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油污湿地石油降解菌的筛选鉴定和特性研究

发布时间:2022-10-15 19:03
  在石油开采区附近,石油污染一直是一个不可避免的问题。针对这一问题,目前主要有三种主要修复方法:物理法、化学法和生物法。微生物修复方法是最主要的生物修复方法之一。微生物法具有成本低,效率高,无二次污染,局限性小,使用面积广泛等优点。筛选出高效的油污湿地土壤石油降解菌不仅具有重要的学术价值,同时对于油污湿地土壤原位修复具有重要的应用价值和现实意义。本研究以大庆湿地油井附近石油污染土壤为研究对象,以原油为唯一碳源,对菌株进行了生理生化鉴定、16S rDNA鉴定,以及生长和降解特性,并模拟油污土壤修复过程,对石油降解基因进行初步研究,期望从中筛选出较为高效的石油降解菌。(1)通过初步筛选实验,找到110株石油降解菌。通过模拟油污土壤实验(复筛),表明单独加菌液对于油污土壤修复是具有可行性的。菌株对于2 g/kg油污土壤修复能力排在前三位的是A油3J1-1(A3J1-1)、C3植J1(C3J1-2)和C2中J2,经过7 d的对石油的去除率可达63.07%、39.88%和32.22%,排在第十位的去除油污能力可达24.6%。同时发现菌株可以通过与植物(黄豆)联合作用提高石油降解菌的降解能力。(2)... 

【文章页数】:65 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
Abstract
第1章 绪论
    1.1 研究背景
    1.2 研究意义
    1.3 石油污染修复国内外研究现状
    1.4 研究内容
    1.5 技术路线
第2章 油污湿地石油降解菌的筛选和鉴定研究
    2.1 实验材料
        2.1.1 土壤样品采集和原油
        2.1.2 实验仪器
        2.1.3 实验生物试剂
        2.1.4 实验培养基
    2.2 实验方法
        2.2.1 土壤理化性质测定
        2.2.2 石油降解菌的初筛
        2.2.3 石油降解菌的保存
        2.2.4 石油降解菌的复筛
        2.2.5 石油降解菌分子生物学鉴定
    2.3 结果与分析
        2.3.1 土壤基本理化性质
        2.3.2 复筛结果分析
        2.3.3 三株细菌16S rDNA电泳图
        2.3.4 三株细菌系统发育分析
    2.4 本章小结
第3章 油污湿地石油降解菌的生长特性研究
    3.1 实验材料
        3.1.1 实验仪器
        3.1.2 实验药品
        3.1.3 实验菌株
        3.1.4 主要培养基
    3.2 实验方法
        3.2.1 细菌的形态观察
        3.2.2 扫描电镜实验
        3.2.3 生理生化实验
        3.2.4 表面活性剂检测
        3.2.5 生长曲线测量方法
        3.2.6 不同环境条件对细菌生长的影响
    3.3 结果与分析
        3.3.1 三株石油降解菌形态观察结果
        3.3.2 扫描电镜观察结果
        3.3.3 生理生化实验结果
        3.3.4 表面活性剂检测结果
        3.3.5 细菌生长曲线
        3.3.6 不同环境条件对细菌生长的影响
    3.4 本章小结
第4章 油污湿地石油降解菌的降解特性和石油烃代谢基因研究
    4.1 实验材料
        4.1.1 实验仪器
        4.1.2 实验药品
        4.1.3 实验菌株
        4.1.4 主要培养基
    4.2 实验方法
        4.2.1 石油含量测量方法
        4.2.2 不同培养时间条件
        4.2.3 不同接种量条件
        4.2.4 不同菌液组合条件
        4.2.5 不同石油浓度条件
        4.2.6 石油烃代谢基因初步检测
    4.3 结果与分析
        4.3.1 标准曲线的绘制
        4.3.2 不同时间条件下的降解性能
        4.3.3 不同接种量条件下的降解性能
        4.3.4 不同菌液组合条件下的降解性能
        4.3.5 不同石油浓度条件下的降解性能
        4.3.6 代谢基因初步检测结果
    4.4 本章小结
结论
    基本结论
    展望
参考文献
附录
攻读学位期间发表的学术论文
致谢


【参考文献】:
期刊论文
[1]阿南原等跳肠道细菌的分离鉴定及降解纤维素细菌的筛选[J]. 王立秀,陈伟,谢桂林,周亮.  昆虫学报. 2018(07)
[2]2株石油降解菌的分离鉴定[J]. 詹亚斌,马立安,陶兴玲,何山文,王鹏宇,邓刚,江涛.  长江大学学报(自科版). 2017(18)
[3]海南近海石油降解菌的筛选、鉴定及降解性能[J]. 文少白,牛宗亮,季玉祥,唐天乐.  中国农学通报. 2017(17)
[4]一株石油烃高效降解菌的筛选及降解性能研究[J]. 董丁,卢彦珍,唐美华,陈国松.  南京工业大学学报(自然科学版). 2017(03)
[5]一株产表面活性剂石油降解菌筛选及其特性[J]. 邓振山,马琳,张袭,李鹏,贺晓龙,杨波.  环境工程学报. 2017(05)
[6]石油降解菌群的构建及其对混合烃的降解特性[J]. 范瑞娟,郭书海,李凤梅.  农业环境科学学报. 2017(03)
[7]一株筛选自莫莫格湿地石油污染土壤中的十六烷烃降解细菌的分离鉴定及降解特性研究[J]. 李丹丹,徐兴健,翟真浩,于洪文,韩雪容.  湿地科学. 2017(01)
[8]含油污泥堆肥处理的研究[J]. 车晓军,屈撑囤,郭敏俊.  广州化工. 2016(12)
[9]耐高温石油烃降解菌的筛选及性能研究[J]. 姜义,马洪杏,宗利,荣玉,汪洋.  中国微生态学杂志. 2016(06)
[10]石油降解菌的分子鉴定及降解能力研究[J]. 张国霞,关颖,蒋云霞,邹飞,周宏伟.  生态科学. 2015(02)

博士论文
[1]大庆油田石油污染土壤堆肥修复及微生物群落结构研究[D]. 汪洋.东北农业大学 2017
[2]荒漠土壤石油降解菌多样性、生物学特性及低温降解机制[D]. 杨智.兰州理工大学 2017

硕士论文
[1]重金属铜抗性细菌的筛选鉴定、吸附特性与机理研究[D]. 孙士顺.东北师范大学 2016
[2]石油降解菌的筛选及降解条件的优化[D]. 杨立琼.沈阳大学 2014
[3]石油降解菌的筛选、鉴定及其菌剂制备的初步研究[D]. 赵阳阳.河南大学 2013
[4]石油降解菌的筛选及生物学特性研究[D]. 杨智.兰州理工大学 2013
[5]大庆湿地石油污染生态风险快速评价指标量化研究[D]. 史丛冰.哈尔滨师范大学 2012
[6]紫外分光法测定土壤中的石油污染物[D]. 程建安.山东大学 2012



本文编号:3691862

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