大果山楂黄酮类物质的提取及其抗氧化性和降血脂功能研究

发布时间：2017-03-19 11:00

  本文关键词：大果山楂黄酮类物质的提取及其抗氧化性和降血脂功能研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：大果山楂(Malus domeri(Bois)Chev.)属于南山楂(Crataegus cuneata Sieb. etZucc.)一种,是由传统的小果南山楂经过选育嫁接而得。大果山楂在广西种植已有八十多年历史,主要产地位于广西东北部,尤其是贺州地区和桂林地区。果粒大是桂东北地区大果山楂的主要特征之一,其果实表面光滑鲜亮,味道酸甜可口。大果山楂富含黄酮类物质,黄酮类化合物天然无毒,具有多种生物活性。本文以桂东、桂北、桂南四个产地大果山楂为研究对象,采用响应面法研究了大果山楂中黄酮类物质的提取工艺,并对其抗氧化性及降血脂功能开展研究。以小鼠作为实验动物,建立小鼠高脂血症模型,探讨了大果山楂黄酮类物质对高脂血症小鼠相关生理生化指标的影响,由此评价大果山楂黄酮类物质抗氧化和降血脂作用,为合理利用这—资源开发功能性食品提供一定的参考依据。主要实验结果如下：1、本研究在单因素试验的基础上采用Box-Behnken响应面法,建立大果山楂黄酮类物质提取量回归方程,模型的拟合度好。采用上述优化提取条件得到参数工艺：乙醇体积分数50%,提取温度70℃,提取时间3.5h,料液比1：18。重复实验,大果山楂黄酮类物质提取量平均值为22.68mg/g。2、经盐酸-锌粉实验、醋酸铅反应、三氯化铁试验和碱性酒石酸铜试验,证明大果山楂提取物中含有黄酮类、多酚类、多糖类物质及有机酸。昭平、丹龙、新里、平乐四个产地大果山楂中黄酮类物质含量分别为22.68mg/g、25.02mg/g、23.89mg/、21.25mg/g。不同产地大果山楂鲜果功能活性物质含量排序依次为：丹龙新里昭平平乐。大果山楂与小果山楂相比,其多酚类和黄酮类含量优于小果山楂,但多糖含量低于小果山楂。3、大果山楂黄酮类物质具有一定的抗氧化能力,对·OH和DPPH·自由基均有良好的清除作用。昭平、丹龙、新里、平乐四个产地大果山楂黄酮类提取液体外·OH自由基清除率分别为59.26%、63.93%、61.18%、53.11%,DPPH·清除率分别为81.38%、86.25%、83.75%、79.75%。清除率由大到小依次为：丹龙新里昭平平乐,并且随着提取液中黄酮类含量的增加,对自由基清除能力也逐渐增强,但是当含量达到0.2mg后,自由基的清除率不再增加。因此提取液对自由基的清除率与其中黄酮类物质含量相关,但不具有显著的量效关系。4、大果山楂黄酮类物质具有体外结合胆酸盐的能力。以考来烯胺作对照,丹龙、新里、昭平三个产地大果山楂黄酮类提取液结合牛磺胆酸钠STC、甘氨胆酸钠SGC和胆酸钠SC的能力优于平乐产地提取液。5、丹龙产地大果山楂黄酮类物质结合胆酸盐能力最佳,相对降脂药物考来烯胺,其结合STC、SGC和SC的对照值分别为38.4%、46.5%、42.8%,并且结合胆酸盐的能力与反应时间及提取液中黄酮类物质含量相关。在反应开始时提取液结合三种胆酸盐的速度较快,反应时间40min内已基本到达平衡。当提取液中黄酮类初始含量在0.04mg～0.16mg范围内时,对胆酸盐的结合率较高,并且随着黄酮类初始质量浓度的增大而增大。当黄酮类物质初始含量达到0.20mg时提取液对胆酸盐的结合作用趋于平缓,最后达到一个极大值而不再变化。6、以SD小鼠作为实验动物,建立小鼠高脂血症模型,研究分析了大果山楂黄酮类物质对高脂血症小鼠相关生理生化指标的影响。大果山楂黄酮类物质降血脂功能：实验小鼠高脂组与空白组相比,血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)含量明显升高,差异极显著(P0.001),说明建模成功。血脂康能非常显著的降低血清TC、TG值(P0.01),且能升高HDLC、降低LDLC,因此说明血脂康具有较好的降脂作用,可以作为实验的阳性对照药物。给药后,大果山楂黄酮低、中、高剂量组均能使小鼠血清和肝脏组织中TC、TG的含量下降,且高剂量组(300mg/kgbw/d)作用显著(P0.05)。大果山楂黄酮对于血清中HDLC含量和LDLC含量无显著影响(P0.05)。大果山楂黄酮对高脂血症小鼠体重和脏器指数均有一定降低作用,但效果不显著。7、大果山楂黄酮类物质对机体总抗氧化能力和抗氧化酶的活力影响：与正常组相比,实验小鼠高脂模型组的血清SOD和T-AOC值显著降低,说明高脂组体内总抗氧化能力降低。大果山楂黄酮各组均能提高血清SOD和T-AOC值,且呈一定的量效关系,高剂量组(300mg/kgbw/d)的作用显著(P0.05)。对于肝脏组织中的SOD值,中剂量和高剂量组作用非常显著(P0.01),但T-AOC值在肝脏组织中变化较小,各组之间作用差异不显著(P0.05)。
【关键词】：大果山楂 黄酮类物质 提取 抗氧化 降血脂
【学位授予单位】：广西大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：TQ28;TQ460.1
【目录】：

• 摘要4-7
• ABSTRACT7-15
• 第一章 绪论15-27
• 1.1 大果山楂简介15
• 1.2 大果山楂主要活性成分15-16
• 1.2.1 黄酮类化合物15-16
• 1.2.2 熊果酸16
• 1.2.3 单体有机酸类16
• 1.2.4 其他成分16
• 1.3 大果山楂药理功能16-18
• 1.3.1 心血管系统功能17
• 1.3.2 对自由基的清除作用17
• 1.3.3 胃肠系统功能17
• 1.3.4 护肝作用17-18
• 1.3.5 抑菌作用18
• 1.3.6 对免疫系统的影响18
• 1.4 大果山楂黄酮研究进展18-19
• 1.5 植物黄酮常见的提取分离方法19-21
• 1.5.1 提取方法19-21
• 1.5.2 分离方法21
• 1.6 植物黄酮的定量分析方法21-22
• 1.7 植物黄酮生物活性的研究进展22-25
• 1.7.1 植物黄酮的抗氧化活性22-23
• 1.7.2 植物黄酮的降血脂活性23-24
• 1.7.3 植物黄酮的调节心脑血管活性24
• 1.7.4 植物黄酮的抗癌抗肿瘤活性24-25
• 1.7.5 植物黄酮的抗菌活性25
• 1.7.6 植物黄酮的其他生物活性25
• 1.8 课题研究的目的、意义及主要内容25-27
• 第二章 响应面法优化大果山楂中黄酮类物质的提取工艺27-42
• 2.1 材料与仪器27-28
• 2.1.1 实验仪器27
• 2.1.2 实验试剂27-28
• 2.1.3 实验材料28
• 2.2 实验方法28-31
• 2.2.1 原料预处理28
• 2.2.2 植物化学鉴定28
• 2.2.3 大果山楂提取液制备28-29
• 2.2.4 黄酮类含量测定方法29
• 2.2.5 多酚类含量测定方法29
• 2.2.6 多糖含量测定方法29
• 2.2.7 不同有机溶剂提取对大果山楂中黄酮类物质提取量的影响29-30
• 2.2.8 单因素实验30
• 2.2.9 响应面法优化大果山楂黄酮类物质提取工艺30
• 2.2.10 不同产地大果山楂中功能活性成分含量比较分析30-31
• 2.3 结果与分析31-40
• 2.3.1 植物化学定性鉴定结果31
• 2.3.2 黄酮类含量测定标准曲线31
• 2.3.3 多酚类含量测定标准曲线31-32
• 2.3.4 多糖含量测定标准曲线32
• 2.3.5 不同有机溶剂提取能力比较32-33
• 2.3.6 单因素实验结果33-35
• 2.3.7 响应面实验结果与分析35-39
• 2.3.8 不同产地大果山楂中活性成分含量比较分析结果39-40
• 2.4 讨论40-41
• 2.5 本章小结41-42
• 第三章 大果山楂黄酮类物质抗氧化及降血脂作用研究42-53
• 3.1 材料与仪器42-43
• 3.1.1 实验仪器42-43
• 3.1.2 实验试剂43
• 3.1.3 实验材料43
• 3.2 实验方法43-46
• 3.2.1 大果山楂黄酮类物质抗氧化能力测定43-44
• 3.2.2 大果山楂黄酮类物质体外结合胆酸盐实验44-46
• 3.3 结果与分析46-51
• 3.3.1 大果山楂黄酮类物质抗氧化能力测定结果46-48
• 3.3.2 大果山楂黄酮类物质提取液体外结合胆酸盐实验结果48-51
• 3.4 讨论51-52
• 3.5 本章小结52-53
• 第四章 大果山楂黄酮类物质对高脂血症小鼠血脂和抗氧化指标影响53-62
• 4.1 材料与仪器53-54
• 4.1.1 实验仪器53
• 4.1.2 实验材料53-54
• 4.2 实验方法54-56
• 4.2.1 建模高脂乳剂的配制54
• 4.2.2 高脂血症模型建立54
• 4.2.3 实验动物分组与样品剂量设计54-55
• 4.2.4 动物实验方法55
• 4.2.5 检测指标55-56
• 4.2.6 数据统计56
• 4.3 结果与分析56-60
• 4.3.1 实验期间小鼠的基本状况56
• 4.3.2 小鼠高脂血模型的建立56
• 4.3.3 大果山楂黄酮类物质对小鼠体重的影响56-57
• 4.3.4 大果山楂黄酮类物质对高脂血症小鼠血脂水平的影响57-58
• 4.3.5 大果山楂黄酮类物质对高脂血症小鼠抗氧化水平指标的影响58-59
• 4.3.6 大果山楂黄酮类物质对高脂血症小鼠肝脏指数的影响59-60
• 4.4 讨论60
• 4.5 本章小结60-62
• 第五章 结论与展望62-65
• 5.1 结论62-63
• 5.2 展望63-65
• 参考文献65-71
• 致谢71-72
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文情况72

【参考文献】

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本文编号：255905