基于线粒体COⅠ和COⅡ基因的沙果小食心虫与梨小食心虫的分子鉴定

发布时间：2017-10-25 05:34

  本文关键词：基于线粒体COⅠ和COⅡ基因的沙果小食心虫与梨小食心虫的分子鉴定

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【摘要】：【目的】建立基于线粒体COⅠ和COⅡ基因序列的沙果小食心虫、梨小食心虫分子鉴定方法。【方法】田间采集试虫,利用PCR和基因测序技术,扩增2种食心虫的线粒体COⅠ和COⅡ基因,将获得的COⅠ和COⅡ基因序列在GenBank中进行BLAST比对,并通过GeneDoc软件分析基因序列相似性,利用Mega 5.05软件分别计算基于COⅠ和COⅡ基因序列的遗传距离,并分别构建COⅠ和COⅡ基因的系统发育树。【结果】在分析的2种食心虫样本中,沙果小食心虫COⅠ基因的种内相似度在99.4%以上,梨小食心虫COⅠ基因的种内相似度在99.6%以上,2种食心虫COⅠ基因的种间相似度为95.0%~95.6%;沙果小食心虫COⅡ基因的种内相似度在99.0%以上,梨小食心虫COⅡ基因的种内相似度在99.3%以上,2种食心虫COⅡ基因的种间相似度为94.6%~95.5%;2种食心虫COⅠ基因种间存在30个稳定变异位点,COⅡ基因种间有26个稳定变异位点。2种食心虫种内遗传距离为0.001~0.006(COⅠ)和0.001~0.010(COⅡ),种间遗传距离为0.046~0.052(COⅠ)和0.047~0.057(COⅡ),基于COⅠ和COⅡ基因的种间遗传距离均显著大于种内遗传距离。分别构建COⅠ和COⅡ基因单倍型的系统发育树,结果显示,在2个基因的系统发育树上,2种食心虫的基因序列分别位于不同的进化支,且置信度均达到100%,同种食心虫的基因序列位于相同的进化枝。【结论】可以根据本研究所用的COⅠ和COⅡ基因序列的差异性,进行沙果小食心虫和梨小食心虫的分子鉴定。
【作者单位】： 西北农林科技大学植物保护学院农业部西北黄土高原作物有害生物综合治理重点实验室植保资源与病虫害治理教育部重点实验室;
【关键词】： 沙果小食心虫 梨小食心虫 COⅠ基因 COⅡ基因 单倍型 分子鉴定
【基金】：国家自然科学基金项目(31071687) 教育部高等学校博士学科点专项科研基金(博导类)项目(20110204110001) 西北农林科技大学人才引进项目 国家科技支撑计划项目(2012BAK11B03)
【分类号】：S433
【正文快照】： 沙果小食心虫(Grapholita dimorpha Komai)和梨小食心虫(Grapholita molesta Busck)是重要的蛀果害虫,二者均属于鳞翅目(Lepidoptera)卷蛾科(Tortricidae)。沙果小食心虫寄主植物为苹果、沙果、李等,在我国部分地区报道有发生[1-2]。梨小食心虫又名东方果蛀蛾,寄主植物主要为

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本文编号：1092344