92广西六堡茶化学成分分离、活性分析及茶褐素提取工艺研究

发布时间：2016-11-20 10:27

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广西六堡茶化学成分分离、活性分析及茶褐素提取工艺；表4-6酶解时间对茶褐素提取率的影响；Table4-6Theeffectofenzym；酶解时间/min产率%；2022.526；4023.773；6022.683；8022.277；10021.507；提取率/%；酶解时间/min；图4-4酶解时间与茶褐素提取率的关系；Figure4-4Relationsh

广西六堡茶化学成分分离、活性分析及茶褐素提取工艺研究

表4-6 酶解时间对茶褐素提取率的影响

Table 4-6 The effect of enzymolysis time on the extraction rate of TBs

酶解时间/min 产率 %

20 22.526

40 23.773

60 22.683

80 22.277

100 21.507

提取率/ %

酶解时间/ min

图 4-4 酶解时间与茶褐素提取率的关系

Figure 4-4 Relationship between the enzymolysis time and the ratio

如图4-4所示，在酶解时间的单因素实验中，茶褐素的提取率在选取的时间范围内，随着时间的增长同样呈现先增长后下降的趋势。最高的酶解时间为40 min。在20-40 min的时间段内，茶褐素粗品的提取率显著增高，说明延长时间使得纤维素酶对底物进行充分的酶解，超过40 min时，酶解基本完成，延长时间反而降低了茶褐素粗品的提取率，因此我们选取40 min作为纤维素酶酶解的最佳时间。

4.3.2 正交试验结果分析

在单因素试验中，由于条件单一，实验的结果往往分析性较低。正交试验是一种综合安排和分析实验因素的设计方法。从实验因素的全部水平组合中挑选具有代表性的水平组合进行实验。根据单因素的实验结果与分析，为了找出茶褐素提取的最优条件，本实验中我们选取酶解温度(A)、酶解用量(B)、PH值(C)、酶解时间(D)作为正交试验的四种因素，每个因素选取三个水平进行L9(34)实验。正交因素水平表(表一)及正交实验设计表(表二)如下：

广西师范学院硕士学位论文

表4-7 水平因素 Table 4-7 Level factors

因素水平

水平 1 2 3

A (酶解温度/℃)

30 40 50

B (酶解用量/mg)

10 20 30

表4-8 正交试验 Table 4-8 Orthogonal test

序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 K1 K2 K3 R

根据实验数据，通过对计算极差R值进行直观分析可知，正交试验中的四种影响因素对了六堡茶中茶褐素的提取率的影响顺序是：D>C>B>A，即酶解时间>pH值>酶用量>酶解温度。将实验中提取率的数据对比，可知A1 B2 C2 D2的条件下，提取率是最高的，可达24.50%。

A 30 30 30 40 40 40 50 50 50 22.412 23.063 22.811 0.651

B 10 20 30 10 20 30 10 20 30 22.578 23.300 22.408 0.892

C 3 4 5 4 5 3 5 3 4 22.241 23.843 22.202 1.641

D 20 40 60 60 20 40 40 60 20 23.418 23.233 21.634 1.784

提取率% 22.363 24.503 20.371 22.832 23.697 22.659 22.538 21.700 24.194

C (pH值)

3 4 5

D (酶解时间/min)

20 40 60

4.4 结论

在单因素的基础上利用正交试验的全面性，设计了四因素三水平的L9 (34)试验。对实

广西六堡茶化学成分分离、活性分析及茶褐素提取工艺研究

验结果通过极差分析，找出了纤维素酶辅助法提取六堡茶中茶褐素粗品的最佳工艺条件。考虑到酶用量的增加会提高成本，同时温度过高也会影响纤维素酶的活性，而且纤维素酶只有在最适的pH值条件下才能有最高的活性，因此我们选取当茶叶原料为10 g、料液比为1：10、超声时间为30 min、回流时间为40 min (3次) 的条件下，六堡茶中茶褐素的最优提取条件是：纤维素酶的用量为20 mg、酶解温度为30 ℃、酶解时间为20 min、pH=4，在此条件下茶褐素粗品的提取率可达到24.50%。

广西师范学院硕士学位论文

参考文献

[1] 杨锦泉. 广西特产-六堡茶[J]. 茶业通报, 1999, 21(4): 31-31.

[2] 秘鸣, 周红杰. 开发前景广阔的茶叶生化产品茶色素[J]. 农牧产品开发, 1997 (8):

39-40.

[3] 梁名志, 夏丽飞, 陈林波, 等. 普洱茶渥堆发酵过程中理化指标的变化研究[J]. 中国农

学通报, 2006, 22(10): 321-325.

[4] Fullbrook P D. The use of enzymes in the processing of oilseeds[J]. Journal of the American

Oil Chemists' Society, 1983, 60(2): 476-478.

[5] Dominguez H, Nunez M J, Lema J M. Oil extractability from enzymatically treated soybean

and sunflower: range of operational variables[J]. Food Chemistry, 1993, 46(3): 277-284.

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第五章大孔树脂纯化茶褐素的研究

六堡茶属于黑茶中的一种，产于广西苍梧县，在清嘉庆年间即被列为名茶[1]。六堡茶具有黑茶所特有的性质，对于黑茶中的茶色素的研究较早就已有报道，但是大多集中在普洱茶和乌龙茶[2]。大孔树脂是一种高分子聚合物，不溶于酸碱和有机溶剂，在天然产物提取分离中是一种常用的方法[3]。湖南农业大学的刘亚林曾选取不同型号的大孔树脂对普洱茶中的乙酸乙酯相的活性成分进行纯化研究[4]，此后湖南农业大学易恋选取了不同型号的大孔树脂对普洱茶中的茶褐素进行纯化，选取了较优的树脂型号[5]。本文采用不同型号的大孔树脂对六堡茶中的茶褐素进行吸附解脱试验，，期望达到纯化茶褐素的目的。

5.1 实验材料与方法 5.1.1 实验材料

D900、DM-301、ADS-17、S-8型号大孔吸附树脂（均购于郑州勤实科技有限公司）；D101（购于天津市光复精细化工研究所）；六堡茶由广西梧州茶厂提供

5.1.2 实验仪器

表5-1 实验主要仪器

Table 5-1 Main Experiment Instrument

仪器名称

100g手提式高速中药粉粹机 DFT-100 数显pH计标准筛三用恒温水箱电热恒温干燥箱电子调温电热套超声波清洗机循环水式多用真空泵旋转蒸发仪

双光束紫外分光光度计电子天平

PHS-25

孔径0.600 mm，60目 HH-W420 400-S-II 98-1-B KO-400B SHB-III R-1001N TU-1901 EL-204

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