贵州产土茯苓药材与市售品切面颜色性状和质量类型的相关性研究

发布时间：2015-02-02 17:21

引言

土获苳是一种在中国己有2000多年记载的传统中药材。在明代，由于梅毒传入中亚，”杨梅掩”盛行，土茯等作为治疗杨梅疫要药开始走上中医药的舞台。其中《滇南本草》、《本草纲目》和《霉掩秘录》对土茯等的功能主治进行了归纳总结，并对土茯等治疗杨梅掩的用法及适应证做了详细的记载。土茯等也是一种非常受到欢迎的食材，在岭南地区，它是制作龟等膏（龟板、土获等）的主要材料之一。《中国药典》（2010版，一部）中记载，土茯等为百合科植物光叶孩葜Smilaxglabra Roxb.的干燥根基，具除湿，解毒，通利关节之功能[7]。《本草纲目》记载“土茯苳有赤白二种，白者良”，后来的许多古代医家也认同了这种说法。由此认为土茯等的颜色性状与药材质量之间存在密切关系，从此对于土获等颜色的讨论就不曾停止。本草学者谢宗万先生认为，，土获苳切面之所以有红与白的颜色性状差异，主要的原因是将Smilax glabra Roxb.近源种当做土茯等来使用而产生的[5]。1986年姜荣兰等学者研究也发现Smilax glabra有红、白的区分[6]。2012年课题组收集了一些Smilax glabra的样品进行含量分析，发现红、白样品的落新妇昔含量处于两个不同的水平，具有显著性差异。
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第一章本草考证土获萼颜色的问题

1争论的由来
这其中有许多关键的信息，南人一词交代了这种植物多分布于南方。平泽中有一种藤其语气当中透露出陶弘景本人很有可能并没有见过这个植物，而藤这一词描述了植物的基本形态。叶如菝葜则带有两层信息，一是叶片的形态和孩葜很相似，二是当时的医家对于蔑葜已经很熟悉了，所以陶弘景才会用菝葜来和这种植物做类比。根作块有节这里提示了地下部分的形态信息，很显然这里提到的“根”其实是根莲，这个很有可能是对它药用部位的一个描述。似孩葜而色赤这里再一次和孩葜做了一个对比，地下部分类似于菝葜，“色赤”也就是说它是红的，但前面对于颜色的描述却用了一个“而”字，即有可能是一种转折，也有可能是一种递进之意。菝葜断面的颜色是“棕黄色或红棕色”，由此可知，这里应该是表达一种递进的关系，说明这种植物的颜色较蔬葜更“赤”。根形似mm这里对根莲的描述用了另一种植物“薯蓣”，薯截的药用历史更长，所以人们对薯截会比这种植物更熟悉。薯賴的根莲没有薮葜那样较大的根痕突起，而且质地较软，没有孩葜那样强木质化。

2本草小结
土茯等从开始被记载到真正应用经历了几个朝代的时间，到了明代，这一时期三本主要中医药著作中有均提及土茯苳的应用，《滇南本草》是我国现存最早的地方性本草著作、《本草纲目》、《霉拖秘录》是世界最早关于梅毒的医学专著。土茯苳在中医药体系中的地位可见一斑。其背后的原因可能与梅毒传入中亚有着千丝万缕的关系。也正因如此，土获等的红白问题虽在《本草纲目》仅有寥寥数语，却成为后世本草学为此争论不休的话题。

第三章土茯苓基于UPLC-MS指纹图谱........ 22

1仪器与试剂 .........22

2实验方法...... 23

第四章数据统计学分析.... 34

1软件与数据 ........34

2实验方法 ........34

第五章贵州产土茯苓一测多评方法的建立.................48

1仪器与试药 ..........48

2 HPLC分析方法建立 .......48

第五章贵州产土茯等一测多评方法的建立

1仪器与试药
岛津LC-20A液相色谱仪，紫外检测器（SERIAL NO 20134405524);色谱柱Hypersil ODS2 (5同，4.6x250mm),大连依利特分析仪器有限公司。Waters H-Class超高效液相色谱仪，PDA检测器；万分之一分析天平，梅特勒上海有限公司；超声波清洗机（SK8210LHC，上海科导超声仪器有限公司）落新妇苷Astilbin (批号：30-2007，上海中药标准化研宄中心）；黄圮苷Engeletin (上海同田生物技术股份有限公司，纯度> 99%);乙腈、甲醇为色谱纯；水为乐百氏纯净水，其他试剂均为分析纯。药材样品见表1。

2HPLC分析方法建立
结果：将甲醇与乙腈预混合（v/v)，通过洗脱容量换算混合比从3:7开始。甲醇与乙腈的预混合流动相对于黄紀苷的分离较为满意，出现的峰前沿现象是由于该系统B栗比例较大，体系中PH值变化太快所致，可以通过双菜加酸来改善，但落新妇苷的分离度却较难提高。见图27。称取样品0.3 g (一号蹄），精密称定，置于50 mL具塞维形瓶中，共4份，以 60%乙醇分别精密加入 20 mL、30 mL、40 mL、50 mL，401"12超声20111111，放冷过滤至100 mL量瓶中，用20mL60%乙醇分三次冲洗沉淀，定容至刻度，摇句，0.45 ^011微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。4。C保存备用。以HPLC色谱条件，注入液相色谱仪分析，记录数据。

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第六章本课题总结、创新点及下一步实验规划

1本课题总结
颜色性状分析，对土茯苳的颜色性状进行了量化的定义，并找到了贵州产土茯苳切面红色的颜色分布范围，以及与《中国药典》（2010版，一部）中所记载的颜色性状的区别。化学质量评价，证实了土茯等药材中确实存在着两个质量类型，而且这两个质量类型与颜色性状相关联，通过统计学分析为这种关联提供了理论依据。生成了与颜色性状相关联的化学指纹标准图谱，在一定程度上可以为土获苳药材质量标准的制定与补充提供理论依据。建立了 HPLC、UPLC落新妇苦和黄杞苷一测多评含量分析方法，缩短了分析时间，降低了分析成本，提高了分析效率。

2创新点
在同一个来源下讨论了土茯茶药材切面红色和白色的问题，建立了二者的数字化定义。以颜色测量技术为导向，运用量化的方法准确的定义了土茯苳的颜色性状，并找到了《中国药典》（2010版，一部）土茯苳Smilaxglabra来源中一个未被收录的性状特征。在质谱平台以全谱全信息内标校正的方式建立了土茯苳切面红色和切面白色两个质量类别的标准指纹图谱模式。为土茯等以颜色性状来区分质量类别提供了理论依据。
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参考文献（略）

本文编号：12020