hns基因对大肠埃希菌生物膜形成能力的影响

发布时间：2017-10-26 08:09

  本文关键词：hns基因对大肠埃希菌生物膜形成能力的影响

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【摘要】：目的建立大肠埃希菌Red重组系统无痕敲除方法,探讨hns基因对大肠埃希菌生物膜形成能力的影响。方法以大肠埃希菌MG1655为研究对象,将p KD46质粒转化入MG1655感受态细胞。以质粒p KD3为模板扩增氯霉素抗性基因片段,并将其转化入MG1655/p KD46,氯霉素抗性平板筛选阳性克隆。利用p CP20质粒删除氯霉素抗性基因,构建MG1655 hns基因缺失菌株。96孔板结晶紫染色法分析MG1655 hns基因缺失株生物膜形成能力的变化。苯酚-硫酸法检测细菌胞外多糖含量。结果氯霉素抗性基因消除后的hns基因缺失株PCR产物长度为434 bp,测序鉴定正确,成功构建MG1655△hns基因缺失株。MG1655△hns菌株生物膜形成能力和胞外多糖产生显著低于MG1655(P0.01)。结论利用Red重组技术成功构建出MG1655△hns菌株,hns基因对细菌生物膜的形成具有重要的调控作用。
【作者单位】： 第三军医大学西南医院药剂科;
【关键词】： 大肠埃希菌 生物膜 胞外多糖 hns基因 基因敲除
【基金】：国家自然科学基金青年科学基金(81301397)~~
【分类号】：R446.5
【正文快照】： 大肠埃希菌(Escherichia coli,E.coli)是临床分离率最高的革兰阴性菌,在医院获得性及社区获得性感染中较为常见。形成生物膜的大肠埃希菌可以逃避抗菌药物和宿主免疫系统的攻击,具有高度的耐药性,并可在生物膜解离后导致新的感染,这一过程使感染趋于慢性化且难于控制[1-2]。H-

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