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耐辐射奇球菌对铜/铬/铀的吸附作用及其基因工程载体的构建

发布时间:2022-12-17 23:03
  研究背景:环境污染已成为人们迫切关注的问题,工业的生产发展所产生的重金属污染严重危害着人类健康和破坏生态环境。目前处理环境中的重金属离子主要是用物理方法和化学方法,但用这些方法处理重金属污染都不是最佳的选择。近几年来兴起用生物方法进行处理,其根本就是使用微生物本身所带有的吸附或者还原等方法将重金属污染物进行清除。耐辐射奇球菌(Deinococcus radiodurans,DR)是一种目前世界上所知的对电离辐射损伤具有超强抗性的细菌,利用其对放射性和重金属污染物的生物修复具有较大的前景。硫酸盐还原菌(SRB)是一类具有较强还原作用的细菌,它能够将一些高价的重金属离子如六价铬离子和铀酰离子还原为低价状态以降低其对环境毒性。研究目的:本研究旨在探索耐辐射奇球菌对重金属离子铜和铬的吸附作用,探索在模拟铀废水的条件下耐辐射奇球菌对放射性物质铀的吸附。利用耐辐射奇球菌的超强的辐射抗性和硫酸盐还原菌的强还原性,将硫酸盐还原菌的超强还原基因DsrA基因转入到耐辐射奇球菌中,以期构建既具有超强辐射抗性又具有较强还原作用的基因工程菌。以实现能够处理铀废水溶液中的铀,将高价的铀离子吸附并还原为低价不溶的四... 

【文章页数】:80 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
Abstract
第1章 绪论
第2章 耐辐射奇球菌对重金属离子Cu~(2+)和Cr~(6+)吸附作用研究
    2.1 材料及仪器设备
        2.1.1 实验所用菌株、培养条件
        2.1.2 主要试剂
        2.1.3 主要实验仪器
        2.1.4 主要生化试剂的配制
    2.2 实验方法
        2.2.1 菌株的扩大培养
        2.2.2 影响耐辐射奇球菌对Cu~(2+)和Cr~(6+)吸附的因素
        2.2.3 干菌体的制备
    2.3 结果及分析
        2.3.1 耐辐射奇球菌对Cu~(2+)和Cr~(6+)吸附的标准曲线
        2.3.2 耐辐射奇球菌对Cu~(2+)和Cr~(6+)吸附作用的影响因素
        2.3.3 耐辐射奇球菌对Cu~(2+)和Cr~(6+)吸附的红外光谱分析
        2.3.4 耐辐射奇球菌对Cu~(2+)和Cr~(6+)吸附的能谱仪(EDS)分析
        2.3.5 γ辐照条件下耐辐射奇球菌和大肠杆菌对Cu~(2+)和Cr~(6+)吸附率比较
    2.4 本章小结
第3章 F~-和NO_3~-共存下耐辐射奇球菌对铀的吸附行为研究
    3.1 材料及仪器设备
        3.1.1 实验所用菌株、培养条件
        3.1.2 主要试剂
        3.1.3 主要实验仪器
        3.1.4 主要生化试剂的配制
    3.2 实验方法
        3.2.1 菌株的扩大培养
        3.2.2 F~-和NO_3~-对耐辐射奇球菌的生长抑制作用
        3.2.3 F~-和NO_3~-共存下影响耐辐射奇球菌对铀吸附的因素
        3.2.4 干菌体的制备
    3.3 结果及分析
        3.3.1 F~-和NO_3~-对耐辐射奇球菌的生长抑制作用
        3.3.2 耐辐射奇球菌对铀吸附的标准曲线
        3.3.3 F~-和NO_3~-共存下影响耐辐射奇球菌对铀吸附的因素
        3.3.4 耐辐射奇球菌对铀吸附的红外光谱分析
    3.4 本章小结
第4章 构建含硫酸盐还原菌dsrA基因的基因工程载体
    4.1 材料及仪器设备
        4.1.1 实验所用菌株、培养条件
        4.1.2 主要试剂
        4.1.3 主要实验仪器
    4.2 实验方法及步骤
        4.2.1 硫酸盐还原菌(SRB)的培养
        4.2.2 硫酸盐还原菌(SRB)基因组DNA的提取
        4.2.3 DsrA目的基因的PCR
        4.2.4 载体的酶切
        4.2.5 大肠杆菌感受态细胞的制备
        4.2.6 大肠杆菌细胞的转化
        4.2.7 菌落PCR鉴定
    4.3 实验结果
        4.3.1 硫酸盐还原菌(SRB)的培养结果
        4.3.2 硫酸盐还原菌(SRB)基因组DNA的提取结果
        4.3.3 dsrA目的基因的PCR
        4.3.4 dsrA目的基因的测序及Blast比对结果
        4.3.5 载体pRADK-DsrA的鉴定
    4.4 本章小结
第五章 讨论
第六章 结论
参考文献
综述
    参考文献
作者攻读学位期间的科研成果
致谢



本文编号:3720824

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