邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯降解菌的分离鉴定及降解特性研究

发布时间：2017-07-17 14:00

  本文关键词：邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯降解菌的分离鉴定及降解特性研究

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【摘要】：邻苯二甲酸酯类化合物(phthalic acid esters,PAEs,又名酞酸酯)是一类人工合成、用途广泛的有机化合物。主要用在塑料增塑剂、油漆、涂料等领域。使用最广泛的PAEs是邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(di(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP),它极易转移到环境中。研究表明,DEHP有类雌激素效应,有致癌、致畸、致突变的作用。已被列为“优先控制污染物”。生物降解是降解DEHP的主要途径。本研究旨在从受污染的环境中分离出降解DEHP的菌株,并对其相关性质进行研究,力求能为修复受DEHP污染的环境提供理论参考和菌源。(1)采用梯度压力驯化法从山东菏泽被石油污染的土壤中分离出一株DEHP降解菌,命名为YC-RL4。通过革兰氏染色、电镜观察、Biolog鉴定确定其为汇合分支杆菌(Mycobacterium confluentis),革兰氏阳性。(2)通过单因素实验获得了菌株YC-RL4降解DEHP的最佳条件:降解最佳p H为9,生长最佳p H为8;降解最佳温度为20℃,生长最佳温度为30℃;该菌株降解DEHP和生长的最佳Na Cl浓度为3%,能耐受的最高Na Cl浓度为7%。该菌株耐受DEHP的最大浓度在700-800mg/L之间。(3)底物谱实验证明菌株YC-RL4能降解多种DEHP类似物,说明其具有较宽的底物范围以及较强的环境适应能力。(4)在发酵罐模拟实验中菌株YC-RL4能够利用DEHP为唯一碳源生长,并且在反应过程中产生了酸性代谢产物,这为该菌株将来的工业化应用提供了依据。(5)通过实验获得了菌株YC-RL4对不同初始浓度的DEHP在不同时间的降解量,确定降解反应符合一级动力学模型。(6)用质谱检测了菌株YC-RL4在不同时间点降解DEHP的代谢产物,推测了代谢途径,为降解机理的深入研究提供了理论参考。
【关键词】：邻苯二甲酸酯 邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯 生物降解 酶促反应动力学
【学位授予单位】：牡丹江师范学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：X172
【目录】：

• 中文摘要3-4
• Abstract4-8
• 第1章 绪论8-14
• 1.1 邻苯二甲酸酯类化合物概述8-10
• 1.1.1 邻苯二甲酸酯类化合物8-9
• 1.1.2 邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯9-10
• 1.2 邻苯二甲酸酯类化合物降解的研究进展10-12
• 1.2.1 水解和光解10-11
• 1.2.2 生物降解11-12
• 1.3 本研究的目的和意义12-13
• 1.4 本研究的技术路线13-14
• 第2章 材料与方法14-24
• 2.1 材料与仪器14-15
• 2.1.1 材料来源14
• 2.1.2 主要仪器14
• 2.1.3 药品与试剂14-15
• 2.1.4 培养基15
• 2.2 实验方法15-24
• 2.2.1 DEHP降解菌的分离15-17
• 2.2.2 DEHP降解菌的鉴定17-19
• 2.2.3 环境因素对菌株YC-RL4降解DEHP的影响19-21
• 2.2.4 菌株YC-RL4的降解底物谱21-22
• 2.2.5 菌株YC-RL4降解DEHP的发酵罐模拟实验22
• 2.2.6 菌株YC-RL4降解DEHP的酶促反应动力学研究22-23
• 2.2.7 菌株YC-RL4降解DEHP的代谢途径初探23-24
• 第3章 结果与讨论24-41
• 3.1 实验结果24-37
• 3.1.1 DEHP降解菌的分离24
• 3.1.2 DEHP降解菌的鉴定24-28
• 3.1.3 环境因素对菌株YC-RL4降解DEHP的影响28-33
• 3.1.4 菌株YC-RL4的降解底物谱33-34
• 3.1.5 菌株YC-RL4降解DEHP的发酵罐模拟实验34-35
• 3.1.6 菌株YC-RL4降解DEHP的酶促反应动力学研究35-36
• 3.1.7 菌株YC-RL4降解DEHP的代谢途径初探36-37
• 3.2 讨论37-41
• 第4章 结论与展望41-44
• 4.1 主要结论41-42
• 4.2 不足与展望42-44
• 参考文献44-50
• 附录50-57
• 致谢57-58
• 攻读学位期间发表的学术论文58

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本文编号：553885