噬菌体展示技术筛选人IFN-γ抗原表位

发布时间：2021-09-12 20:17

　　干扰素（IFNs）是一种由免疫细胞分泌的细胞因子,目前已知的干扰素有3类,IFN-γ是II型干扰素家族中唯一的成员,因其突出的免疫调节能力,又被称作免疫干扰素。虽然IFN-γ在先天和获得性免疫应答、肿瘤监测以及对抗病毒和细菌感染中发挥着重要作用,但IFN-γ的过度表达也会导致很多疾病的发生。应用抗IFN-γ抗体中和体内过多的IFN-γ,被认为是一种有效的治疗手段。然而,鼠源抗体或是人鼠嵌合抗体用于人体后,会引起机体不同程度的免疫应答,不仅影响药效,而且会产生过敏反应。因此,免疫原性较低的全人源抗体药越来越受到研究人员和医疗工作者的重视。利用转基因小鼠制备全人源抗体是一种成熟且可靠的方法,但由于其漫长的研发周期和巨额的资金投入,限制了该方法的广泛使用。于是许多研究人员将目光放在了噬菌体展示技术上,该技术是一种从大量变异体中选出目的多肽或蛋白的体外筛选技术。可利用人免疫球蛋白序列构建全人源抗体库,再以多肽或蛋白为标靶,筛选出全人源抗体。本研究以实验室自有质粒pET28a-IFN-γ为模板扩增出人IFN-γ基因全长片段,经DNA酶随机酶切得到50bp²00bp的基因片段... 

【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校

【文章页数】：61 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

丝状噬菌体的衣壳蛋白和主要两种展示方式[5]

生物淘选[14]

第1章引言4在鸡胚绒毛膜尿囊膜的培养液中加入流感病毒，发现产生了一类抗病毒物质，将其命名为干扰素（interferon，INF）[16]。根据基因、结构、受体复合物的不同，可将IFN分为3种类型：即I型干扰素，II型干扰素和III型干扰素。I型干扰素是干扰素家族中最大的类型，包括IFN-α、β、ω、ε等十余种亚型，其中IFN-α又有十余种亚型；Ⅲ型干扰素（IFN－λ）由IFN－λ1（IL－29）、IFN－λ2（IL－28A）和IFN－λ3（IL－28B）组成；而II型干扰素只有IFN-γ一种。1.2.2IFN-γ的结构和理化性质编码IFN-γ的基因位于12号染色体，由3个内含子和4个外显子组成。单体IFN-γ是一种由143个氨基酸组成的糖蛋白，分子量为17kD左右，由6个α螺旋和一段Ｃ端展开的未折叠序列组成，不含β折叠，无生物活性。具有生物活性的IFN-γ是由两个相同的单体IFN-γ组成的非共价连接的同源二聚体。两个单体以螺旋、反向平行的方式组合，形成一个紧凑的球状分子，具有对称的双重对称轴[17-18]。IFN-γ对酸不稳定，在pH小于2.0时极易被破坏，在56℃条件下，30min被破坏，各种蛋白酶可以将其灭活。图1.3IFN-γ二聚体分子结构图[19]1.2.3IFN-γ的信号通路

【参考文献】：
期刊论文
[1]抗体药物的创新之路[J]. 沈倍奋.  药学进展. 2017(09)
[2]卫Ⅺ项目支付方式改革创新探索[J]. 张朝阳,栗瑞,池延花,王禄生.  医学与社会. 2017(07)
[3]绿色动力 国际潍柴[J].   董事会. 2013(12)
[4]通过IFN-γ影响肿瘤相关巨噬细胞抑制胆囊癌血管发生的实验研究[J]. 孙涛,张明宇,程颖,葛春林.  山东医药. 2011(48)



本文编号：3394879