稀有鮈鲫TLR通路响应因子在4种污染物免疫毒性检测中的作用
发布时间：2021-12-11 21:22
随着水环境污染问题的日益严峻,水环境中存在大量污染物和致病菌,这些物质对水生生物存在潜在的危害。免疫系统是机体防御的第一道防线,而Toll-like受体（Toll-like receptor,TLR）信号通路是激活机体免疫响应的关键通路,其在保护机体免受外源致病菌的侵害中发挥重要作用。稀有鮈鲫作为本土生物在水生态毒理研究中发挥越来越重要的作用,而对稀有鮈鲫免疫毒性效应相关研究很少;为了进一步对稀有鮈鲫参与免疫响应重要基因的挖掘和探究其在免疫响应中发挥的免疫毒性监测作用,本实验首先克隆了稀有鮈鲫免疫响应TLR信号通路中5个免疫响应因子序列并进行测序、分析,检测其在各组织中的基础表达;为了评价水环境污染物对稀有鮈鲫的免疫毒性效应,选用了典型农药(毒死蜱（Chlorpyrifos,CPF）、阿维菌素（Avermectin,AVM）)和重金属(铜(Cu2+)、镉(Cd2+))污染物在环境相关浓度下暴露稀有鮈鲫,利用定量PCR（Quantitative Polymerase Chain Reaction）检测这5个基因和通路中其它调控因子基因的表达情况...
【文章来源】： 华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：66 页
【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略词表
一、前言
1.1 鱼类的免疫系统
1.1.1 鱼类免疫组织和器官
1.1.2 免疫响应因子
1.1.2.1 鱼类特异性免疫因子
1.1.2.2 鱼类的非特异性免疫因子
1.2 免疫毒性
1.2.1 农药的免疫毒性
1.2.1.1 有机磷农药
1.2.1.2 生物型农药
1.2.2 重金属的免疫毒性
1.2.2.1 重金属镉(Cd2+)
1.2.2.2 重金属铜(Cu2+)
1.3 稀有鮈鲫简介
1.4 研究目的与意义
二、材料和方法
2.1 实验仪器和材料
2.1.1 主要试剂
2.1.2 主要仪器设备
2.1.3 实验动物及饲养条件
2.1.4 荧光假单胞菌培养
2.2 实验方法
2.2.1 稀有鮈鲫成鱼肝组织RNA的提取
2.2.2 cDNA第一链的合成
2.2.3 目的基因引物设计
2.2.4 目的基因PCR扩增
2.2.5 目的基因序列分析
2.2.6 定量PCR引物的设计
2.2.7 定量PCR反应
2.2.8 稀有鮈鲫免疫相关基因组织表达分布
2.2.9 实验鱼的药物暴露实验及后续荧光假单胞菌感染实验
2.2.9.1 药物暴露实验
2.2.9.2 药物暴露及后续荧光假单胞菌感染实验
2.2.10 酶联免疫（ELISA）分析
2.3 数据分析与处理
三、结果与分析
3.1 稀有鮈鲫免疫相关基因的克隆
3.2 稀有鮈鲫免疫相关基因序列分析
3.2.1 目的基因进化树分析
3.2.2 目的基因结构域分析
3.2.3 稀有鮈鲫免疫相关基因组织表达分布
3.3 农药暴露对稀有鮈鲫的影响
3.3.1 CPF和AVM暴露对稀有鮈鲫免疫毒性效应
3.3.2 CPF和AVM暴露及后续细菌感染对稀有鮈鲫免疫的影响
3.4 重金属暴露对稀有鮈鲫的影响
3.4.1 Cu2+和Cd2+暴露对稀有鮈鲫免疫毒性效应
3.4.2 Cu2+和Cd2+暴露及后续细菌感染对稀有鮈鲫免疫的影响
四、讨论
4.1 稀有鮈鲫TLR信号通路免疫响应因子克隆及分析
4.2 CPF和AVM暴露对稀有鮈鲫免疫响应的影响
4.3 CPF和AVM暴露及后续细菌感染对稀有鮈鲫免疫响应的影响
4.4 Cu2+和Cd2+暴露对稀有鮈鲫免疫响应的影响
4.5 Cu2+和Cd2+暴露后续细菌感染对稀有鮈鲫免疫响应的影响
五、结论与展望
参考文献
附录1
附录2
附录3
附录4
研究生期间发表论文情况
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]中国农药使用现状及对策建议 [J]. 陈晓明,王程龙,薄瑞. 农药科学与管理. 2016(02)
[2]龙江河突发环境事件河流镉污染化学形态模拟 [J]. 董璟琦,张红振,王金南,张天柱. 中国环境科学. 2015(10)
[3]阿维菌素对水生动物安全性及其对寄生虫驱杀作用 [J]. 陈进军,房文红,王松刚. 科学养鱼. 2015(02)
[4]毒死蜱对稀有鮈鲫不同生命阶段的毒性效应 [J]. 杨亚洲,蔡磊明,孟智启,刘新洋,王彦华,蒋金花,赵学平. 农药学学报. 2014(01)
[5]阿维菌素对家蚕血细胞DNA变异的影响 [J]. 沈卫锋,孟智启,王强,牛宝龙,何丽华,刘岩,翁宏飚,陈玉银. 蚕业科学. 2011(06)
[6]镉对鲫淋巴细胞的增殖抑制 [J]. 丁磊. 水利渔业. 2008(02)
[7]斜带石斑鱼黏膜免疫系统结构的研究 [J]. 罗晓春,李安兴,谢明权. 水生生物学报. 2005(02)
[8]阿维菌素对小鼠次级精母细胞致突变性的研究 [J]. 刘彤,朱蓓蕾. 中国兽医科技. 2003(05)
[9]稀有鮈鲫产卵频次和卵子发育的研究 [J]. 王剑伟. 水生生物学报. 1999(02)
[10]稀有鮈鲫胚后发育和幼鱼生长的初步研究 [J]. 王剑伟,宋天祥,曹文宣. 水生生物学报. 1998(02)
本文编号：3535424
【文章来源】： 华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：66 页
【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略词表
一、前言
1.1 鱼类的免疫系统
1.1.1 鱼类免疫组织和器官
1.1.2 免疫响应因子
1.1.2.1 鱼类特异性免疫因子
1.1.2.2 鱼类的非特异性免疫因子
1.2 免疫毒性
1.2.1 农药的免疫毒性
1.2.1.1 有机磷农药
1.2.1.2 生物型农药
1.2.2 重金属的免疫毒性
1.2.2.1 重金属镉(Cd2+)
1.2.2.2 重金属铜(Cu2+)
1.3 稀有鮈鲫简介
1.4 研究目的与意义
二、材料和方法
2.1 实验仪器和材料
2.1.1 主要试剂
2.1.2 主要仪器设备
2.1.3 实验动物及饲养条件
2.1.4 荧光假单胞菌培养
2.2 实验方法
2.2.1 稀有鮈鲫成鱼肝组织RNA的提取
2.2.2 cDNA第一链的合成
2.2.3 目的基因引物设计
2.2.4 目的基因PCR扩增
2.2.5 目的基因序列分析
2.2.6 定量PCR引物的设计
2.2.7 定量PCR反应
2.2.8 稀有鮈鲫免疫相关基因组织表达分布
2.2.9 实验鱼的药物暴露实验及后续荧光假单胞菌感染实验
2.2.9.1 药物暴露实验
2.2.9.2 药物暴露及后续荧光假单胞菌感染实验
2.2.10 酶联免疫（ELISA）分析
2.3 数据分析与处理
三、结果与分析
3.1 稀有鮈鲫免疫相关基因的克隆
3.2 稀有鮈鲫免疫相关基因序列分析
3.2.1 目的基因进化树分析
3.2.2 目的基因结构域分析
3.2.3 稀有鮈鲫免疫相关基因组织表达分布
3.3 农药暴露对稀有鮈鲫的影响
3.3.1 CPF和AVM暴露对稀有鮈鲫免疫毒性效应
3.3.2 CPF和AVM暴露及后续细菌感染对稀有鮈鲫免疫的影响
3.4 重金属暴露对稀有鮈鲫的影响
3.4.1 Cu2+和Cd2+暴露对稀有鮈鲫免疫毒性效应
3.4.2 Cu2+和Cd2+暴露及后续细菌感染对稀有鮈鲫免疫的影响
四、讨论
4.1 稀有鮈鲫TLR信号通路免疫响应因子克隆及分析
4.2 CPF和AVM暴露对稀有鮈鲫免疫响应的影响
4.3 CPF和AVM暴露及后续细菌感染对稀有鮈鲫免疫响应的影响
4.4 Cu2+和Cd2+暴露对稀有鮈鲫免疫响应的影响
4.5 Cu2+和Cd2+暴露后续细菌感染对稀有鮈鲫免疫响应的影响
五、结论与展望
参考文献
附录1
附录2
附录3
附录4
研究生期间发表论文情况
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]中国农药使用现状及对策建议 [J]. 陈晓明,王程龙,薄瑞. 农药科学与管理. 2016(02)
[2]龙江河突发环境事件河流镉污染化学形态模拟 [J]. 董璟琦,张红振,王金南,张天柱. 中国环境科学. 2015(10)
[3]阿维菌素对水生动物安全性及其对寄生虫驱杀作用 [J]. 陈进军,房文红,王松刚. 科学养鱼. 2015(02)
[4]毒死蜱对稀有鮈鲫不同生命阶段的毒性效应 [J]. 杨亚洲,蔡磊明,孟智启,刘新洋,王彦华,蒋金花,赵学平. 农药学学报. 2014(01)
[5]阿维菌素对家蚕血细胞DNA变异的影响 [J]. 沈卫锋,孟智启,王强,牛宝龙,何丽华,刘岩,翁宏飚,陈玉银. 蚕业科学. 2011(06)
[6]镉对鲫淋巴细胞的增殖抑制 [J]. 丁磊. 水利渔业. 2008(02)
[7]斜带石斑鱼黏膜免疫系统结构的研究 [J]. 罗晓春,李安兴,谢明权. 水生生物学报. 2005(02)
[8]阿维菌素对小鼠次级精母细胞致突变性的研究 [J]. 刘彤,朱蓓蕾. 中国兽医科技. 2003(05)
[9]稀有鮈鲫产卵频次和卵子发育的研究 [J]. 王剑伟. 水生生物学报. 1999(02)
[10]稀有鮈鲫胚后发育和幼鱼生长的初步研究 [J]. 王剑伟,宋天祥,曹文宣. 水生生物学报. 1998(02)
本文编号：3535424
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