智力发育迟缓新候选基因POSTN对脑损伤神经元体外保护作用研究

发布时间：2017-10-25 07:11

本文关键词：智力发育迟缓新候选基因POSTN对脑损伤神经元体外保护作用研究

【摘要】：目的通过对1例智力发育迟缓患儿全外显子组测序(WES),旨在为该患儿寻找潜在的致病原因。方法纳入1例在复旦大学附属儿科医院(我院)住院期间诊断不明患儿,采用Sure Selct Human All Exon捕获试剂盒和Illumina Hi Seq2000测序平台,行WES检测;数据分析采用我院分子诊断中心建立的高通量测序数据分析流程;结果采用Sanger直接测序法进行验证。建立体外大鼠神经元原代培养和糖氧剥夺(OGD)模型,分为空白对照组(Sham+PBS亚组、Sham+POSTN亚组)、OGD组(OGD+PBS亚组和OGD+POSTN亚组),采用免疫荧光、LDH毒性检测、Brd U和TUNEL方法检测POSTN对2组及其亚组神经元生长增殖和凋亡的影响。结果患儿WES共检测到532 151个变异,筛选后检测到POSTN基因(NM_006475)外显子23:c.A2475T:p.G825G和外显子19:c.G2251A:p.E751K。Sanger测序显示p.G825G来自母亲,p.E751K来自父亲,符合复合杂合遗传模式。培养的大鼠原代神经元(MAP-2或Neu N阳性细胞)中有内源性POSTN的表达。LDH活性Sham+POSTN亚组与Sham+PBS亚组差异无统计学意义,OGD+POSTN亚组与OGD+PBS亚组差异有统计学意义。OGD+PBS亚组致神经元细胞缺氧2、6、12 d后比Sham+PBS亚组Brd U阳性的神经元数量增高,TUNEL阳性神经元凋亡也增高;OGD+POSTN亚组各时间点神经元增殖较OGD+PBS亚组均明显增高,但凋亡减少。结论 POSTN可以减少脑损伤后LDH对于神经元的细胞毒性,促进损伤后神经元的增殖,抑制凋亡。
【作者单位】：复旦大学附属儿科医院儿科研究所;复旦大学附属儿科医院分子诊断中心;复旦大学附属儿科医院新生儿科;
【关键词】： POSTN基因 突变 全外显子序列检测 神经元
【基金】：卫生局重要疾病攻关项目:2013ZYJB0015 国家自然科学青年基金资助项目:81401010 上海市浦江人才计划:14PJ1401700
【分类号】：R749.94
【正文快照】： 细胞外基质对于中枢神经系统的作用越来越受到关注,其中的糖蛋白(如纤连蛋白),对神经元保护、神经突起生长和神经干细胞迁移都具有不同作用[1]。Periostin(POSTN)是一种93 k D的分泌性细胞外基质蛋白,表达和作用于多种细胞和组织。POSTN能通过成骨细胞增殖、分化、黏附和生长

【参考文献】

中国期刊全文数据库前1条

1 黎籽秀;刘博;徐凌丽;杨琳;王慧君;周文浩;;高通量测序数据分析和临床诊断流程的解读[J];中国循证儿科杂志;2015年01期

【共引文献】

中国期刊全文数据库前3条

1 董辰;孙碧君;杨琳;吴冰冰;周文浩;王慧君;;椎体软骨发育不良伴免疫调节异常1例基因诊断及文献复习[J];临床儿科杂志;2016年08期

2 林伊凤;杨琳;马思敏;卢宇蓝;王慧君;陈龙霞;周文浩;;智力发育迟缓新候选基因POSTN对脑损伤神经元体外保护作用研究[J];中国循证儿科杂志;2016年03期

3 杨琳;董辰;魏泽峻;卢宇蓝;吴冰冰;王慧君;周文浩;;基于快速和常规全外显子组分析技术对遗传性疾病的诊断程序比较[J];中国循证儿科杂志;2016年02期

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库前2条

1 眭维国;李丽萍;车文体;陈洁晶;欧明林;汤冬娥;李欢;戴勇;;人类遗传疾病中常见变异和罕见变异的研究策略[J];国际检验医学杂志;2011年16期

2 庄永龙,周敏,李衍达,沈岩;人类遗传突变数据库及其应用[J];遗传;2004年04期