有氧运动干预高脂膳食诱导大鼠生殖细胞凋亡与TNF-α、IL-6的相关性研究

发布时间：2019-01-22 16:55

【摘要】：实验目的：探讨高脂膳食诱导雄性SD大鼠睾丸生殖细胞凋亡与炎症因子TNF-α、IL-6的关系,并初步揭示有氧运动对雄性高脂膳食大鼠睾丸生殖细胞凋亡与炎症反应的干预作用。实验方法：将48只健康的雄性Sprague-Dawley (SD)大鼠随机分为4组：正常对照组(C)、高脂膳食组(HF)、正常运动组(CE)、高脂运动组(HE),每组12只；C组和CE组给予普通饲料喂养,HF组和HE组给予高脂、高热量饲料喂养。实验结束后,各组大鼠数量为：C组8只,HF组11只,CE组10只,HE组11只。运动方案为10周60min无负重游泳运动,每周6天。实验结束后检测大鼠血清中甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)；测量大鼠体重、体长、脂肪重量,计算Lee's指数及脂体比；酶联免疫吸附法(ELISA)测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素6(IL-6); RT-PCR检测大鼠睾周脂中TNF-α、IL-6以及睾丸中TNFR. IL-6R mRNA的表达量；HE染色观察睾丸组织形态学的变化；原位缺口末端标记法(TUNEL)检测大鼠睾丸组织细胞凋亡情况。实验结果：1.10周后CE组与C组相比,体重呈极显著降低,Lee's指数、TG显著降低,HDL显著升高,睾周脂、脂体比、TC、LD L无显著性差异。HF组与C组相比,体重、睾周脂、脂体比、TC、LDL均呈极显著升高,TG, HDL、Lee's指数均无明显差异。HE组与HF组相比,体重、睾周脂、脂体比、TG、TC、LDL均极显著降低,Lee's指数、HDL无显著性差异。2.CE组与C组相比,大鼠血清中TNF-α、IL-6水平呈显著降低。HF组与c组相比,大鼠血清中TNF-α水平显著升高,IL-6水平有所升高,但无显著性差异。HE组与HF组相比,]NF-α、IL-6水平均呈极显著降低。通过单因素方差分析可知,高脂膳食可引起大鼠血清中TNF-α与IL-6水平增加,而有氧运动可降低血清TNF-α与IL-6水平。3.经HE染色光镜下观察大鼠睾丸组织形态,发现C组生精小管内各级生精细胞发育正常,排列整齐,官腔未见明显狭窄及扩张,管腔内可见大量成熟精子。CE组睾丸生精小管内间隙变宽,成熟精子分布均匀。HF组睾丸组织生精小管管壁变薄,生精细胞数量明显减少且排列紊乱,成熟精子数量显著减少,各级生精细胞出现脱落现象,个别大鼠生精细胞与基底膜之间出现脱离。HE组生精小管内各级生精细胞基本发育正常,偶可见细胞脱落现象,生精小管间可见疏松的间质组织。4.CE组与C组相比,大鼠睾周脂中TNF-α、IL-6的mRNA水平有所升高,但无显著性差异；HE组与HF组相比,睾周脂中TNF-α、IL-6 mRNA水平显著降低。通过单因素方差分析可知,高脂膳食使大鼠睾周脂中TNF-α、IL-6 mRNA水平升高,引起睾周脂出现炎症反应,而有氧运动可以适当降低TNF-α、IL-6 mRNA水平,减轻炎症的影响。5.CE组与C组相比,大鼠睾丸组织中TNFR、IL-6R的mRNA水平有所升高,但无显著性差异；HE组与HF组相比,睾丸组织中TNFR、IL-6RmRNA水平显著降低。通过单因素方差分析可知,高脂膳食使大鼠睾丸组织中TNFR、IL-6RmRNA水平显著升高,引起睾丸组织出现炎症反应,而有氧运动可以适当降低TNFR、IL-6RmRNA水平,减轻炎症的影响。6.大鼠睾丸组织中凋亡细胞情况：与C组相比,CE组睾丸组织中生殖细胞凋亡率有所升高,但无明显差异,HF组和HE组睾丸组织中生殖细胞凋亡率极显著升高。HE组与HF组相比,睾丸组织中生殖细胞凋亡率极显著降低。通过单因素方差分析可知,高脂膳食可能引起睾丸组织的炎症反应,从而导致睾丸组织中生殖细胞凋亡增加,而有氧运动可以缓解这一情况。结论：1.高脂膳食可引发SD雄性大鼠脂代谢紊乱,血清中TNF-α、IL-6蛋白表达及睾脂中的mRNA水平与Lee's指数及血脂四项具有相关性,而有氧运动能改善这一情况。2.高脂膳食可以使SD雄性大鼠睾丸组织结构发生变化,而且能够使得精子凋亡明显增多,通过有氧运动能使这一情况得到改善。3.高脂膳食可引起大鼠血清TNF-α、IL-6蛋白表达及其睾周脂mRNA和睾丸组织中TNFR、IL-6RmRNA水平的升高,其均与凋亡率密切相关,而有氧运动可以对其产生抑制作用,这也可能是有氧运动干预肥胖炎症大鼠生殖细胞凋亡的分子机制。
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【学位授予单位】：扬州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：G804.2

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