【摘要】：目的:观察比较经典补气中药黄芪和常用营养补剂谷氨酰胺(Gln)对大鼠运动性免疫抑制的干预效果,并探讨其可能的作用机制,以期为黄芪和谷氨酰胺作为运动补剂防治运动性免疫抑制及促进运动能力提高提供理论依据。方法:购置2月龄,SPF级雄性SD大鼠,共96只。随机分为四组:安静对照组(C)、运动干预组(E)、运动+黄芪组(EH)、运动+谷氨酰胺组(EG),每组24只。运动方案为6周大负荷游泳运动,每周6天,每次游泳时间180min。采取每日运动前灌胃的方式补充黄芪和谷氨酰胺,EH组补充黄芪的剂量为6.4m L/kg/d,EG组补充谷氨酰胺的剂量为1.5g/kg/d,C组和E组灌服相同剂量的生理盐水。分别在实验前和第2、4、6周末运动后36h内采样(每次6只),观测长期大负荷运动训练中大鼠血液生化指标(Hb、BUN、CK)、免疫器官(脾脏、胸腺)指数和形态学、外周血淋巴细胞及其亚群(CD3+、CD4+、CD8+、CD161+)、血清细胞因子(TNF-α、IL-6、IL-10)的变化,并比较不同干预方法的效果差异。结果:1.体重:同组不同时间点比较,各组体重在2w、4w、6w时均显著高于干预前(P0.01),除E组外,各组体重在4w、6w时均显著高于2w(P0.01);组间比较,E组、EH组和EG组体重在6w时均显著低于C组(P0.01),EH组体重在6w时显著高于E组(P0.01)。2.Hb、BUN、CK:C组、EH组和EG组Hb随着时间推移显著升高,而E组则在4w、6w时显著下降(P0.01)。BUN、CK除C组外均随着时间推移显著升高,BUN在2w时差异明显(P0.01),而CK则在4w时显著增加(P0.01);组间比较,E组BUN在6w时显著高于其他各组(P0.01),而CK则显著高于C组和EG组(P0.01,P0.05)。3.脾脏/胸腺指数与结构:由于体重总体呈上升趋势,除4w时的E组和EG组外,脾脏指数总体呈下降趋势;E组、EH组和EG组胸腺指数均随时间推移逐渐降低,6w时最为显著(P0.01),且E组明显低于EH组和EG组。与C组比较,在6w时E组脾脏和胸腺内部结构界限不清晰,而EH组和EG组无明显变化。4.淋巴细胞及其亚群:同组不同时间点比较,E组CD3+、CD4+/CD8+、CD161+在4w和6w时,均显著低于干预前(P0.01),而EH组和EG组仅有CD161+显著降低(P0.05);组间比较,E组CD3+、CD4+/CD8+、CD161+在4w、6w时显著低于C组(P0.01),EG组CD3+、CD4+/CD8+、CD161+在6w时显著高于E组(P0.05),而EH组仅有CD4+/CD8+显著高于E组(P0.05)。5.TNF-α、IL-6和IL-10:同组不同时间点比较,E组、EH组和EG组TNF-α、IL-6在2w、4w、6w时均显著高于干预前(P0.01),而IL-10显著低于干预前(P0.01);组间比较,E组TNF-α、IL-6在2w、4w、6w时,显著高于C组、EH组和EG组(P0.01),而E组IL-10在2w、4w、6w时显著低于C组、EH组和EG组(P0.01)。结论:1.长期大负荷游泳运动可导致大鼠持续疲劳,黄芪和谷氨酰胺通过避免体重、Hb明显下降及BUN、CK明显升高,能缓解运动疲劳的程度,从而促进其运动机能的恢复。2.长期大负荷游泳运动可引起大鼠机体免疫抑制,黄芪和谷氨酰胺通过维持淋巴细胞及其亚群数量,减轻脾脏和胸腺指数下降程度并保护其内部结构来改善运动导致的免疫抑制,从而增强其免疫功能。3.长期大负荷游泳运动诱导促炎因子TNF-α、IL-6升高,抗炎因子IL-10下降的免疫失衡是运动诱导免疫抑制的机制之一,而黄芪和谷氨酰胺可以维持其平衡。4.黄芪和谷氨酰胺对长期大负荷游泳运动导致的免疫抑制均具有很好的恢复调节作用,两者之间没有显著性差异,黄芪可以作为谷氨酰胺的替代中药补剂之一用于运动性免疫抑制的预防和改善。
【图文】：
3 实验材料与方法保存 3-5 分钟。（4）加入 1mlPBS 使反应停止，然后放入离心机，以 1000rpm 速度离心 5 分钟。（5）倒上清，并用吸水纸吸干流式管中残留液体，加入 1mlPBS，然后放入离心机，，以 1000rpm 的速度离心 5 分钟。（6）重复步骤（5）2 次。（7）最后加入 400ulPBS，上机检测。流式细胞仪临用前需进行调试。（8）用 Flowjo7.6 软件统计分析数据，方法见图 3-1。
0 2 4 60.00.51.01.5CEEHEGTime (Weeks)ThymusIndex(mg/g)0 2 4 60.00.51.01.5CEEHEGTime (Weeks)ThymusIndex(mg/g)a) b)图 4-6 大鼠胸腺指数变化（mg/g）4.2.2 大鼠脾脏/胸腺 HE 染色结果由图 4-7 可知，与 C 组比较，E 组脾脏结构在 6w 时，切片组织有细小的裂纹，和红髓互相交接在一起，界限模糊不清，边缘区不甚明显；EH 组和 EG 组脾脏结 6w 时，白髓和红髓界限尚清晰，边缘区较为明显。
【学位授予单位】：武汉体育学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：G804.2
【参考文献】
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2659182
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