基因Ⅰ型和基因Ⅲ型日本脑炎病毒RT-LAMP鉴别检测方法的建立

发布时间：2017-10-31 03:20

  本文关键词：基因Ⅰ型和基因Ⅲ型日本脑炎病毒RT-LAMP鉴别检测方法的建立

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【摘要】：为建立一种快速、灵敏、特异的鉴别基因Ⅰ型和基因Ⅲ型日本脑炎病毒(JEV)的反转录-环介导等温扩增方法,根据Gen Bank中登录的基因Ⅰ型和基因Ⅲ型JEV毒株基因序列,分别设计了1套基因Ⅰ型和基因Ⅲ型特异性RT-LAMP引物,并以此引物分别建立了基因Ⅰ型和基因Ⅲ型特异性RT-LAMP方法。结果显示,基因Ⅰ型和基因Ⅲ型特异性RT-LAMP方法均能在1 h内完成对相应基因型JEV RNA的扩增,并与猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒、猪细小病毒和伪狂犬病病毒无交叉反应。灵敏性试验结果显示,基因Ⅰ型和基因Ⅲ型JEV特异性RT-LAMP方法均能扩增出24 copies的JEV RNA。本研究建立的基因Ⅰ型和基因Ⅲ型JEV特异性RT-LAMP检测方法具有灵敏性高、特异性好、简便、快速的特点,能够快速对JEV进行检测及基因Ⅰ型和基因Ⅲ型的鉴别,具有广泛的应用价值。
【作者单位】： 四川农业大学动物医学院猪病研究中心;
【关键词】： 日本脑炎病毒 基因Ⅰ型 基因Ⅲ型 反转录-环介导等温扩增 鉴别
【基金】：四川省科技计划项目(2013SZ0068)
【分类号】：S852.65
【正文快照】： 流行性乙型脑炎(epidemic encephalitis B)又称日本乙型脑炎,是由日本脑炎病毒(Japanese cephali-tis virus,JEV)引起的一种蚊媒性人兽共患传染病,猪是本病的主要传染源,主要表现为新生仔猪脑炎和种猪繁殖障碍[1]。JEV属黄病毒科(Flaviridae)、黄病毒属,其基因组为单股正链RNA

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