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过敏体质Treg细胞分化相关分子表达及过敏康调体干预机制研究

发布时间:2017-04-07 09:21

  本文关键词:过敏体质Treg细胞分化相关分子表达及过敏康调体干预机制研究,由笔耕文化传播整理发布。


【摘要】:研究目的:通过比较过敏体质和平和体质Treg细胞分化相关因子的表达差异,寻找过敏体质有效的特有分子标志物,探索调体方“过敏康”调理过敏体质、治疗过敏性疾病的生物学作用靶点,从中医体质学角度探索过敏性疾病的治疗方法,以期进一步指导临床。方法:以中医体质分类判定标准、过敏原检测为判定标准纳入受试者44人,受试者均来自北京中医药大学国医堂中医体质辨识中心等处的体检者,年龄在18-40周岁之间。其中单一过敏体质者24人,排除其他西医明确诊断疾病者、孕妇及哺乳期妇女者,为干预组;平和体质者20人,为对照组。两组年龄、性别等基线可比,嘱咐干预组受试者中药干预期间不服其他抗过敏治疗药物。采血干预前需签署知情同意书。平和体质者及过敏体质者用药前后于清晨空腹状态下分别采集血样10ml,其中36ul全血按QuantiGene Plex试剂盒说明书预处理,其余血样分离血清,于-80度冰箱冻存。采集的血清以蛋白芯片法检测IL-6R、IL-10、 TGF-β、IL-2蛋白表达水平,预处理的全血以QuantiGene Plex法检测基因IL-10mRNA、IL-6RmRNA、IL-2RBmRNA、ITKmRNA, IL-4mRNA的表达水平。数据分析用SPSS17.0软件处理,过敏体质与平和体质者指标差异用单因素方差分析,过敏体质干预前后指标差异用配对样本t检验分析,数据以均值±标准差(x±s)表示,P0.05表示有统计学差异,P0.01表示有显著统计学差异。结果:①过敏体质组干预前,与平和体质组相比:蛋白IL-6R、IL-2蛋白表达水平较平和体质组有升高且有显著统计学差异(P0.01);IL-10、TGF-β二个蛋白表达水平有升高但无统计学差异(P0.05)。IL-4RmRNA、ITKmRNA IL-2RBmRNA这三个基因的表达水平均较平和体质组有升高但没有统计学意义(P0.05)。IL-6RmRNA, IL-lOmRNA这二个基因的表达水平均下降但没有统计学意义(P0.05)。②过敏体质干预后,与干预前相比:蛋白IL-6R蛋白表达水平升高且有显著统计学差异(P0.01);IL-2、IL-10、TGFβ这三个蛋白表达水平均降低但无统计学差异(P0.05)。基因IL-6R mRNA、IL2RBmRNA、 ITKmRNA降低,但改变没有统计学意义(P0.05)。IL-10mRNA、IL-4RmRNA这两个基因的表达均升高但无统计学意义(P0.05)结论:①IL-6R、IL-2蛋白是过敏体质与平和体质之间的显著差异性因子②过敏康调理过敏体质,其途径可能与Treg细胞相关的因子IL-6R有关,具体机制还需进一步探究。②改善的实验数据大多无统计学差异,可能与Treg细胞的可塑性、蛋白间相互作用、过敏体质特异性等原因相关。
【关键词】:过敏体质 Treg细胞 过敏康 调体
【学位授予单位】:北京中医药大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R259
【目录】:
  • 摘要5-7
  • ABSTRACT7-9
  • 符号说明9-10
  • 第一部分 文献综述10-27
  • 综述一 过敏体质的研究概况10-17
  • 1. 理论研究10-12
  • 2. 临床研究12-14
  • 3. 基础实验研究14
  • 4. 结语14-15
  • 参考文献15-17
  • 综述二 Treg细胞在过敏性疾病的作用17-27
  • 1. Treg细胞的类群及特征17-18
  • 2. Treg分化及其信号机制18-20
  • 3. Treg细胞在过敏性疾病的作用20-22
  • 参考文献22-27
  • 前言27-29
  • 参考文献28-29
  • 第二部分 实验研究29-60
  • 实验一 用蛋白芯片技术检测过敏体质人群干预前后及平和体质人群IL-2、IL-6R、IL-10、TGF-β四个蛋白的表达差异29-42
  • 1. 样本来源29-33
  • 2. 实验材料及试剂33-34
  • 3. 实验原理与操作流程34-35
  • 4. 实验步骤35-37
  • 5. 统计方法37-38
  • 6. 实验结果38-42
  • 实验二 QGP法检测IL-10mRNA、IL-6R mRNA、IL-4R mRNA、IL-2RB mRNA、ITK mRNA的表达情况42-52
  • 1. 样品来源42
  • 2. 实验试剂及材料42-43
  • 3. 实验原理和实验步骤43-47
  • 4. 数据处理及统计学分析47-48
  • 5. 实验结果48-52
  • 讨论52-60
  • 1. Treg细胞分化与过敏体质的相关性52
  • 2. 过敏康调理过敏体质的理论基础和药物分析52-55
  • 3. 过敏康对过敏体质人群Treg细胞相关基因和蛋白的作用55-60
  • 结语60-61
  • 参考文献61-66
  • 附录66-71
  • 附录一 中医体质量表66-68
  • 附录二 知情同意书68-71
  • 致谢71-72
  • 个人简历72

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