6周跑台运动联合小球藻对高脂膳食大鼠肝脏脂毒性影响的实验研究

发布时间：2017-08-14 17:20

  本文关键词：6周跑台运动联合小球藻对高脂膳食大鼠肝脏脂毒性影响的实验研究

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【摘要】：研究目的:采用动物实验法,通过对实验大鼠Lee’s指数,血浆FFA、IL-6水平变化,以及肝脏FFA、IL-10含量和Chemerin/CMKLR1-m RNA表达水平及KCs浸润情况的比较与分析,探讨高脂膳食对大鼠肝细胞的脂毒性作用以及6周跑台运动联合小球藻对高脂膳食大鼠肝细胞的保护作用。研究方法:健康清洁级SD大鼠46只,8周龄,体重200g±20g克,实验前以普通饲料适应性喂养1周后随机分为5组:普通膳食组(N=10,C组);高脂膳食组(N=10,H组);高脂膳食运动组(N=10,HE组);高脂膳食小球藻组(N=8,HL组)和高脂膳食运动联合补充小球藻组(N=8,HEL组)。C组普通饲料喂养;其余各组高脂饲料喂养;HE、HEL组有氧运动采用0坡度跑台,第一周15m/min,第二周20m/min,以后每周增加1m/min。运动50min/次,1次/天,6次/周,共6周,运动时间:21:00-24:00。HL、HEL组按20mg/kg体重灌胃补充小球藻,其余各组生理盐水等体积灌胃。灌胃时间:运动前半小时。每周测试并记录体重体长数据。第六周末,最后一次运动后各组禁食12小时后大鼠尾静脉取血测空腹血糖,麻醉下心尖采血分离血浆经3000rpm离心30min后取上清液置于冻存管-80℃冰箱中储存待测;迅速摘取肝脏,分别放入液氮和福尔马林液保存待用。ELISA法测血浆IL-6、FINS、FFA和肝脏匀浆IL-10、FFA水平;PCR技术检测CMKLR1-m RNA表达水平;Western blot技术检测Chemerin蛋白表达水平;大鼠肝脏组织切片HE染色观察KCs浸润情况。运用SPSS17.0软件处理测试所获数据。研究结果:1.与C组相比,H组大鼠Lee’s指数、血浆FFA和IL-6含量、肝脏FFA、IL-10含量显著升高(P0.05、P0.01)、Chemerin/CMKLR-m RNA表达明显上调(P0.05)。2.H组大鼠肝脏组织HE染色出现弥漫性、小泡样脂肪变以及库普弗细胞浸润。HOMA-IR有所升高,但无显著意义(p0.05)。3.HE、HL、HEL组大鼠血浆FFA含量、HOMA-IR和HL、HEL组大鼠血浆IL-6含量明显低于H组(p0.01),有氧运动、补充小球藻对血浆FFA和IL-6有显著的交互作用(p0.05),即在相同运动条件下,补充小球藻对抑制血浆FFA和IL-6含量有显著作用(p0.01);但两者对HOMA-IR的影响无交互作用(p0.05)。4.HE、HL、HEL组大鼠肝脏FFA含量和Chemerin/CMKLR-m RNA表达水平明显低于H组(p0.01)、IL-10含量虽有升高但无显著性意义(p0.05);有氧运动、补充小球藻对肝脏FFA和IL-10含量的变化无交互作用(p0.05);对抑制肝脏Chemerin/CMKLR-m RNA表达有显著交互作用(p0.05),即在同时补充小球藻情况下,有氧运动可有效抑制Chemerin/CMKLR-m RNA的上调表达(P0.05)。5.HE、HL、HEL组肝脏组织HE染色,小泡样脂肪变程度减轻。研究结论:1.6周高脂膳食大鼠Lee’s指数增加,血浆FFA、IL-6水平以及HOMA-IR呈不同程度的升高,发生机体脂毒性、肥胖炎症反应和胰岛素抵抗。2.6周高脂膳食导致大鼠肝脏FFA、IL-10浓度升高、肝细胞脂肪变性、KCs浸润和Chemerin/CMKLR1-m RNA表达上调,出现肝脏脂毒性和炎症反应。3.6周有氧运动、补充小球藻可降低高脂膳食大鼠体重,改善机体和肝脏脂毒性,减轻炎症反应和胰岛素抵抗状态,从而保护肝脏功能。且有氧运动联合补充小球藻对肝脏的保护作用比较单一有氧运动或补充小球藻效果更优。
【关键词】：高脂膳食 有氧运动 小球藻 游离脂肪酸 Chemerin/CMKLR1-mRNA
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：G804.7
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-11
• 1 前言11-26
• 1.1 选题依据11-12
• 1.2 文献综述12-26
• 1.2.1 肝脏脂毒性12-14
• 1.2.2 肝脏炎症反应14-15
• 1.2.3 Chemerin及其相关炎症因子15-21
• 1.2.4 有氧运动的抗脂毒性、抗炎作用21-24
• 1.2.5 小球藻概述24-26
• 2 材料与方法26-34
• 2.1 实验材料26
• 2.1.1 实验动物26
• 2.1.2 动物饲料26
• 2.1.3 实验仪器与材料26
• 2.2 实验方法26-28
• 2.2.1 适应性喂养26
• 2.2.2 实验分组和处理26-27
• 2.2.3 干预措施27
• 2.2.4 实验取材27-28
• 2.3 指标检测及方法28-33
• 2.3.1 Lee’s指数28
• 2.3.2 ELISA法检测血浆胰岛素（FINS）、IL-6、FFA、肝脏匀浆IL-10、FFA28-29
• 2.3.3 肝脏组织HE染色29-30
• 2.3.4 RT-PCR法检测肝脏CMKLR1-mRNA30-32
• 2.3.5 Western blot检测Chemerin蛋白32-33
• 2.4 数据统计分析33-34
• 3 实验结果与分析34-45
• 3.1 各实验组大鼠Lee’s指数的变化34-35
• 3.2 各实验组大鼠血浆FFA、血浆IL-6 含量的变化35-36
• 3.3 各实验组大鼠FBG及血浆FINS、HOMA-IR的变化36-38
• 3.4 各实验组大鼠肝脏FFA、肝脏IL-10 水平的变化38-40
• 3.5 各实验组大鼠肝脏CMKLR-mRNA表达水平的变化40-41
• 3.6 各实验组大鼠肝脏Chemerin蛋白表达水平的变化41-42
• 3.7 各实验组大鼠肝脏组织病理切片42-45
• 4 分析与讨论45-49
• 4.1 高脂膳食大鼠Lee’s指数、血浆FFA浓度及IL-6、HOMA-IR水平变化45
• 4.2 高脂膳食大鼠肝脏FFA浓度、Chemerin/CMKLR1-mRNA表达IL-10 浓度的变化45-47
• 4.2.1 高脂膳食大鼠肝脏FFA浓度的变化、脂肪细胞变性与KCs浸润45-46
• 4.2.2 高脂膳食大鼠肝脏Chemerin /CMKLR1-mRNA上调46-47
• 4.2.3 高脂膳食大鼠肝脏IL-10 的水平变化47
• 4.3 有氧运动联合小球藻对肝脏脂毒性和肝脏炎症反应的干预作用47-49
• 5 结论49-50
• 6 参考文献50-57
• 7 攻读硕士学位期间公开发表的论文57-58
• 8 中英文对照表58-59
• 9 致谢59-60

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 詹莉莉;杨志秋;傅正伟;;肥胖与慢性炎症的研究进展[J];中国细胞生物学学报;2011年03期

2 封会茹;计融;李燕俊;李业鹏;江涛;赵熙;钟凯;韩春卉;李玉伟;张靖;陈庭君;;破壁蛋白核小球藻对小鼠免疫调节作用[J];中国公共卫生;2008年07期

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本文编号：673803