前沿科研成果融入药物化学实验教学——细胞内溶酶体定位的NO新型荧光探针的

    本文设计了一个合成细胞内溶酶体定位的NO荧光探针并进行细胞成像的本科药物化学实验。首先，将可对NO响应的荧光物质进行结构修饰，通过一定的连接方式将溶酶体定位基团引入荧光物质中，合成了新型NO荧光探针；其次，对所合成的探针进行简单的体外性能测试，通过对NO溶液滴定的荧光、吸收光谱的分析以及对不同p H值和不同生物分子的荧光响应情况的评估，揭示了该探针的高灵敏度、高选择性；最后，通过细胞成像实验，证实了探针能选择性检测溶酶体内的内源性的NO。将该实验引入到药物化学实验教学中，可以提升学生的实验操作能力，了解当前药物化学实验的前沿研究方向，增强学生的科研素养，为其将来更好地从事药物化学相关的研究打下基础。

 

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文章目录

 

1 实验目的

2 实验原理

3 实验药品和仪器

    3.1 药品

    3.2 仪器

4 实验步骤

    4.1 探针LysoNO-DCM的合成

        4.1.1 DCM-COOH的合成

        4.1.2 LysoNO-DCM的合成

    4.2 探针体外活性分析

        4.2.1 各类储备液的制备

        4.2.2 体外NO作用的光谱检测

    4.3 探针的细胞成像实验

        4.3.1 细胞培养

        4.3.2 探针的细胞溶酶体定位能力的评估

        4.3.3 探针对内源性NO的成像能力评估

5 结果与分析

    5.1 探针的结构分析

    5.2 体外检测数据分析

        5.2.1 探针的NO浓度依赖性的荧光响应和检测限评估

        5.2.2 pH环境对荧光响应的影响

        5.2.3 NO检测的选择性评价

    5.3 细胞成像实验

        5.3.1 探针的细胞溶酶体定位实验

        5.3.2 探针监测内源性NO的细胞成像实验

6 实践总结

7 教学建议