游泳运动对非酒精性脂肪肝大鼠心肌细胞自噬的影响

发布时间：2017-09-28 06:41

  本文关键词：游泳运动对非酒精性脂肪肝大鼠心肌细胞自噬的影响

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【摘要】：目的:探讨有氧运动对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠心肌细胞自噬水平的影响及可能的机制。方法:8周龄雄性SD大鼠50只,随机分为空白对照组(n=20)和NAFLD模型组(n=30),空白对照组饲以标准普通饲料,模型组饲以高脂饲料。实验第8周,对照组和模型组各随机取10只,依次标记为C8组和M8组,做肝脏病理切片以及检测血液生化指标,确定NAFLD模型成功后,将余下模型组随机分为:16周模型组(M16组,n=10)和运动模型组(EM组,n=10),对照组剩余10只编为16周空白对照组(C16组,n=10)。C16组继续饲以标准普通饲料,M16组和EM组继续饲以高脂饲料,EM组给予无负重有氧游泳运动(60min/d、6d/w、8w)至第16周实验结束。全自动生化分析仪检测大鼠血清TG、TC、ALT和AST的含量。HE染色光镜下观察肝脏的脂肪变性情况。透射电镜下观察心肌的超微结构。ELISA法测心肌游离脂肪酸(FFA)、丙二醛(MDA)、过氧化物歧化酶(SOD)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)。Western-blot法测心肌Beclin-1和核因子-κB(NF-κB)蛋白表达。结果:1.C8组未见明显肝细胞脂肪变性,M8组10只中有8只发现肝细胞脂肪变性,与C8组比较,M8组肝细胞脂肪变积分显著增加。C16组和M16组肝细胞脂性变程度较第8周明显加重。C16组10只大鼠中,仅2只可见肝细胞内少量脂肪性变;M16组10只大鼠全部肝细胞脂肪变性明显;EM组9只中6只可见肝细胞脂肪变性。M16组和EM组肝细胞脂性变积分明显高于C16组;与M16组比较,EM组肝细胞脂性变积分降低。2.与C8组比较,M8组大鼠血清AST、ALT、TC及TG含量显著升高。与C16组比较,M16组大鼠血清AST、ALT、TC及TG含量均显著增加;EM组大鼠血清AST、ALT、TC及TG含量均明显低于M16组。3.电镜下观察,M16组心肌部分线粒体肿胀,嵴稀且短,视野下未见自噬双层膜。EM组心肌细胞核结构正常,线粒体结构较完整但出现部分嵴稀、肿胀,视野下可见自噬囊泡吞噬内容物。4.M16组心肌MDA和TNF-α含量显著高于C16组,SOD含量显著降低;与M16组相比,EM组心肌FFA、MDA和TNF-α含量降低,SOD含量升高,但无显著性差异。5.M16组心肌NF-κB相对表达量显著高于C16组和EM组。M16组心肌Beclin-1相对表达量明显低于C16组;与M16组比较,EM组心肌Beclin-1相对表达量显著升高。结论:1.8周高脂饮食可致80%SD大鼠发生NAFLD,其病变程度随时间延长而加重;2.16周高脂饮食导致NAFLD大鼠心肌细胞自噬水平降低,心肌细胞损伤加重;3.8周游泳运动能够提高NAFLD大鼠心肌细胞自噬水平,减轻心肌细胞损伤,提示有氧运动对减轻NAFLD的心肌细胞损伤有积极作用。
【关键词】：游泳运动 非酒精性脂肪肝 心肌 自噬 Beclin-1
【学位授予单位】：成都体育学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：G861.1;G804.2
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 英文缩写中英文对照表10-11
• 1 前言11-13
• 1.1 选题依据11-12
• 1.2 研究内容12-13
• 1.3 技术路线13
• 2 文献综述13-20
• 2.1 非酒精性脂肪肝13-14
• 2.2 非酒精性脂肪肝的发病机制14-15
• 2.3 非酒精性脂肪肝与心肌细胞损伤15-19
• 2.3.1 异位脂质沉积15
• 2.3.2 氧化应激与脂质过氧化15-16
• 2.3.3 炎症反应16-17
• 2.3.4 细胞自噬异常17-19
• 2.4 运动干预19-20
• 2.4.1 有氧运动对非酒精性脂肪肝病的保护作用19
• 2.4.2 有氧运动对心肌细胞自噬的调控作用19-20
• 3 材料与方法20-29
• 3.1 动物分组与处理20-21
• 3.1.1 实验对象20
• 3.1.2 实验对象造模及分组20-21
• 3.1.3 膳食控制和运动方案21
• 3.2 样本采集与保存21-22
• 3.3 实验仪器与试剂22-25
• 3.3.1 主要实验仪器22-23
• 3.3.2 主要试剂23
• 3.3.3 主要试剂配方23-25
• 3.4 指标测试与方法25-29
• 3.4.1 基础指标测试25
• 3.4.2 肝组织HE染色病理学检查25
• 3.4.3 透射电子显微镜观察心肌细胞损伤25-26
• 3.4.4 ELISA法测定心肌FFA、MDA、SOD和TNF α 的含量26-27
• 3.4.5 Western blot法测定心肌Beclin 1 和NF κB蛋白表达27-29
• 3.5 统计学分析29
• 4. 结果29-41
• 4.1 实验干预对各组大鼠体重的影响29-31
• 4.2 各组大鼠肝脏组织形态学变化31-36
• 4.2.1 肉眼观察31-33
• 4.2.2 光学显微镜下观察肝脏组织HE染色病理切片33-36
• 4.3 各组大鼠血清ALT、AST、TC及TG含量变化36-37
• 4.4 各组大鼠心肌FFA、SOD、MDA和TNF-α 含量变化37-38
• 4.5 各组大鼠心肌超微结构电镜观察结果38-40
• 4.6 各组大鼠心肌Beclin-1 和NF-κB蛋白表达变化40-41
• 5 分析与讨论41-47
• 5.1 NAFLD大鼠模型的建立分析41-42
• 5.2 有氧运动对NAFLD大鼠体重、血清AST、ALT、TC以及TG的影响 .42-43
• 5.3 有氧运动对NAFLD大鼠心肌细胞FFA、SOD、MDA、TNF-α 含量和NF-κB蛋白表达量的影响43-44
• 5.4 有氧运动对NAFLD大鼠心肌Beclin-1 蛋白表达量的影响44-47
• 6 小结47-48
• 7 参考文献48-56
• 致谢56-57
• 在读期间发表的学术论文与研究成果57

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本文编号：934369