表达H5亚型禽流感病毒不同形式HA基因重组鸭瘟病毒的构建及HA表达形式的鉴定

发布时间：2017-10-13 10:42

  本文关键词：表达H5亚型禽流感病毒不同形式HA基因重组鸭瘟病毒的构建及HA表达形式的鉴定

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【摘要】：为研究禽流感病毒(AIV)血凝素(HA)基因的信号肽以及跨膜区对HA蛋白在重组病毒中表达的影响,本研究以鸭瘟病毒(DEV)为载体,在DEV基因组的US7和US8基因之间通过同源重组插入去除信号肽或跨膜区的H5N1亚型AIV HA基因编码序列,分别构建了缺失信号肽HA基因的DEV重组病毒(r DEV-PK)和缺失跨膜区HA基因的DEV重组病毒(r DEV-PSM),并传至20代,经PCR对插入的外源基因编码序列扩增及序列测定,表明外源基因能够在重组病毒基因组中稳定存在;间接免疫荧光和western blot鉴定结果表明去除信号肽的HA蛋白能够在重组病毒感染的鸡胚成纤维细胞浆中正确表达,而去除跨膜区的HA蛋白能够在感染细胞的培养液中检测到。本研究为表达H5N1亚型AIV HA基因重组DEV载体弱毒疫苗在鸭体内免疫机制的进一步研究奠定基础。
【作者单位】： 甘肃农业大学动物医学学院;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点开放实验室;
【关键词】： 禽流感病毒 HA蛋白 重组鸭瘟病毒 信号肽 跨膜区
【基金】：国家自然科学基金(31302064)
【分类号】：S852.65
【正文快照】： 禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)是正粘病毒科有囊膜多形态单股负链RNA病毒。多数家禽均可以感染发病,严重威胁养禽业,也是最重要的人兽共患病病原之一,并威胁人类健康[1-3]。AIV通过结构蛋白识别宿主细胞表面受体并与受体结合感染细胞,其中HA蛋白作为最重要的保护性抗

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本文编号：1024401