渤海异帽藻的毒性效应及毒素提取研究

发布时间：2024-05-28 05:21

　　有害藻华的频繁发生危害沿海生态环境。渤海异帽藻(Heterocapsa bohaiensis sp.nov)是一种新型异帽藻,对日本对虾(Penaeus japonicus)和中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)的幼虫有一定毒害作用。首次发现是在辽东湾新区的沿海池塘光合蟹业养殖区。短时间内大量集中暴发会影响水产养殖业的发展,造成一定的经济损失。褶皱臂尾轮虫(Brachionus plicatilis)可用作许多水产养殖生物比如虾和螃蟹幼虫等的活性饲料。为评估渤海异帽藻的潜在毒性,本文首先研究了渤海异帽藻对褶皱臂尾轮虫毒性和对红细胞的溶血活性。测定了轮虫体内和红细胞内钙离子浓度。为分离提取渤海异帽藻的毒素,本文接下来研究了渤海异帽藻毒素的性质并对其毒素成分进行初步分离。以褶皱臂尾轮虫为受试对象,探究放置时间、光照条件以及温度对渤海异帽藻毒素性质的影响,并对毒性物质进行了粗提,通过紫外可见吸收初步推断毒素结构,最后根据溶剂提取的方法设计一定的提取路线来分离不同组分。结果表明,渤海异帽藻对轮虫具有显著的致死作用,这种作用取决于细胞密度及暴露时间。轮虫能够摄食渤海异帽藻。经超声破...

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
引言
1 文献综述
    1.1 有害藻华
        1.1.1 概述及其危害
        1.1.2 藻毒素
        1.1.3 藻华成因及影响因素
        1.1.4 有害藻华生物
    1.2 渤海异帽藻
        1.2.1 异帽藻赤潮及危害
        1.2.2 渤海异帽藻的生理特性
    1.3 溶血毒素
        1.3.1 溶血毒素的成分结构
        1.3.2 溶血毒素的生成及其毒性
    1.4 有害藻华对浮游动物的影响
        1.4.1 有害藻华与浮游动物
        1.4.2 褶皱臂尾轮虫
    1.5 本文研究目的及意义
2 渤海异帽藻对轮虫急性毒性的研究
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验生物与培养条件
        2.1.2 主要试剂与药品
        2.1.3 主要仪器与设备
    2.2 实验方法
        2.2.1 渤海异帽藻对褶皱臂尾轮虫的影响实验
        2.2.2 藻液不同分离组分对褶皱臂尾轮虫的影响实验
        2.2.3 光照条件对褶皱臂尾轮虫的影响实验
        2.2.4 褶皱臂尾轮虫摄食效果实验
        2.2.5 统计分析
    2.3 实验结果
        2.3.1 渤海异帽藻对褶皱臂尾轮虫的毒性效应影响
        2.3.2 藻液不同分离组分对褶皱臂尾轮虫的影响
        2.3.3 光照条件对褶皱臂尾轮虫的影响
        2.3.4 褶皱臂尾轮虫对渤海异帽藻的摄食
    2.4 讨论
    2.5 小结
3 渤海异帽藻的溶血活性及其可能在轮虫毒性中发挥的作用
    3.1 实验材料
        3.1.1 实验生物与培养条件
        3.1.2 主要试剂与药品
        3.1.3 主要仪器与设备
        3.1.4 有关溶液的配制
    3.2 实验方法
        3.2.1 渤海异帽藻溶血活性的测定
        3.2.2 不同密度渤海异帽藻溶血活性的测定及光照条件对溶血性的影响
        3.2.3 渤海异帽藻不同分离组分溶血活性测定
        3.2.4 褶皱臂尾轮虫体内Ca2+浓度测定
        3.2.5 兔子红细胞内Ca2+浓度测定
        3.2.6 统计分析
    3.3 实验结果
        3.3.1 渤海异帽藻的溶血活性
        3.3.2 不同密度渤海异帽藻溶血活性及光照条件对溶血性的影响
        3.3.3 渤海异帽藻不同分离组分溶血活性
        3.3.4 褶皱臂尾轮虫体内Ca2+浓度变化
        3.3.5 红细胞内Ca2+浓度变化
    3.4 讨论
    3.5 小结
4 渤海异帽藻毒素性质及初步结构的探究
    4.1 实验材料
        4.1.1 实验生物与培养条件
        4.1.2 主要试剂与药品
        4.1.3 主要仪器与设备
    4.2 实验方法
        4.2.1 渤海异帽藻不同分离组分的制备
        4.2.2 不同光照条件、放置时间对渤海异帽藻毒素性质的影响
        4.2.3 不同温度对渤海异帽藻毒素性质的影响
        4.2.4 渤海异帽藻破碎藻细胞悬液毒素粗提及粗提物毒性
        4.2.5 乙腈提取物的紫外可见光谱扫描
        4.2.6 统计分析
    4.3 实验结果
        4.3.1 光照条件、放置时间对渤海异帽藻毒素性质的影响
        4.3.2 温度对渤海异帽藻毒素性质的影响
        4.3.3 破碎藻细胞悬液毒素萃取
        4.3.4 乙腈萃取物光谱扫描
    4.4 讨论
    4.5 小结
5 渤海异帽藻毒素成分初步分离
    5.1 实验材料
        5.1.1 实验生物与培养条件
        5.1.2 主要试剂与药品
        5.1.3 主要仪器与设备
        5.1.4 有关溶液的配制
    5.2 实验方法
        5.2.1 提取技术路线
        5.2.2 各提取成分对褶皱臂尾轮虫的毒性影响实验
        5.2.3 各提取成分对红细胞溶血活性
    5.3 实验结果
        5.3.1 各提取成分对褶皱臂尾轮虫的毒性效应
        5.3.2 各提取成分的溶血活性
    5.4 讨论
    5.5 小结
结论
参考文献
攻读硕士学位期间发表学术论文情况
致谢



本文编号：3983545