黄酒酵母ADH2、ALD2和ALD6基因敲除对黄酒中乙醛代谢的影响

发布时间：2017-10-18 08:51

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【摘要】：以工业黄酒酵母N85尿嘧啶缺陷型单倍体2a-u3(MATa ura3)为出发菌株,研究分别敲除乙醛代谢相关酶的编码基因ADH2、ALD2和ALD6对乙醛代谢的影响。采用融合PCR技术分别构建乙醇脱氢酶编码基因ADH2敲除组件"ADH2S-URA3-ADH2X"和乙醛脱氢酶编码基因ALD2和ALD6敲除组件"ALD2S-URA3-ALD2X"和"ALD6S-URA3-ALD6X",转化N85尿嘧啶缺陷型单倍体菌株后,以尿嘧啶缺陷型的恢复为筛选标记,分别获得ADH2、ALD2和ALD6基因缺失菌株2a-A2(Δadh2)、2a-D2(Δald2)和2a-D6(Δald6)。分别将获得的工程菌与亲本菌株以及前期构建的丙酮酸脱羧酶基因PDC5缺失菌株2a-P5(Δpdc5)进行实验室规模的黄酒发酵实验。结果表明,与亲本菌株2a相比,工程菌2a-A2发酵液中乙醛含量降低了7.14%,而2a-P5发酵液中乙醛含量降低了32.68%,说明工业黄酒酵母乙醛的生成存在糖代谢途径,并且乙醛主要由丙酮酸脱羧而来;工程菌2a-D2和2a-D6发酵液中乙醛含量与亲本相比分别增加了144.91%和88.87%,说明乙醛脱氢酶是黄酒中控制乙醛降解的关键酶,而且ALD2基因在乙醛转化为乙酸过程中发挥更关键的作用。
【作者单位】： 江南大学粮食发酵工艺与技术国家工程实验室;江南大学工业生物技术教育部重点实验室;江南大学生物工程学院;中国绍兴黄酒集团有限公司国家黄酒工程技术研究中心;
【关键词】： 黄酒酵母 基因敲除 ADH ALD和ALD 乙醛
【基金】：973项目(2012CB720802);973项目(2013CB733602) 江苏高校优势学科建设工程资助项目 高等学校学科创新引智计划(111计划)资助项目(111-2-06) 绍兴市科技计划项目(2015A31012)
【分类号】：TS262.4
【正文快照】： 黄酒是世界三大古酒之一,同时也是中华民族传统酒,因其蛋白质、氨基酸、维生素和对人体有益的微量矿物元素含量丰富,被誉为“液体蛋糕”[1]。黄酒在酿造过程中会产生一定量的醛类物质[2],包括乙醛、糠醛、苯乙醛、异戊醛、苯甲醛等。其中,乙醛含量最高(29.9~137.48 mg/L),风味

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本文编号：1054085