血压、改善血管内皮功能的机制,从而为应激性高血压前期的病理变化及电针干预效应、机制提供科学依据,并为高血压前期的防治提供临床参考。方法健康清洁级雄性大鼠(wistar)27只,体质量180±20g。按照随机数字表法分为3组空白组、模型组、电针组,每组9只。模型组与电针组均接受14天的噪声结合足底电击复合应激刺激以制备应激性高血压前期模型,上午下午各2h,空白组不做处理。电针组同时取双侧“太冲”、“曲池”穴,针刺1.5~2mm,连接韩式电针仪(刺激参数1mA, 2Hz),留针20min。各组大鼠于实验前1天及实验开始后第3、5、7、9、11、13、15天测量尾动脉血压。实验周期为14天,第15天测量血压后取血、肾脏,用Elisa法检测血清Ach、NPY含量,PCR方法检测CXCR-2、MMP-9、MCP-1表达的变化。结果1.应激刺激与电针干预对各组大鼠收缩压的影响经过14天的噪声结合足底电击复合刺激后,各造模组血压均升高。与空白组相比,模型组大鼠从造模第3天开始,血压显著上升(P0.01),并且在之后的11天中,血压持续上升(P0.01),最终维持在高血压前期高值状态(130/139~85/89mmHg)。与模型组比较,电针组血压在前3天有所上升,但两组比较仍有差异(P0.05),从第5天开始至第15天,差异显著(P0.01)。2.应激刺激与电针干预对各组大鼠血清Ach、NPY的影响与空白组比较,模型组中血清NPY含量显著升高(P0.01);与模型组比较,电针组中NPY含量显著降低(P0.01)。与空白组比较,模型组中血清Ach含量显著降低(P0.01);与模型组比较,电针组中Ach含量显著升高(P0.01)。3.应激刺激与电针干预对各组大鼠肾脏CXCR-2、MMP-9、MCP-1表达的影响与空白组比较,模型组肾脏组织中CXCR-2 (P0.01)、MMP-9 (P0.01)、MCP-1 (P0.01)的表达均显著上升;与模型组比较,电针干预组CXCR-2 (P0.01)、MMP-9 (P0.01)、MCP-1 (P0.01)的表达均显著下降。结论1.电针有降低应激性高血压前期大鼠模型血压的作用;2.电针可以升高应激性高血压前期大鼠模型血清Ach、降低血清NPY含量;3.电针调节血压的机制可能与抑制CXCR-2、MMP-9、MCP-1基因表达,减轻炎症反应和抑制血管重构,干扰血压升高-内皮损伤-血压升高循环有关。
【关键词】:电针 高血压前期 基因 应激 血管内皮
【学位授予单位】:北京中医药大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R245
【目录】:
- 摘要6-8
- ABSTRACT8-10
- 英文缩略词表10-11
- 第一部分 文献综述11-37
- 综述一 中西医对高血压前期的认识11-23
- 1 现代医学对高血压前期(PHT)的研究概述11-18
- 2 中医对高血压前期的认识18-23
- 综述二 中西医干预高血压前期研究进展23-27
- 1 现代医学对高血压前期的干预措施23-24
- 2 中药干预高血压前期的研究24-25
- 3 针刺对血管内皮损伤的保护效应25
- 4 针刺干预高血压的效应及机制25-27
- 参考文献27-37
- 第二部分 实验研究37-76
- 前言37-40
- 实验一:电针对SI-PHT模型大鼠血清ACH、NPY含量的影响40-58
- 材料40-41
- 1 实验材料40-41
- 1.1 实验动物40
- 1.2 实验仪器40
- 1.3 实验试剂40-41
- 1.4 酶联免疫吸附测定(ELISA)原理41
- 方法41-46
- 2 实验方法41-46
- 2.1 实验动物分组41-42
- 2.2 动物模型制备42
- 2.3 取穴标准42
- 2.4 干预方法42
- 2.5 取材方法42-43
- 2.6 指标检测与方法43-44
- 2.7 统计学处理44-45
- 2.8 实验流程图45-46
- 结果46-49
- 小结49-50
- 讨论50-55
- 参考文献55-58
- 实验二:电针对SI-PHT基因CXCR-2、MMP-9、MCP-1表达的影响58-76
- 材料58
- 1 实验材料58
- 1.1 实验动物58
- 1.2 实验仪器58
- 1.3 实验试剂58
- 方法58-63
- 2 实验方法58-63
- 2.1 实验动物分组58-59
- 2.2 动物模型制备59
- 2.3 取穴标准59
- 2.4 干预方法59
- 2.5 取材方法59
- 2.6 对基因CXCR-2、MMP-9、MCP-1进行real-time RT-PCR验证59-62
- 2.7 实验流程图62-63
- 结果63-66
- 讨论66-71
- 结语71-73
- 1. 结论71-72
- 2. 创新点72
- 3. 存在问题与不足72-73
- 参考文献73-76
- 致谢76-77
- 个人简历77
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