花翅摇蚊细胞色素P450应答取代苯胁迫生化和分子毒理机制

发布时间：2018-06-29 02:20

  本文选题：取代苯 + 花翅摇蚊　； 参考：《东北林业大学》2015年硕士论文

【摘要】：随工农业废水的排放取代苯类有机污染物对水生生态系统造成破坏,长期累积对人类健康将造成不可逆的危害。摇蚊是水体环境中良好的指示生物,其体内细胞色素P450又可作为生物标志物能对水体污染物的暴露进行早期预警。本文选取苯酚、对氯苯酚、对苯二胺三种取代苯,以花翅摇蚊4龄幼虫为研究对象,测定了3种取代苯对其急性毒性和联合毒性、取代苯的单一和联合作用对细胞色素P450酶活性及CYP6家族基因表达的影响,具体结果如下：(1)3种取代苯对摇蚊4龄幼虫急性毒性大小为对氯苯酚对苯二胺苯酚,处理48 h半数致死浓度LC50范围为10～130 mg/L,表现为低毒性,基团毒性大小为-C1-NH2-OH;4种评价方式对苯酚+对氯苯酚(1：1、2：1、1：2)、苯酚+对苯二胺(1：1、2：1、1：2)、对氯苯酚+对苯二胺(1：1、2：1、1：2)9组不同二元取代苯联合毒性的评价结果表明AI与λ法的评价毒性大小相一致,M与MTI评价毒性大小相一致。四种评价方法对不同取代苯毒性单位配比(1：1、2：1、1：2)的评价结果均以协同作用为主,表明二元混合物联合毒性作用与各组分浓度关系不大。(2)3种单一取代苯(1～100μmol/L)对4龄摇蚊幼虫体内P450酶活性主要表现为抑制作用。苯酚对4龄摇蚊幼虫体内P450酶活性的抑制随浓度和时间的增加抑制作用增大,对氯苯酚随着作用时间的增加而抑制作用减小,而对苯二胺主要表现为随浓度和时间的增加诱导作用逐渐增强；离体细胞色素P450对苯酚、对氯苯酚、对苯二胺3种取代苯敏感性小,半数抑制浓度IC50分别为576.85 mg/L.466.15 mg/L和594.43mg/L,敏感性大小为对氯苯酚苯酚对苯二胺；苯酚+对氯苯酚组(1：1)与苯酚+对苯二胺(1：1)处理组中,摇蚊体内P450酶活性均低于对照,主要表现为抑制作用；亚致死浓度LC20处理组摇蚊体内P450酶活性高于LC10处理组,表现为对P450酶的抑制作用降低。(3)摇蚊10个CYP6全长基因编码蛋白质氨基酸个数为421～528 aa,分子量为49.01～61.94 kDa,理论等电点(PI)为6.01～8.50。亚致死浓度(LC10、LC20)苯酚+对氯苯酚、苯酚+对苯二胺胁迫下,CYP6GB1基因均处于诱导激活状态,诱导范围为1.10倍～45387.27倍。亚致死浓度LC10苯酚+对氯苯酚胁迫下对CYP6基因的表达主要以抑制作用为主,随浓度(LC20)与时间的增加,抑制作用降低；亚致死浓度(LC1o)苯酚+对苯二胺胁迫下,10个CYP6基因均表现为诱导激活作用,但随作用时间增加,诱导作用降低。痕量苯酚浓度(1μmol/L、10μmol/L、100μmol/L)胁迫下,10个CYP6基因表达响应聚为3大类群,其中CYP6EV10、CYP6EW3、CYP6EV9、CYP6FX1、 CYP6FY1为一大类,CYP6FW1、CYP6EY2聚为一类；CYP6FV1、CYP6FV2、CYP6GB1为—大类,其中对CYP6FV1、CYP6FV2、CYP6GB1主要表现诱导激活作用,对其余7个基因(CYP6EV10、CYP6EW3、CYP6EV9、CYP6FX1、CYP6FV1、CYP6FW1、CYP6EY2)主要表现为抑制作用。本研究结果显示取代苯类有机污染物对摇蚊幼虫P450酶活性与CYP6基因表达具有抑制作用,表明摇蚊幼虫参与了取代苯类有机污染物胁迫的应答反应,并表现出一定时间-剂量效应,可作为水体环境质量监测提供一定的依据。
[Abstract]:In this paper , the effects of three substituted benzene ( 1 : 1 , 2 : 1 , 1 : 2 ) , phenol + p - phenylenediamine ( 1 : 1 , 2 : 1 , 1 : 2 ) , phenol + p - phenylenediamine ( 1 : 1 , 2 : 1 , 1 : 2 ) and p - chlorophenol + p - phenylenediamine ( 1 : 1 , 2 : 1 , 1 : 2 ) on cytochrome P450 enzyme activity and CYP6 family gene expression were studied .
The IC50 of cytochrome P450 to phenol , p - chlorophenol and p - phenylenediamine was lower than that of p - chlorophenol and p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p - p -
In the treatment group of phenol + p - chlorophenol group ( 1 鈭，

本文编号：2080397