大鼠脑挫伤后脑组织β-APP、MAP-2的时序性表达

发布时间：2019-08-11 17:47

【摘要】： 目的：应用免疫组化SABC法、Western blot免疫印迹法及实时荧光定量RT-PCR技术检测实验性大鼠脑挫伤后脑组织中β-APP和MAP-2的表达变化规律,以期为法医学实践中大致推断颅脑损伤时间提供科学的参考依据。 方法：采用Feeney s法建立大鼠脑挫伤模型。选取64只健康成年SD大鼠,雌雄不限,体重250±10g(由山西医科大学实验动物中心提供),随机分为实验组(n=56)及对照组(n=8),实验组依据损伤时间不同再分为7个亚组。均实施麻醉后,实验组大鼠采用自由落体打击法于颅骨中线旁3mm处造成脑挫伤模型,通过常规HE染色认定损伤部位及损伤程度,对大鼠脑挫伤后14d内继发性脑损伤的病理学改变、β-APP和MAP-2的分布特征进行光镜观察,同时分别于损伤后1h、4h、12h、48h、72h、7d、14d七个时间点(每个时间点8只)取挫伤处脑组织各100mg,置于液氮中保存备用；对照组大鼠未打击造伤,其余处理与实验组相同。应用免疫组化SABC法、免疫印迹Western blot法从蛋白水平观察脑挫伤后β-APP、MAP-2的时序性变化,结合图像分析技术及统计学分析进行结果分析；应用实时荧光定量RT-PCR技术并结合图像分析技术从核酸水平定量半检测实验组及对照组动物的各脑组织β-APP、MAP-2mRNA的时序性变化,观察上述指标与损伤时间的关系。 结果：三种方法统计结果显示：(1)大鼠脑挫伤后β-APP在脑组织中的表达于伤后12h达到峰值,随后阳性反应细胞逐渐减少,7d后仍有少量表达但仍高于对照组,14d后表达基本恢复至接近对照组水平；(2) MAP-2于脑挫伤后1h表达明显丢失,4h后蛋白丢失达到高峰,12h蛋白开始部分恢复表达,48h蛋白量逐渐增多,14d蛋白表达达到高峰。 结论：大鼠脑挫伤后脑组织中β-APP和MAP-2表达随着损伤时间呈规律性变化,有望用于法医学鉴定及早期法医学损伤时间推断。免疫组化技术操作简单且易行,实时荧光定量RT-PCR技术检测分子水平的变化敏感而且精确,适合法医学研究及检案的需要。
【图文】：

图1脑挫伤后p一妙P的表达的时相分布etime一dePendeniehangesofthep一APPPositiveeellnumbersaftep一APP免疫组化SABC法X400;图B实验性大鼠脑挫伤4h后p一APunohistoehemistryofp一APPineontrolSABCMethodx400;Phooehe而stryofp一APPin4haftertheexPerimentaltra切rnatiebodx400

图2脑挫伤后不同时间段MAP一2的表达的时相分布(P<0time一dePendentehangesoftheMAP一2Positiveeellnurnbersafte组MAP一2免疫组化SABC法x400;图B实验性大鼠脑挫伤SABC法X400:PhotoAInllnUnohistoehe而stryofMAP一2OO;PhotoBInunUnohistochemistryofMAP一in4hafterraininjuryinratsSABCMethodx400:
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：D919.4

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 梁新华;王金楠;陈国蕾;孙俊红;路健;焦炎;;实时定量PCR检测大鼠脑挫伤后HIF-1α mRNA的表达[J];中国法医学杂志;2011年04期

2 ;[J];;年期

3 ;[J];;年期

4 ;[J];;年期

5 ;[J];;年期

6 ;[J];;年期

7 ;[J];;年期

8 ;[J];;年期

9 ;[J];;年期

10 ;[J];;年期

相关会议论文 前10条

1 ;MAP Pulse Phase Estimation of X-ray Pulsars[A];第三届中国卫星导航学术年会电子文集——S09组合导航与导航新方法[C];2012年

2 杨严;王建;;MAP法处理垃圾渗滤液中高浓度氨氮的试验研究[A];科技创新与产业发展（A卷）——第七届沈阳科学学术年会暨浑南高新技术产业发展论坛文集[C];2010年

3 黄贵芬;陈虹;胡云峰;;基于模型和MAP图的汽油发动机气路控制[A];第二十九届中国控制会议论文集[C];2010年

4 曾凡云;Hamida M.IMRAN;宫晓艳;付艳苹;谢甲涛;程家森;李国庆;姜道宏;;与真菌细胞壁完整性相关的MAP激酶信号途径调控重寄生真菌盾壳霉分生孢子形成及寄生作用[A];中国菌物学会第五届会员代表大会暨2011年学术年会论文摘要集[C];2011年

5 顾晓生;;外伤性延迟性脾破裂损伤时间推断报道1例[A];全国第六次法医学术交流会论文摘要集[C];2000年

6 林震山;王则金;林启训;;绿芦笋MAP气调保鲜技术研究[A];2006福建省冷藏技术研讨会论文资料集[C];2006年

7 魏梅英;唱亮;冀维林;骆超;;基于MAP的共信道FM信号分离方法在无线电监测工作中的应用[A];2011全国无线及移动通信学术大会论文集[C];2011年

8 徐长盛;李海刚;;过程控制系统数据存储解决方案[A];中国计量协会冶金分会2007年会论文集[C];2007年

9 邵慧;刘峰;;基于统计特性的空域误码掩盖[A];第十三届全国图象图形学学术会议论文集[C];2006年

10 何艳玲;;阿尔卡特移动交换机MAP版本修改方法[A];四川省通信学会2006年学术年会论文集（一）[C];2006年

相关重要报纸文章 前10条

1 汪琴;博科资讯自主MAP平台 成为企业管理创新催化剂[N];中国信息报;2009年

2 王文;改性气体包装MAP在食品业的应用[N];中国包装报;2009年

3 严倩;博科资讯 发布管理自主平台MAP[N];中国劳动保障报;2009年

4 彭克荣;传统法DAP与料浆法MAP联产新工艺通过鉴定[N];中国化工报;2010年

5 本报记者 龚杰;Internet:MapInfo 的新机遇[N];计算机世界;2001年

6 掌中万维（中国）信息科技有限公司 沈谦;迎接移动通信的个性化浪潮[N];人民邮电;2000年

7 本报特约记者 李宪宾;当前国际化肥市场动态[N];中华合作时报;2002年

8 ;21世纪领导者的竞争力[N];中国贸易报;2000年

9 张凤莎;蓝波凭什么笑傲北京[N];科技日报;2001年

10 本报记者 于扬;蓝波三利箭[N];中国计算机报;2001年

相关硕士学位论文 前10条

1 付杰;大鼠脑挫伤后脑组织β-APP、MAP-2的时序性表达[D];山西医科大学;2010年

2 顾均连;大鼠脑挫伤后细胞间粘附因子1的表达与损伤时间推断的研究[D];山西医科大学;2012年

3 刘丽杰;小麦及其面粉MAP保鲜技术研究[D];天津科技大学;2010年

4 闫越;MAP沉淀回收装置的运行条件优化研究[D];郑州大学;2011年

5 黄海;大鼠皮肤创伤愈合过程中SP的表达及其死后稳定性的实验研究[D];重庆医科大学;2010年

6 黄河;重组蛋白MAP30诱导BGC-823细胞凋亡及其凋亡机制的初步研究[D];江苏大学;2010年

7 张蕊;MAP和HAP结晶法除磷工艺研究[D];北京市环境保护科学研究院;2012年

8 李娜;大鼠脑挫伤后血栓调节蛋白的时序性表达[D];山西医科大学;2011年

9 杨严;混凝-MAP法应用于垃圾渗滤液中的试验研究[D];沈阳建筑大学;2011年

10 王洪冠;基于预测的MAP选择算法的研究与实现[D];东北大学;2008年

，

本文编号：2525442