北方地表水微囊藻毒素季节性变化及新型监测方法的研究
发布时间：2022-01-06 12:59
近年来,随着水体富营养化的日益加剧,蓝藻暴发产生的微囊藻毒素（Microcystins,简称MCs）污染问题已经成为一个全球关注的热点。微囊藻毒素是蓝藻产生的次级代谢产物,具有强烈的致肝癌作用,其分子结构复杂、种类繁多,以痕量形式稳定地存在于各类不同程度富营养化水体中,传统的处理工艺很难有效去除,这对人体健康构成潜在威胁。因此,水体中微囊藻毒素的监测和季节性变化研究对预防和控制微囊藻毒素污染,减少藻毒素的危害,保护人体健康等具有重要意义。本文首先优化和验证了实验所需的酶联免疫试剂盒,基于优化后的酶联免疫方法对于桥水库、尔王庄水库和天津滨海新区人工湿地水体中微囊藻毒素的浓度进行长期监测;此外,利用石墨烯的偏振依赖吸收特性,基于还原氧化石墨烯（RGO）开发了微囊藻毒素检测的光学免疫传感器。主要研究结果如下:（1）在振荡条件下（400rpm）孵育抗体和微囊藻毒素共轭溶液成功优化酶联免疫（ELISA）试剂盒,经四参数曲线拟合标准曲线,测定结果准确度高达85%,批次内和批次间精确度小于15%,检出限（LOD）和定量限（LOQ）分别为0.011μg/L与0.032μg/L,测定不同浓度地表水样的加...
【文章来源】：重庆交通大学重庆市
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
论文研究技术路线图
.3 ELISA 验证：必要参数.3.1 标准曲线在 2016 -2017 年间，通过 16 次实验建立了 6 个标准溶液% B0质量控制图线图，由图 2-5 可知，同一标准溶液的%B0值稳定，不同标准溶液的%B0异。方差分析表明，不同标准溶液的%B0值差异显著(p<0.05)且同一标准B0均在控制限内。4 参数方程拟合的标准曲线 r2大于 0.99（图 2-6），重复对标准差（RSD）小于 15％。对于一个被认为有效的实验，4 参数曲线大于或等于 0.98，单次试验重复的 CV 值应小于 15%[93]。综上所述，可以通过三个指标验证拟合的标准曲线:(1)r2>0.98，(2) 重复V 小于 15%，(3) 不同标准溶液的%B0值差异显著且同一标准溶液的%B0控制限内。
图 2-6 MC-LR 标准溶液拟合的标准曲线2.2.3.2 准确性使用含有已知浓度的 MC-LR 溶液和 Abraxis 公司提供的盲测样品测定 ELISA试剂盒的准确度。已知浓度的 MC-LR 溶液为 ELSIA 试剂盒中的阳性对照溶液和高、低浓度加标溶液。盲测样品为地表水和自来水加标水样。由表 2.2 和 2.3 分析说明，所有测试样品的准确度超过 84％，优化的 ELISA 试剂盒准确度近似高达85％。表 2.2 阳性对照溶液和高、低浓度加标溶液准确度测定样品浓度(μg/L)4 次 (n=8) 8 次 (n=16) 16 次 (n=32)测量值(μg/L)准确度测量值(μg/L)准确度测量值(μg/L)准确度0.75 0.656 87.42% 0.690 93.07% 0.688 91.73%1.00 1.015 98.50% 0.977 97.70% ND ND0.15 0.139 92.67% 0.138 92.00% ND ND
【参考文献】：
期刊论文
[1]鄱阳湖微囊藻毒素时空分布格局及其与理化和生物因子的关系[J]. 袁丽娟,廖且根,张莉,张大文,罗林广,刘聚涛. 环境科学. 2018(01)
[2]纳米金信号探针/石墨烯修饰免疫传感器检测微囊藻毒素[J]. 张晶晶,康天放,刘锦华,丁玎,宋海燕,杜晓丽. 分析测试学报. 2017(09)
[3]关于JJG861-2007《酶标分析仪》检定规程的探讨[J]. 王林平,丁子辰. 内蒙古科技与经济. 2017(12)
[4]洋河水库微囊藻毒素及产毒株种群丰度的时空分布特征[J]. 王敏,刘祥,陈求稳,易齐涛,刘卓. 环境科学学报. 2017(04)
[5]鄱阳湖部分湖区微囊藻毒素和有机污染物检测与分析[J]. 刘艳红,林芬,吴清锋,邱伟,李舒梅. 赣南医学院学报. 2016(06)
[6]蓝藻水华及其所产生藻类毒素的研究进展[J]. 赵天琦,宋福强. 生物技术世界. 2015(06)
[7]枯水期鄱阳湖及其滨湖水体氮磷等污染物分布与藻华风险研究[J]. 戴国飞,张伟,彭宁彦,楼倩,钟家有. 生态环境学报. 2015(05)
[8]于桥水库浮游植物群落特征[J]. 郑吴柯,刘宪斌,赵兴贵,陈曦. 中国环境监测. 2015(01)
[9]葡萄糖6-磷酸异构酶ELISA定量测定方法分析灵敏度的评估[J]. 朱晓敏,范列英. 检验医学. 2014(12)
[10]聚二甲基硅氧烷弹性体的表面改性及生物相容性[J]. 边风根,曾莉,严兆华. 南昌大学学报(理科版). 2014(06)
硕士论文
[1]非点源污染负荷对于桥水库富营养化影响研究[D]. 张亚尼.天津工业大学 2017
[2]氨基功能化石墨烯/聚氨酯复合材料的制备与性能研究[D]. 王忠娟.合肥工业大学 2015
[3]典型富营养化湖泊微囊藻毒素分布特征及主要影响因子差异性分析[D]. 毛敬英.西南交通大学 2012
[4]滇池浮游植物和微囊藻毒素的时空分布及细菌去除毒素研究[D]. 鲍忠祥.云南大学 2012
[5]富营养化水体中几种水生动植物对藻类的控制作用[D]. 乔宁宁.浙江师范大学 2010
本文编号：3572498
【文章来源】：重庆交通大学重庆市
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
论文研究技术路线图
.3 ELISA 验证：必要参数.3.1 标准曲线在 2016 -2017 年间，通过 16 次实验建立了 6 个标准溶液% B0质量控制图线图，由图 2-5 可知，同一标准溶液的%B0值稳定，不同标准溶液的%B0异。方差分析表明，不同标准溶液的%B0值差异显著(p<0.05)且同一标准B0均在控制限内。4 参数方程拟合的标准曲线 r2大于 0.99（图 2-6），重复对标准差（RSD）小于 15％。对于一个被认为有效的实验，4 参数曲线大于或等于 0.98，单次试验重复的 CV 值应小于 15%[93]。综上所述，可以通过三个指标验证拟合的标准曲线:(1)r2>0.98，(2) 重复V 小于 15%，(3) 不同标准溶液的%B0值差异显著且同一标准溶液的%B0控制限内。
图 2-6 MC-LR 标准溶液拟合的标准曲线2.2.3.2 准确性使用含有已知浓度的 MC-LR 溶液和 Abraxis 公司提供的盲测样品测定 ELISA试剂盒的准确度。已知浓度的 MC-LR 溶液为 ELSIA 试剂盒中的阳性对照溶液和高、低浓度加标溶液。盲测样品为地表水和自来水加标水样。由表 2.2 和 2.3 分析说明，所有测试样品的准确度超过 84％，优化的 ELISA 试剂盒准确度近似高达85％。表 2.2 阳性对照溶液和高、低浓度加标溶液准确度测定样品浓度(μg/L)4 次 (n=8) 8 次 (n=16) 16 次 (n=32)测量值(μg/L)准确度测量值(μg/L)准确度测量值(μg/L)准确度0.75 0.656 87.42% 0.690 93.07% 0.688 91.73%1.00 1.015 98.50% 0.977 97.70% ND ND0.15 0.139 92.67% 0.138 92.00% ND ND
【参考文献】：
期刊论文
[1]鄱阳湖微囊藻毒素时空分布格局及其与理化和生物因子的关系[J]. 袁丽娟,廖且根,张莉,张大文,罗林广,刘聚涛. 环境科学. 2018(01)
[2]纳米金信号探针/石墨烯修饰免疫传感器检测微囊藻毒素[J]. 张晶晶,康天放,刘锦华,丁玎,宋海燕,杜晓丽. 分析测试学报. 2017(09)
[3]关于JJG861-2007《酶标分析仪》检定规程的探讨[J]. 王林平,丁子辰. 内蒙古科技与经济. 2017(12)
[4]洋河水库微囊藻毒素及产毒株种群丰度的时空分布特征[J]. 王敏,刘祥,陈求稳,易齐涛,刘卓. 环境科学学报. 2017(04)
[5]鄱阳湖部分湖区微囊藻毒素和有机污染物检测与分析[J]. 刘艳红,林芬,吴清锋,邱伟,李舒梅. 赣南医学院学报. 2016(06)
[6]蓝藻水华及其所产生藻类毒素的研究进展[J]. 赵天琦,宋福强. 生物技术世界. 2015(06)
[7]枯水期鄱阳湖及其滨湖水体氮磷等污染物分布与藻华风险研究[J]. 戴国飞,张伟,彭宁彦,楼倩,钟家有. 生态环境学报. 2015(05)
[8]于桥水库浮游植物群落特征[J]. 郑吴柯,刘宪斌,赵兴贵,陈曦. 中国环境监测. 2015(01)
[9]葡萄糖6-磷酸异构酶ELISA定量测定方法分析灵敏度的评估[J]. 朱晓敏,范列英. 检验医学. 2014(12)
[10]聚二甲基硅氧烷弹性体的表面改性及生物相容性[J]. 边风根,曾莉,严兆华. 南昌大学学报(理科版). 2014(06)
硕士论文
[1]非点源污染负荷对于桥水库富营养化影响研究[D]. 张亚尼.天津工业大学 2017
[2]氨基功能化石墨烯/聚氨酯复合材料的制备与性能研究[D]. 王忠娟.合肥工业大学 2015
[3]典型富营养化湖泊微囊藻毒素分布特征及主要影响因子差异性分析[D]. 毛敬英.西南交通大学 2012
[4]滇池浮游植物和微囊藻毒素的时空分布及细菌去除毒素研究[D]. 鲍忠祥.云南大学 2012
[5]富营养化水体中几种水生动植物对藻类的控制作用[D]. 乔宁宁.浙江师范大学 2010
本文编号：3572498
本文链接：https://www.wllwen.com/kejilunwen/huanjinggongchenglunwen/3572498.html
