高灵敏荧光生物传感法检测水中双酚A和汞离子的研究
发布时间：2021-01-14 10:15
随着人类生产与生活的发展,环境污染物对人类的危害逐渐显著,人们对污染物检测的精确度要求也日益提高,建立新的、灵敏度高的检测方法变得十分重要。本论文主要以增强检测信号和提高检测方法选择性为目标,基于不同的纳米材料研究了能提高检测方法的灵敏度的检测方法,并设计了几种新的检测方法,并将其应用于水溶液中BPA和Hg2+的检测。本论文包括的内容如下:（1）建立了一种高灵敏检测BPA的磁性分离荧光适配体传感器。首先,制备了 NH2-Fe3O4,然后通过氨基与羧基的温和化学反应,与带有羧基的捕获探针通过肽键连接,获得DNA-纳米粒子复合物。再加入AHN标记的适配体,适配体可以通过碱基互补配对与捕获探针形成双螺旋结构。在BPA存在下,AHN标记的适配体更倾向于与BPA特异性结合,导致BPA适配体从双螺旋结构中释放并包裹BPA。这个过程中关键的是,适配体与BPA特异性亲和力强于与捕获探针结合的能力。在没有BPA的情况下,AHN标记的适配体仍然与捕获探针杂交,磁性分离后的上清液中不能检测到荧光信号。在最佳优化条件下,方法的检测限达到0.047 ng/mL。该方法有效地降低了其他物质的干扰,具有良好的选择性...
【文章来源】：湖南大学湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：80 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２．１?ＮＨ２－Ｆｅ３０４的透射电镜图??Ｆｉｇｕｒｅ?２．１?ＴＥＭ?ｉｍａｇｅ?ｏｆ?ＮＨ２－Ｆｅ３〇４??
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杂交和培育时间以及操作温度在检测灵敏度时起关键作用。??通常，Ｈｏｏｇｓｔｅｅｎ碱基配对的稳定性依赖于ｐＨ［１１８］，ｐＨ值也会影响荧光??染料的荧光强度。随着ｐＨ增加记录荧光信号（图２．４）。发现ｐＨ值在４．０－??７．５时荧光强度随ｐＨ的增加而增加，当超过７．５后荧光强度随之降低。??这可能是因为ＤＮＡ在中性偏碱性环境中相对稳定，而且缓冲液的ｐＨ值??对适配体的稳定性有很大影响［１１９，１２（）］。为了方便后续实验的进行，选择７．５??作为传感系统中的最佳ｐＨ值。??此外，研究了?ＤＮＡ－纳米颗粒和ＡＨＮ标记的适配体之间的杂交时间。??尽管培育时间越长杂交结构更稳定，但过长的培育会浪费时间并可能导??致非特异性吸附［１２１，１２２］。随着杂交时间的增加记录荧光信号（图２．５（ａ））。??发现荧光强度在４?ｍｉｎ到２４?ｍｉｎ之间逐渐増加，并在２４?ｍｉｎ达到平台。??为确保杂交的完整性
【参考文献】：
期刊论文
[1]磁性富集荧光法检测大肠杆菌[J]. 杨宇,牛承岗,曾光明. 中南大学学报(自然科学版). 2017(05)
[2]快速简便的杂交检测DNA（英文）[J]. 毛强,耿天龙,王胜华. 光谱学与光谱分析. 2014(06)
[3]高效液相色谱法同时测定环境水体中的双酚A、辛基酚和壬基酚[J]. 孙秀武,张元标,林辉,林红梅,邝伟明,黄海宁,暨卫东. 分析科学学报. 2013(02)
[4]FISH技术解析不同氨氮浓度MBR中的微生物群落结构[J]. 杨小丽,周娜,陈明,张瑞,宋海亮,傅大放. 东南大学学报(自然科学版). 2013(02)
[5]聚合物/无机纳米复合材料的应用进展[J]. 宋波. 广东化工. 2011(06)
[6]导数恒能量同步荧光法同时分析咔唑、苯并（a）芘、苝和2,3-苯并蒽[J]. 何立芳,林丹丽,李耀群. 环境化学. 2005(01)
[7]有机荧光染料的研究进展[J]. 贾建洪,盛卫坚,高建荣. 化工时刊. 2004(01)
[8]有机荧光染料纳米颗粒的制备及其包埋机制的研究[J]. 段菁华,王柯敏,谭蔚泓,何晓晓,黄杉生,李杜,羊小海,胡永强. 化学传感器. 2002(03)
[9]“标记”芘的激基缔合物荧光在水溶性高分子研究中的应用[J]. 高峰,任碧野,童真. 高分子通报. 2000(04)
博士论文
[1]高灵敏纳米生物传感体系构建及在环境检测中的应用[D]. 吕笑笑.湖南大学 2015
本文编号：2976712
【文章来源】：湖南大学湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：80 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２．１?ＮＨ２－Ｆｅ３０４的透射电镜图??Ｆｉｇｕｒｅ?２．１?ＴＥＭ?ｉｍａｇｅ?ｏｆ?ＮＨ２－Ｆｅ３〇４??
?ＢＰＡ?＼ｉ??图２．３适配体传感器的实验原理图??Ｆｉｇｕｒｅ?２．３?Ｔｈｅ?ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ?ｐｒｉｎｃｉｐａｌ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｐｒｏｐｏｓｅｄ?ａｐｔａｓｅｎｓｏｒ??４００－??；ＢＭＢ?ＤＮＡ－ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｔｅ??｜：潘＞：ｒｅｃｏｖｅｒｅｄ?ＤＮＡ－ｆｉａｎｏｐａｒｔｒｃｌｅ??＾?３２０?－?－?．??ｉ２，〇－?？?ｉ??ｉ?Ｆｆｎ?｜ｉ?１１??ｌ１６０＂?■＆：；??Ｉ??ｌｌｌｌ?ＩＩ?ｌｌｌｌ??５?１０?２０??Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?（ｎｇ／ｍＬ）??图２．４?ＤＮＡ－纳米颗粒和回收的ＤＮＡ－纳米颗粒对传感体系的影响。ＢＰＡ??的浓度为?５．００，?１０．０，?２０．０?ｎｇ／ｍＬ??１４??
杂交和培育时间以及操作温度在检测灵敏度时起关键作用。??通常，Ｈｏｏｇｓｔｅｅｎ碱基配对的稳定性依赖于ｐＨ［１１８］，ｐＨ值也会影响荧光??染料的荧光强度。随着ｐＨ增加记录荧光信号（图２．４）。发现ｐＨ值在４．０－??７．５时荧光强度随ｐＨ的增加而增加，当超过７．５后荧光强度随之降低。??这可能是因为ＤＮＡ在中性偏碱性环境中相对稳定，而且缓冲液的ｐＨ值??对适配体的稳定性有很大影响［１１９，１２（）］。为了方便后续实验的进行，选择７．５??作为传感系统中的最佳ｐＨ值。??此外，研究了?ＤＮＡ－纳米颗粒和ＡＨＮ标记的适配体之间的杂交时间。??尽管培育时间越长杂交结构更稳定，但过长的培育会浪费时间并可能导??致非特异性吸附［１２１，１２２］。随着杂交时间的增加记录荧光信号（图２．５（ａ））。??发现荧光强度在４?ｍｉｎ到２４?ｍｉｎ之间逐渐増加，并在２４?ｍｉｎ达到平台。??为确保杂交的完整性
【参考文献】：
期刊论文
[1]磁性富集荧光法检测大肠杆菌[J]. 杨宇,牛承岗,曾光明. 中南大学学报(自然科学版). 2017(05)
[2]快速简便的杂交检测DNA（英文）[J]. 毛强,耿天龙,王胜华. 光谱学与光谱分析. 2014(06)
[3]高效液相色谱法同时测定环境水体中的双酚A、辛基酚和壬基酚[J]. 孙秀武,张元标,林辉,林红梅,邝伟明,黄海宁,暨卫东. 分析科学学报. 2013(02)
[4]FISH技术解析不同氨氮浓度MBR中的微生物群落结构[J]. 杨小丽,周娜,陈明,张瑞,宋海亮,傅大放. 东南大学学报(自然科学版). 2013(02)
[5]聚合物/无机纳米复合材料的应用进展[J]. 宋波. 广东化工. 2011(06)
[6]导数恒能量同步荧光法同时分析咔唑、苯并（a）芘、苝和2,3-苯并蒽[J]. 何立芳,林丹丽,李耀群. 环境化学. 2005(01)
[7]有机荧光染料的研究进展[J]. 贾建洪,盛卫坚,高建荣. 化工时刊. 2004(01)
[8]有机荧光染料纳米颗粒的制备及其包埋机制的研究[J]. 段菁华,王柯敏,谭蔚泓,何晓晓,黄杉生,李杜,羊小海,胡永强. 化学传感器. 2002(03)
[9]“标记”芘的激基缔合物荧光在水溶性高分子研究中的应用[J]. 高峰,任碧野,童真. 高分子通报. 2000(04)
博士论文
[1]高灵敏纳米生物传感体系构建及在环境检测中的应用[D]. 吕笑笑.湖南大学 2015
本文编号：2976712
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