中国山楂果实中生理活性成分的HPLC分析研究

发布时间：2017-05-19 13:09

  本文关键词：中国山楂果实中生理活性成分的HPLC分析研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：山楂是一种重要的药食两用植物资源，，在我国种植栽培面积广阔，产量可观。药理研究表明，山楂具有多种重要的生理活性，以往研究表明，这些生理活性与山楂中所含的黄酮、前花青素、酚酸以及三萜酸等活性成分有关。本研究采用国产高效液相色谱仪建立了一套分析山楂果实中这些成分的HPLC分析方法，并用这种方法对中国8个省市的37个有代表性的山楂品种的绿原酸、表儿茶素、前花青素B2、B5、C1、金丝桃苷、Isoquercitrin、熊果酸和齐墩果酸等主要活性成分进行了分析，同时还考察了果实生长期这些成分的含量变化。所使用的高效液相色仪为大连依利特有限公司生产，由两台P200Ⅱ高压恒流泵、UV200Ⅱ紫外可变波长检测器以及Echrom98色谱工作站等部分组成。多酚分析的色谱条件为：色谱柱：HYPERSIL BDS C_(18)分析柱(200mm×4.6mm ID，5μm)；流动相A：20％甲醇(磷酸调pH=3.20)；B：30％乙腈(pH=3.20)，梯度程序(B％／min)：10/0，10/6，30/13，60/22，100/27，100/32，10/35；流速：0.6ml/min；温度：室温；检测波长：280nm。实验结果表明各主要活性成分分离较好，各组分回归方程的相关系数r为0.9991～0.9999，最低检出限为2.51～35.56ng，相对标准偏差RSD＜5.0％，回收率在93.9％～105.8％，35min完成一次分析。熊果酸和齐墩果酸的色谱分析条件为：色谱柱：HYPERSIL BDS C_(18)分析柱(200mm×4.6mm ID，5μm)；流动相：甲醇-水=90：10(pH=3.0)；流速：0.6ml/min；温度：室温；检测波长：210nm。熊果酸和齐墩果酸回归方程的相关系数分别为0.9999，0.9997；最低检限：2.80ng，2.81ng；回收率：98.33％，98.69％。这些方法具有操作简单，快速准确的优点，可作为山楂生药、提取物、制剂以及各种加工产品进行质量控制和分析检测方法。含量分析结果显示，中国山楂果实中的黄酮类物质主要为金丝桃苷和Isoquercitrin两种，含量一般不超过100mg/kg；三萜酸类物质中以熊果酸含量较高，平均为952mg/kg；而前花青素类物质的平均含量达到4000mg/kg，可以认为是山楂果实活性物质的代表性成分；不同品种之间活性成分含量差异显著，各种成分含量的相对标准偏差均在30％以上，反映了中国山楂种质资源的多样性；同一品种山楂中各种活性成分的含量之间具有相关性。另外发现山楂果实中活性成分含量随地理纬度的降低多酚含量有升高的趋势。山楂果实生长过程活性成分的含量变化分析结果表明，含量随生长发育呈规律性变化，7月上旬多酚含量达到最大值，前花青素总含量可达果实鲜重的1.36％以上，之后逐渐下降，10月上中旬果实成熟时，各活性成分含量略有回升。此外，在中国山楂果实中还发现一些未知物质，有待进一步研究。
【关键词】：中国山植 HPLC 前花青素 黄酮 酚酸 三萜酸 活性成分
【学位授予单位】：河北农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2004
【分类号】：TS207;O657.7
【目录】：

• 1 引言8-12
• 2 材料与方法12-14
• 2.1 试验材料12
• 2.1.1 植物材料12
• 2.1.2 仪器12
• 2.1.3 试剂12
• 2.2 试验方法12-14
• 2.2.1 试验样品处理方法12-13
• 2.2.2 试验方法13-14
• 3 结果与分析14-28
• 3.1 山楂果中黄酮、前花青素、酚酸物质梯度分析条件的确定14-18
• 3.1.1 检测条件的选择14
• 3.1.2 流动相组成的确定14-15
• 3.1.3 流动相pH值的确定15-16
• 3.1.4 分离组分的定性16-17
• 3.1.5 方法的线性回归方程、线性范围、检出限和精密度17
• 3.1.6 样品回收率的测定17-18
• 3.2 山楂果中齐墩果酸和熊果酸分析条件的确定18-19
• 3.2.1 检测波长的选择18
• 3.2.2 色谱流动相的选择18
• 3.2.3 方法的回归方程、精密度与检出限18
• 3.2.4 回收率的测定18-19
• 3.3 山楂果实中活性物质含量的测定19-23
• 3.3.1 山楂果实中黄酮、前花青素、酚酸含量的分析测定19-21
• 3.3.2 山楂果实中熊果酸和齐墩果酸含量的测定21-23
• 3.4 山楂果实生长期主要活性成分的含量变化23-28
• 3.4.1 山楂果实生长过程中黄酮含量的动态变化24
• 3.4.2 山楂果实生长过程中前花青素含量的动态变化24-25
• 3.4.3 山楂果实生长过程中酚酸含量的动态变化25-26
• 3.4.4 山楂果实生长过程中熊果酸和齐墩果酸含量的动态变化26-28
• 4 讨论28-32
• 4.1 山楂果实中活性成分色谱分析条件的选择28-29
• 4.1.1 山楂果实中黄酮、前花青素、酚酸的梯度色谱条件的选择和比较28
• 4.1.2 山楂果实中熊果酸和齐墩果酸色谱条件的选择28-29
• 4.2 山楂果实中活性成分含量的分析29-30
• 4.3 山楂果实成长过程中活性物质含量的动态变化30-32
• 5 结论32-34
• 6 参考文献34-42
• 在读期间发表的学术论文42-43
• 作者简历43-44
• 致谢44

【引证文献】

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本文编号：378773