极端嗜酸热古菌Acidianus manzaensis胞外硫活化蛋白质基因的筛选及鉴定

发布时间：2017-10-14 06:03

  本文关键词：极端嗜酸热古菌Acidianus manzaensis胞外硫活化蛋白质基因的筛选及鉴定

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【摘要】：以极端嗜酸热古菌(Acidianus manzaensis)为研究对象,基于比较蛋白质组学的研究方法筛选和鉴定了13个A.manzaensis胞外与硫活化相关的蛋白质基因,并从转录水平对其进行了验证。首先通过80℃缓慢摇动水浴30 min分别对A.manzaensis在单质硫(S0)和亚铁(Fe2+)为能源底物进行生长时的胞外蛋白质进行提取,并用双向电泳(2-DE)进行分离,然后选取在S0底物下差异表达的蛋白质斑点进行串联飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF)鉴定和生物信息学分析及功能预测,最后用实时定量PCR(RT-q PCR)对筛选得到的胞外S0活化相关蛋白基因进行转录水平的验证;最终获得了13个极端嗜酸热古菌A.manzaensis胞外活化S0相关的蛋白质基因。筛选得到的蛋白质中一半以上含有较多的半胱氨酸残基(Cys),说明胞外富含巯基(-SH)的蛋白参与了S0活化;其中谷氧还蛋白(glutaredoxin)和FAD键合氧化酶均含有-CXXC-结构域,且两种蛋白质的基因表达量较高,说明含有-CXXC-结构域的蛋白质在极端嗜酸热古菌A.manzaensis活化S0的过程中起重要的作用。
【作者单位】： 中南大学资源加工与生物工程学院;中南大学教育部生物冶金重点实验室;
【关键词】： Acidianus manzaensis 比较蛋白质组学 胞外蛋白质 硫活化
【基金】：国家自然科学基金项目(51274257)
【分类号】：Q936
【正文快照】： 硫化矿生物浸出技术在复杂低品位原生硫化矿生物提取、金矿表面硫化矿的氧化预处理、以及硫化矿尾矿的治理和金属回收等方面可以发挥重大作用[1]。常见的硫化矿生物浸出微生物可根据其最适生长温度划分为常温微生物(30-40℃)、中度嗜热微生物(40-60℃)和极端嗜热微生物(80℃以，

本文编号：1029376