PFOS和PFOA对涡虫胁迫相关蛋白的基因表达影响及DNA损伤研究

发布时间：2023-04-07 20:49

　　全氟辛烷磺酸盐（PFOS）和全氟辛烷磺酸（PFOA）是全氟污染物（PFcs）中的代表，具有疏水防尘作用，自上世纪50年代，在汽车涂料、纺织、不粘锅涂层等产品中广泛使用。全氟化合物毒性被逐渐发现，PFOS和PFOA也被禁用，但它们的毒性作用机制仍未明确。东亚三角涡虫（Dugesia japonica）为原始三胚层动物，具有强大的再生能力，对环境刺激非常敏感，可用于检测水体质量。本论文以PFOS和PFOA处理涡虫，探究压力相关蛋白的基因表达量与药品处理浓度及时长的关系，并对涡虫经药物处理后细胞核DNA损伤情况进行初步检测。 实验以6个浓度的PFOS和PFOA溶液分别处理完整涡虫和再生涡虫，选择的压力相关蛋白基因功能涉及细胞抗逆性，神经发育，凋亡，信号转导等，采用RT-PCR技术检测它们mRNA表达量的相对变化。结果表明，低浓度PFOS和PFOA短时间处理涡虫，hsp70和hsp90mRNA表达量受到抑制，随着处理时间的延长，表达量上升，可能为毒性压力下产生应激反应；在高浓度长时间处理组，涡虫p53基因表达量上升，涡虫无法承受药物毒性进入凋亡阶段；另外，两种药物对神经相关基因Xnp影响不大，...

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
    1. PFOS 和 PFOA
        1.1 简介
        1.2 PFOS 和 PFOA 毒性
            1.2.1 基因毒性
            1.2.2 细胞毒性
            1.2.3 组织器官毒性
            1.2.4 致死性
            1.2.5 PFOS 和 PFOA 与其它毒性物质的作用
            1.2.6 PFOS 与 PFOA 研究现状与前景
        1.3 PFOS 和 PFOA 污染
    2.涡虫
        2.1 涡虫概述
        2.2 涡虫在毒理学研究中的应用
    3. 本文研究的主要内容及思路
第二章 RT-PCR 法检测 PFOS 和 PFOA 处理后涡虫压力相关基因表达量的变化
    1. 前言
    2. 材料和方法
        2.1 实验材料和仪器
        2.2 实验方法
            2.2.1 涡虫的处理
            2.2.2 涡虫总 RNA 的提取
            2.2.3 RNA 电泳检测
            2.2.4 cDNA的合成
            2.2.5 PCR 及电泳
        2.3 方差分析
    3. 结果
        3.1 RNA 电泳
        3.2 PFOS 处理涡虫各基因 mRNA 表达变化趋势
        3.3 PFOA 处理涡虫各基因 mRNA 表达变化趋势
    4. 讨论
第三章 Western Blot 法检测 PFOS 和 PFOA 对涡虫 HSP70 蛋白表达的影响
    1. 前言
    2. 材料和方法
        2.1 实验材料和仪器
        2.2 实验方法
            2.2.1 涡虫的处理
            2.2.2 蛋白提取
            2.2.3 蛋白电泳
            2.2.4 Western blot
    3. 实验结果
        3.1 蛋白电泳照片
        3.2 PFOS 对涡虫 HSP70 蛋白表达量变化的影响
        3.3 PFOA 对涡虫中 HSP70 蛋白表达量变化影响
    4. 讨论
第四章 单细胞凝胶电泳检测 PFOS 和 PFOA 对涡虫细胞核 DNA 的损伤作用
    1. 前言
    2. 实验材料和方法
        2.1 实验材料和试剂
        2.2 实验方法
            2.2.1 涡虫的处理
            2.2.2 单细胞凝胶电泳
            2.2.3 大肠杆菌 DNA 提取
            2.2.4 大肠杆菌 DNA 处理及电泳
    3. 实验结果
        3.1 单细胞凝胶电泳
        3.2 PFOS 和 PFOA 对大肠杆菌 DNA 作用
    4. 讨论
总结与展望
参考文献
致谢
论文发表



本文编号：3785301